男性乳腺浸润性导管癌超声表现与Ki-67、HER-2 表达的相关性研究

曾小科，王学梅，陈治光，李响，李美樵，李子怡

（中国医科大学附属第一医院，辽宁 沈阳 110001）

男性乳腺癌（Male breast cancer，MBC）是一种罕见的特殊类型乳腺癌，发病率约为1/100 000，约占所有乳腺癌患者的1%[1]。虽然其发病率较低，但在全球范围内呈上升趋势[2]。MBC 病理分型以乳腺浸润性导管癌（Breast invasive ductal carcinoma，IDC）最为常见，占MBC 的70%～95%[3]。Ki-67 是判断细胞增殖最常用的免疫组化标记物[4]，可作为乳腺癌治疗、复发、预后重要判断指标之一[5]。HER-2过度表达发生在20%～30%的女性乳腺癌（Female breast cancer，FBC）中，是肿瘤侵袭力强的预后标志[6]。目前有关男性IDC 超声表现与相关病理分子关系的研究较少,因此本研究主要探究男性IDC超声征象与Ki-67、HER-2 表达情况的关系，旨在为男性IDC 诊治提供更多有价值的参考信息。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析中国医科大学附属第一医院2011年10 月—2021 年2 月经手术病理确诊的男性IDC患者26例，年龄35～86岁，平均（65.85±13.35）岁。

纳入标准：①经手术病理证实为IDC，术后均行Ki-67、HER-2 免疫组化评估；②术前均实施乳腺、双侧腋窝超声检查；③均为初发及单侧单发乳腺癌结节，且术前未接受放疗、化疗、内分泌、中药等相关抗癌治疗。

排除标准：①合并其他恶性肿瘤、双侧乳腺癌、多灶乳腺癌等；②超声检查图像质量较差，无法准确审阅超声征象。

1.2 仪器与方法

使用Supersonic Aix Plorer 超声诊断仪，线阵探头4～15 MHz；HITACHI Preirus 超声诊断仪，线阵探头5～12 MHz。

1.2.1 超声声像图评估方法

超声检查由具有3 年以上经验的专业乳腺超声检查医师完成，检查完成后，图像自动上传至图像存储系统，从中导出本研究26 例患者的超声声像图，并由2 名经验丰富的超声诊断医师（均有10 年以上经验）进行双盲阅片，阅片意见不一致时，通过协商达成一致。结合2013 年版乳腺影像学报告与数据系统（Breast imaging reporting and data system from ultrasonography，BI-RADS-US）[7]提出的乳腺超声影像词典来记录超声结果：包括形态（圆形、椭圆形、不规则形），大小（肿块最长径＜2 cm，≥2 cm），回声模式（无回声、低回声、等回声、高回声），边缘（光整、不光整），后方回声衰减（有、无），内部微钙化（有、无），方位（与皮肤关系：平行位、非平行位），彩色多普勒血流显像模式观察肿块血流情况，其血流评定采用Adler 半定量法（0～3 级）[8]。

1.2.2 免疫组织化学染色

患者术后病灶标本使用10%的福尔马林（甲醛）溶液固定、干燥后石蜡包埋，4 μm 厚切片，常规苏木精-伊红染色，3，3-二氨基联苯胺（DAB）染色切片进行免疫组织化学检查。

1.2.3 免疫组织化学评估

记录所有患者病理诊断资料并根据2014 年版乳腺癌HER-2 检测指南[9]，定义－～＋为HER-2 阴性；＋＋＋为HER-2 阳性；HER-2 为＋＋时，荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization，FISH）检测基因扩增为HER-2 阳性，反之为阴性。Ki-67 指数表示为染色阳性的细胞在该区域的浸润性癌细胞总数中所占的百分比，定义阳性细胞≥14%为Ki-67阳性，＜14%为Ki-67 阴性[10]。26 例患者雌激素受体（ER）和孕激素（PR）受体均为阳性，因此这两种生物标志物未纳入本研究中。

1.3 统计学方法

本研究所有数据均采取双人不交流录入excel表格，统计分析采用SPSS 22.0版，无序分类变量进行χ2检验（Fisher 精确检验），相关性采用Spearman分析，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 超声检查结果

26 例男性IDC 患者超声征象及所占比率具体见表1。

表1 26 例男性IDC 的超声征象

2.2 Ki-67、HER-2 结果

26 例男性IDC 有16 例Ki-67 阳性,阳性率为61.53%；5 例HER-2 阳性，阳性率为19.23%。

2.3 男性IDC 超声征象与Ki-67、HER-2 表达的关系

最长径≥2 cm、供血情况与Ki-67 表达呈正相关（r1=0.520，r2=0.664，P＜0.05），与其他超声征象相关性比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。最长径≥2 cm 与HER-2 表达呈正相关（r=0.444，P＜0.05），与其他超声征象相关性比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2 男性IDC 超声特征声像与Ki-67、HER-2表达的关系

3 讨论

MBC 发病原因尚不清楚。有研究认为MBC 发病的危险因素与雌激素分泌亢进、克氏综合征、肥胖、高龄、糖尿病、肝脏疾病、甲状腺疾病、睾丸功能障碍导致的雄激素缺乏、乳腺癌家族史、生育史有关[11-12]。在过去的20 年中，MBC 的发病率已增加了约26%[2]，且由于诊断延迟，MBC 通常出现在比FBC更晚期的阶段，表现出更晚期的疾病特征，如肿瘤体积较大，淋巴结受累，以及诊断时远处转移[13]。与女性相比，男性乳腺组织缺乏小叶单元，主要由脂肪组织、间质成分以及少量萎缩导管组成，这决定了MBC 主要组织学类型为浸润性导管癌。现阶段，MBC 治疗指南尚未建立，MBC 的治疗多参照FBC的治疗方案，且有研究显示针对Luminal A 和Luminal B 型乳腺癌，MBC 预后较FBC差[1]。

乳腺癌的生物标志物ER、PR、Ki-67、HER-2 的表达是划分乳腺癌分子亚型的重要依据，对乳腺癌治疗方案选择和预后判断具有指导意义[13]。Ki-67 在细胞周期的不同阶段表达有差异，在G0 期不表达，G1 和S 期表达水平较低，S 后期和G2 期表达明显增加，因此可通过检测其表达程度来判断肿瘤细胞增殖活性，高表达显示肿瘤细胞增殖活跃，恶性程度高，易出现侵袭、转移及复发[14]。HER-2 是一种具有酪氨酸激酶活性的跨膜受体蛋白，能通过激活一些促进肿瘤生长的信号通路（如RAS/RAF/MEK/ERK和PI3K/AKT/mTOR 通路）来调节细胞的增殖、分化和迁移[15]，HER-2 癌基因的扩增和蛋白过度表达与较差的预后和生存结局相关[12]。

超声检查是当前乳腺癌诊断首选无创检查手段，具有准确、实时、经济、便捷、软组织分辨力高等优点。Kim等[17]研究发现，超声检查上男性IDC 主要表现为乳晕下区域（乳头偏心）的实性低回声区、形态不规则，边缘不光整，可见毛刺或微分叶，血流信号丰富（图1），这与本研究结果基本符合，与之研究不同的是，本组病例还发现了男性IDC 病灶多呈非平行位，肿瘤最长径通常≥2 cm。

MBC 的超声表现对应于病理特征的关系已有报道[18]，超声显示肿块边缘不光整，例如边缘毛刺等，提示病变向周围组织浸润性生长，而不规则的形态表明病变边缘的生长和进展不一致，肿块与皮肤不平行提示病变通过组织平面边界发生扩散。MBC后方回声衰减不如FBC 明显，本组26 例中22 例（84.61%）均未见肿块后方回声衰减，原因主要是男性乳腺组织较少，无韧带、腺泡等复杂回声干扰，超声穿过时消耗声能少。有文献报道MBC 微钙化较少见，仅可发现13%～30%[19]，本组病例微钙化占30.77%（8/26），与其研究结果相符合。

Alfonso 等[20]发现MBC 中Ki-67 阳性表达占55%（23/43），而一项包括了2 175 例MBC 患者的meta 分析[21]显示Ki-67 阳性占比为46.5%，在本研究中，Ki-67≥14%占比为61.35%（16/26），造成这种差异的原因可能是样本例数的差异。

HER-2 在大约30%的FBC 中过度表达，而MBC 中HER-2 表达相对较低，Masci等[22]研究发现HER-2 在MBC 的表达约为15%（13/85）,Mangone等[21]研究得出MBC 中HER-2 扩增占比为14.7%，上述结果和本研究结果19.23%（5/26）相符合。

本研究对比男性IDC 超声声像图特征和免疫组化指标发现最长径≥2 cm、供血情况与Ki-67 表达呈正相关（r1=0.520，r2=0.664，P＜0.05），这可能表明在超声声像图上，肿块最长径越大，血供就越丰富，病灶越倾向于具有较高的Ki-67 指数，提示其增殖能力更强、恶性程度更高。最近一项关于18FFDG PET/CT 扫描参数与乳腺癌中Ki-67 表达的相关性研究显示，肿瘤体积越大，最大标准摄取值和平均标准摄取值越高，Ki-67 指数越大[23]，这和本研究结果相一致。本研究还发现最长径≥2 cm 与HER-2表达呈正相关（r=0.444，P＜0.05），这可能表明肿瘤最长径越大越倾向于具有较高的HER-2 评分，这些信息可能有助于临床上超声引导下多灶乳腺癌的穿刺活检判定或根据超声征象早期预判性抗HER-2靶向治疗以及对患者预后情况的评估，这有待进一步的前瞻性研究。

这项研究具有一定的局限性，首先，这是一项回顾性研究，患者例数相对较少，其次，腋窝淋巴结转移、边缘毛刺等超声恶性征象未纳入本研究指标中。

男性IDC 在超声声像图上具有一定的特征，且肿块直径越大越倾向于具有较高的HER-2 评分和较高的Ki-67 指数，肿块内血流信号越丰富越倾向于具有较高的Ki-67 指数。以上信息有助于男性IDC 的诊断并了解肿瘤侵袭性强弱，可能有助于判定多灶性肿瘤情况下的活检病变或早期预判性靶向治疗或评估预后情况，为临床诊疗男性IDC 提供更多有价值的信息。