两例罗伯逊易位携带者孕妇产前诊断结果分析

刘京伟

(临沂市中心医院，山东 临沂 276400)

平衡易位为常见的染色体结构异常，女性携带者在生育过程中易出现反复自然流产、胚胎停止发育和新生儿多发畸形等[1]。罗伯逊易位又称着丝粒融合，是一种特殊的染色体平衡易位，是指发生于近端着丝粒染色体D组(13号、14号、15号)和G组(21号、22号)组内或组间的易位方式，其在人群中的发病率约为1/1000[2]。罗伯逊易位携带者通常具有正常的发育表型，但可能导致反复流产、胎停和多发畸形等。因此，染色体易位携带者是有创性产前诊断的指征之一。本研究通过联合应用染色体核型分析和染色体微阵列分析(Chromosomal microarray analysis，CMA)技术对两例罗伯逊易位携带者孕妇进行分子细胞遗传学分析，以明确胎儿的染色体是否正常，为妊娠期遗传咨询提供诊断依据。

1 对象与方法

1.1研究对象 孕妇1，27岁，平素月经规律，孕3产0，连续2次胚胎停止发育，本次妊娠系宫内单胎妊娠，由于孕妇为罗伯逊易位携带者遂行中孕期介入性产前诊断，其核型为45, XX, der (13;14)(q10; q10)。孕妇2，32岁，平素月经规律，孕4产1，有胚胎停育史，由于孕妇为罗伯逊易位携带者遂行中孕期介入性产前诊断，其核型为45,XX,der(14;21)(q10;q10)。2例患者夫妻均非近亲结婚，否认家族遗传病史、药物过敏史及孕期有毒有害物质接触史。

1.2方法

1.2.1羊水细胞培养及染色体核型分析 超声下羊膜腔穿刺获取羊水20 mL，置于37℃含5%CO2的培养箱中培养6～7 d。制备染色体并进行G显带分析，分析标准参照人类细胞遗传学国际命名体制(2020版)。使用MetaClient染色体图像分析系统计数50个分裂相，分析10个核型，发现嵌合体或异常核型时加数至100个分裂相。

1.2.2CMA 按照QIAamp®DNA Mini Kit说明书进行羊水细胞基因组DNA提取。实验操作流程包括消化链接、PCR产物纯化、片段化、标记、芯片杂交、芯片洗染和芯片扫描。使用Affymetrix CytoScan 750K Array芯片进行羊水细胞基因组DNA检测。杂交后的芯片进行激光扫描(GeneChip 3000 Scanner with 7G upgrade)得到扫描图，再通过控制软件(GeneChip Command Console)和染色体分析软件(Affymetrix Chromosome Analysis Suite，ChAS 2.1)进行数据处理和分析。

2 结果

2.1胎儿染色体核型分析 孕妇1胎儿染色体核型为45,XN,der(13;14)(q10;q10)mat，为罗伯逊易位携带者，见封二图1A；孕妇2胎儿染色体核型为46,XN,der(14;21)(q10;q10),+21,mat，为罗伯逊易位型21三体综合征，见封二图1B。

2.2胎儿CMA结果 孕妇1胎儿在全基因组水平上未见染色体的缺失或重复，见封二图2A；孕妇2胎儿提示arr(21)×3，结合染色体核型分析确诊为易位型的21三体综合征，见封二图2B。

3 讨论

依据罗伯逊易位累积的两条染色体是否同源可分为非同源型罗伯逊易位和同源型罗伯逊易位两种类型[3]。非同源型罗伯逊易位携带者虽然表型正常，但在形成配子时理论上可形成6种配子，一种正常，一种为罗伯逊易位携带型，另外4种为三体或单体；前2种配子在与正常配子结合后，通常可以活产正常个体，而后4种三体或单体配子在与正常配子结合后，由于人类对单倍体耐受弱与三倍体，单倍体胚胎通常表现为自然流产或胚胎早期停止发育，而三倍体胚胎则存在活产的可能性[4]。同源型罗伯逊易位携带者在配子形成过程中只能产生两种类型配子，一种为三体，一种为单体，均为异常配子，受精后形成三体或单体合子，理论上不能生育正常后代[5]。

本研究对2例罗伯逊易位携带者孕妇进行分子细胞遗传学分析，结果显示：孕妇1胎儿染色体核型为45,XN,der(13;14)(q10;q10)mat，为罗伯逊易位携带者，未见染色体的缺失或重复；孕妇2胎儿染色体核型为46,XN,der (14;21)(q10;q10),+21,mat，为罗伯逊易位型21三体综合征。2例孕妇均为非同源型罗伯逊易位携带者，易位类型分别为D/D型和D/G型，并且都存在不良孕产史，因此均符合有创性产前诊断的指征。

综上所述，本研究通过应用染色体核型分析和CMA技术对2例罗伯逊易位携带者孕妇胎儿进行了精确诊断，为妊娠期遗传咨询提供了可靠依据。