胃癌患者HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表达情况及其与临床病理特征的关系

贾海娟 许俊卿

(1.西安交通大学第一附属医院消化科，陕西 西安 710089；2.兵器工业五二一医院病理科，陕西 西安 710065)

胃癌是一种常见的消化内科疾病，其在发病早期多无明显症状，但随着病情进展，可逐渐出现出现疼痛、呕血等症状，并可伴随胃穿孔、幽门梗阻等并发症，从而严重降低患者的生存质量。胃癌的发生、发展属于一种复杂的病变过程，其多与肿瘤新生血管生成、原癌及抑癌基因的表达及调控、肿瘤的免疫耐受性等有密切关系。人表皮生长因子受体2(HER2)不仅可以调控细胞增殖，抑制细胞凋亡，还可促进新生血管加速生成，进而参与肿瘤的侵袭与转移[1]；程序性死亡因子1配体(PD-L1)可参与调节生理性免疫应答反应，且在免疫耐受维持方面具有十分重要的意义[2-3]；p53可参与恶性肿瘤的发生、发展过程[4]；相关研究显示，axin不仅可以影响细胞的增殖、分化及凋亡，还可能参与肿瘤转移、浸润过程[5]。本研究旨在探讨胃癌患者HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表达情况及其与临床病理特征的关系。报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 回顾性分析2018年10月至2021年10月我院收治的116例胃癌患者的临床资料，所有患者经手术切除并病理证实，且均接受HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表达检查。所有胃癌患者中，男性76例，女性40例；年龄40～78岁，平均(66.37±7.36)岁；分化程度：中高分化73例，低分化43例；淋巴结转移：否39例，是77例。诊断标准：参照《胃癌》[6]中有关胃癌的诊断标准。纳入标准：符合上述诊断标准者；经病理学检查确诊者；临床资料完整者；均接受HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表达检查者等。排除标准：伴有其他恶性肿瘤者；严重肝、肾等功能损伤者；胃癌复发者；术前放化疗者等。本研究已通过我院医学伦理委员会审核批准。

1.2检测方法 所有患者入院后，均接受手术切除并病理学检查。病理、正常组织的HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表达检测均使用免疫组织化学染色法。HER2蛋白检测：采用二步法进行免疫组织化学染色，且操作严格参照规范步骤。使用HER2单克隆抗体(北京中杉金桥有限公司)及其相关试剂进行检测。由医师(病理科，2名及以上高年资)严格参照相关规定进行病理学分析，以得出免疫组化结果。根据其显色强度、阳性细胞率进行评分：(1)显色强度分为0分(未显色)、1分(淡黄色)、2分(棕黄色)、3分(棕褐色)；(2)在400倍显微镜下进行随机选取视野(5个)，阳性细胞率分为0分(<5%)、1分(5%～25%)、2分(26%～50%)、3分(51%～75%)、4分(>75%)。阴性：显色强度得分阳性细胞率得分介于0～1；阳性：显色强度得分阳性细胞率得分>1。PD-L1蛋白检测：使用抗PD-L1(SP142)兔单克隆抗体以及二抗(0.2 mL，RAB-0724)及其相关试剂进行检测，以上仪器与试剂均源于福州迈新生物技术开发有限公司，由医师(病理科，2名及以上高年资)依据相关标准进行病理学分析，以得出免疫组化结果。根据其显色强度、阳性细胞率进行评分：(1)显色强度分为0分(无着色)、1分(淡黄色)、2分(棕黄色)、3分(棕褐色)；(2)在400倍显微镜下进行随机选取视野(5个，100个细胞计数/视野)，阳性细胞率分为1分(≤10%)、2分(11%～50%)、3分(>50%)。阴性：显色强度得分阳性细胞率得分介于0～1；弱阳性：显色强度得分阳性细胞率得分≤3；强阳性：显色强度得分阳性细胞率得分>3。p53、axin蛋白检测：取胃癌组织及癌旁正常组织，使用甲醛固定，并常规石蜡包埋，取适量石蜡切片，使用兔SP检测试剂盒(上海烜雅生物科技有限公司)进行检测p53、axin蛋白，且操作严格参照规范步骤。阳性对照：已知的阳性片，axin、p53蛋白阳性细胞判断标准：axin蛋白定位于细胞浆，p53蛋白定位于细胞核，经显微镜观察，细胞(细胞核或细胞浆)中存在棕黄色颗粒沉淀便为阳性细胞，随机选取视野(10个)，对应蛋白阳性表达：阳性染色细胞占比≥10%。

2 结 果

2.1HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表达在胃癌组织及癌旁组织中的表达情况 与癌旁组织相比，胃癌组织的HER2、PD-L1、p53蛋白表达阳性率较高，而axin蛋白表达阳性率较低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表达在胃癌组织及癌旁组织中的表达情况比较[n(%)]

2.2胃癌组织中HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表达与临床病理特征的关系 胃癌组织中，低分化、淋巴结转移的PD-L1、HER2、p53蛋白阳性表达率高于阴性表达率，而axin蛋白阳性表达率低于阴性表达率，差异有统计学意义(P<0.05)，同时PD-L1、HER2、p53蛋白的阳性表达率分别与分化程度、淋巴结转移呈正相关；axin蛋白阳性表达率与分化程度、淋巴结转移呈负相关，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 胃癌组织中HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表达与临床病理特征的关系 [n(%)]

3 讨 论

胃癌主要是由环境、不良饮食习惯、遗传等因素导致胃黏膜上皮畑胞发生恶性肿瘤病变的一种病症。相关研究表明，即便胃癌患者获得了较为理想的治疗，但其5年内生存率仍处于较低水平，因此探究与胃癌发生、发展有关的标志物具有重要的临床意义[7]。

HER2属于一种原癌基因，其可通过产生异源或同源二聚体，以激活磷脂酰肌醇3激酶等通路，进而加速新生血管的形成，同时调控细胞增殖，抑制细胞凋亡，进一步加速肿瘤的发生与发展，在健康人体内，HER2表达多处于非激活状态，但当机体受到外界有害因素(如致癌等)刺激后，该因子将被激活，表达水平显著升高[8-9]；在部分炎症介质的刺激下，PD-L1可诱导多种细胞类型表达，以抑制免疫传递信号，使得肿瘤细胞逃过机体的免疫监视及杀伤系统，进而增加肿瘤的免疫耐受性，加速患者病情恶化，因此，在在恶性肿瘤细胞组织中，PD-L1可表现为高表达[10-11]；p53具有半衰期短的特点，因此在正常细胞组织中，多处于较低水平，但当p53水平升高时，则可提示p53蛋白基因已发生突变，进而可参与恶性肿瘤细胞的增殖，加快细胞分化，推动胃癌的发生和病情进展[12]；axin可通过与p53结合，以参与p53信号通路，使得p53产物磷酸化，进而提高抑癌基因p53的转录活性，发挥促进细胞凋亡的作用，因此，axin的高表达可抑制胃癌的发生与发展[13]。本研究结果显示，与癌旁组织相比，胃癌组织的HER2、PD-L1、p53蛋白表达阳性率较高，而axin蛋白表达阳性率较低，表明胃癌组织中HER2、PD-L1、p53蛋白表达升高，axin蛋白表达降低，与沙金平等[14]研究结果基本一致。分化程度、淋巴结转移均可作为胃癌临床病理特征指标，其中低分化、淋巴结转移则表明患者的病情越严重，而HER2、PD-L1、p53、axin蛋白有可参与胃癌的发生与发展，故胃癌临床病理特征指标与HER2、PD-L1、p53、axin蛋白水平间可存在密切的关系。本研究结果显示，胃癌组织中，低分化、淋巴结转移的PD-L1、HER2、p53蛋白阳性表达率高于阴性表达率，而axin蛋白阳性表达率低于阴性表达率

(P<0.05)，同时PD-L1、HER2、p53蛋白的阳性表达率分别与分化程度、淋巴结转移呈正相关；axin蛋白阳性表达率与分化程度、淋巴结转移呈负相关，表明胃癌患者HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表达水平与临床病理特征指标间可存在密切的关系，与赵玲娜等[15]研究结果基本一致。

综上，胃癌组织中HER2、PD-L1、p53蛋白表达升高，axin蛋白表达降低，且HER2、PD-L1、p53、axin蛋白表达水平与临床病理特征指标间可存在密切的关系，值得临床后期推广应用。