不同碳氮源对黄裙竹荪菌丝生长的影响

刘倾城,黄万兵,黄晓润,桂阳,刘宏宇,朱国胜*

（1.贵州省农作物品种资源研究所，贵州 贵阳 550006；2.贵州省食用菌育种重点实验室，贵州 贵阳 550006；3.贵州省食用菌现代农业产业技术体系资源育种功能实验室，贵州 贵阳 550006）

黄裙竹荪（Dictyophora muhicolor）是担子菌 亚门（Basidiomy cotina）、腹 菌纲（Gasteromycetes）、鬼笔目（Phallales）、鬼笔科（Phallaceae）、竹荪属（Dictyophora）的药食两用珍稀食用菌［1］。黄裙竹荪竹蛋一般呈卵状或球形，棕色或紫红色；菌柄为高8～12 cm的圆柱形且呈淡黄色，中空，海绵质；菌幕由菌盖下方展开，完全展裙后达6.5～8.0 cm，呈淡黄色钟型，且菌幕上分布有规则的3～4 cm网眼；菌盖高3～4 cm，钟形，表面覆有微臭粘性的棕褐色孢体［2-3］。黄裙竹荪多生长于竹林下的腐殖土、腐竹根或枯竹枝上，多分布于广西、贵州、云南等地区［4］。黄裙竹荪具有良好的防腐作用，同时作为药食两用的真菌，在治疗细菌性肠炎、脚气病等方面具有很好疗效［5］。长期以来，对黄裙竹荪的研究主要围绕其形态学、生物学特性、人工驯化栽培等方面，在药用价值上有少量研究报道［6］，但鲜见对黄裙竹荪营养生理特性的研究报道。为黄裙竹荪营养生理学特性研究和菌种选育提供理论依据，探索不同碳氮源对黄裙竹荪菌丝生长的影响，筛选出黄裙竹荪母种生长最适宜的碳源和氮源。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株 黄裙竹荪Dm-L1，由贵州省食用菌育种重点实验室提供。

1.1.2 培养基 基础培养基：葡萄糖10 g、蛋白胨2.5 g、酵母浸粉0.5 g、磷酸二氢钾0.9 g、硫酸镁1.8 g、全粉31 g、琼脂10 g、蒸馏水1 000 mL。

碳源培养基：分别用果糖10 g、甘露糖10.1 g、乳 糖9.5 g、蔗 糖9.5 g、麦 芽 糖9.5 g、可溶性淀粉9.1 g、红糖9.5 g代替基础培养基中的葡萄糖。

氮源培养基：分别用草酸铵4.52 g、尿素0.96 g、硫酸铵2.11 g、酵母浸粉4.7g、蛋白胨2.8 g代替基础培养基中的酵母浸粉和蛋白胨的总量。

1.2 方法

试验设置8种碳源培养基和5种氮源培养基，每种培养基重复5次。将各碳源培养基和氮源培养基经高温灭菌后倒入90 mm一次性培养皿中，待冷却凝固后，用直径10 mm打孔器取黄裙竹荪接种块种于培养皿中央，放置于25℃恒温培养箱中进行避光培养，采用十字划线法标记刚萌发时的菌落直径，培养21 d后记录菌丝直径并停止划线，计算菌丝生长速度并观察菌丝生长势。

菌丝生长速度=（最后一次所测菌落直径—接种块直径）/培养天数×2。

2 结果与分析

2.1 不同碳源培养基黄裙竹荪的菌丝生长速度和生长势

从表1可知，不同碳源培养基的黄裙竹荪菌丝生长速度存在差异，表现为可溶性淀粉＞果糖＞葡萄糖＞蔗糖＞乳糖＞甘露糖＞红糖＞麦芽糖。可溶性淀粉作为碳源时，菌丝生长速度最快，为0.898 mm/d，与果糖、葡萄糖培养基无显著差异，但极显著高于以甘露糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖和红糖为碳源的培养基；果糖和葡萄糖作为碳源培养基时，菌丝生长速度与麦芽糖培养基存在显著差异，但与其他碳源培养基无显著差异；其余5种碳源培养基之间均无显著差异。从生长势看，除乳糖外的其他碳源培养基的黄裙竹荪菌丝生长势无明显差异，均表现为气生菌丝较为丰富、健壮、洁白、菌落完整且边缘整齐，而乳糖作为碳源时黄裙竹荪菌丝的生长势较差（图1）。结合黄裙竹荪在不同碳源培养基的菌丝生长速度和生长势看，黄裙竹荪较为适宜的碳源培养基为可溶性淀粉，其次是果糖和葡萄糖，而乳糖作为碳源培养基时，其生长速度和生长势表现均较差。

表1 不同碳源培养基黄裙竹荪菌的丝生长速度和生长势

图1 不同碳源培养基的黄裙竹荪菌丝生长势

2.2 不同氮源培养基黄裙竹荪的菌丝生长速度和生长势

从表2可知，不同氮源培养基的黄裙竹荪菌丝生长速度存在差异，表现为尿素＞硫酸铵＞蛋白胨＞酵母提取物＞草酸铵。尿素作为氮源培养基时的菌丝生长速度最快，为2.540 mm/d，极显著高于其他氮源培养基；草酸铵、蛋白胨、酵母提取物作为氮源培养基时，黄裙竹荪的菌丝生长速度无显著差异，但均显著低于以硫酸铵为氮源的培养基。从生长势看，尿素和硫酸铵作为氮源培养基时，黄裙竹荪菌丝生长势最好，表现为气生菌丝丰富、健壮、洁白、菌落完整且边缘整齐；蛋白胨和酵母提取物次之，均能形成完整的菌落；草酸铵为氮源时黄裙竹荪菌丝生长势最差，气生菌丝稀疏且几乎不可见，无法形成完整菌落（图2）。结合黄裙竹荪菌丝在不同氮源培养基上的生长速度和生长势看，黄裙竹荪较为适宜的氮源培养基为尿素，其次是硫酸铵，而以草酸铵为氮源时，其菌丝生长速度和生长势菌表现均较差。

表2 不同氮源培养基黄裙竹荪的菌丝生长速度和生长势

图2 不同氮源培养基的黄裙竹荪菌丝生长势

3 结论与讨论

黄裙竹荪在供试的8种碳源培养基上均能生长，表明其生长可利用的碳源类型广泛，对不同碳源的同化吸收主要体现在菌丝生长速度上，表现为可溶性淀粉＞果糖＞葡萄糖＞蔗糖＞乳糖＞甘露糖＞红糖＞麦芽糖，而在生长势上无明显差异。结合菌丝生长速度和生长势表现认为，可溶性淀粉是8种碳源培养基中最适宜黄裙竹荪菌丝生长的碳源，这与前人对食用菌碳源的研究结果一致［7-8］，从侧面反映出黄裙竹荪中淀粉酶的活性较高，在培养基中添加可溶性淀粉能有效促进黄裙竹荪菌丝生长。试验结果还表明，黄裙竹荪对有机氮源和无机氮源均可有效利用，但在同化吸收上存在极显著差异，在不同氮源培养基上的菌丝生长速度表现为尿素＞硫酸铵＞蛋白胨＞酵母提取物＞草酸铵。从生长势看，以尿素和硫酸铵为氮源的培养基上黄裙竹荪菌丝生长势最好，其次是以蛋白胨和酵母提取物为氮源的培养基，最差的是以草酸铵为氮源的培养基。结合菌丝生长速度和生长势得出，与其他氮源培养基相比，尿素为氮源培养基时，黄裙竹荪的菌丝生长速度和生长势均呈现出极显著优势，是5种供试氮源培养基中的最佳选择。这一结果与前人研究结果不同，现有的食用菌对氮源利用研究结果表明，多数食用菌对尿素的利用较差，以尿素作为氮源培养基时菌丝甚至出现停滞生长状态，这可能与尿素经高压灭菌后，其分解过程中产生的物质有关［9］。因此，黄裙竹荪在尿素利用上的特异性以及尿素是否能被黄裙竹荪直接利用，有待进一步研究验证。