BRAF V600E突变与甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移 及超声特征相关性分析

杨继辉 戴红

湖南省人民医院（湖南师范大学附属第一医院）超声医学科，湖南 长沙 410000

近年来，国内、外甲状腺癌发病率呈快速增长，我国城市地区女性甲状腺癌发病率发展至女性所有恶性肿瘤的第 4 位[1]。甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）是甲状腺癌最主要的亚型[2]，其虽被称为 “惰性癌”，但有部分患者会发生颈部淋巴结转移及甲状腺外侵犯，而当其侵犯喉和气管时，患者生存率明显下降[3-4]。研究发现，鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源 体B1（V-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1，BRAF）V600E 突变在PTC中显著高表达，且BRAF V600E 突变与甲状腺癌的发生、侵袭、淋巴结转移和复发有关[2，5-7]。甲状腺结节的回声、纵横比、边缘、微钙化等超声特征有助于术前诊断PTC，BRAF V600E突变与这些超声特征是否存在相关性的研究较少，且研究结论不一致。本文将通过回顾性分析甲状腺癌超声特征及淋巴结转移与BRAF V600E突变是否存在的相关性。

1 对象与方法

1.1 研究对象

收集2020年7月至2021年12月在湖 南省人民 医院乳甲外科行手术治疗的PTC患者323例，术前均在本院进行了甲状腺及颈部淋巴结超声检查。术后对病灶石蜡切片行免疫组化BRAF V600E突变检测。323例患者中男性97例，女性226例，年龄13～73（40.2±12.0）岁。根据有无BRAF V600E基因突变分为突变组和无突变组。PTC、颈部淋巴结转移及BRAF V600E突变采用本院病理科术后石蜡切片检测结果。

纳入标准：（1）经术后病理病灶石蜡切片确诊为PTC；（2）行颈部淋巴结清扫并有病理结果；（3）术前未接受过内分泌治疗、靶向治疗、放射性核素治疗及放射治疗；（4）术后病灶行石蜡切片 BRAF V600E 免疫组化检测。

排除标准：（1）未在本院行超声检查；（2）有头颈部放射治疗史；（3）未行颈部淋巴结清扫；（4）超声资料、病理学资料与临床资料不全者。

1.2 超声检查方法

使用MEDISON CVGEO H60、SONOSCAPE ST190、SAMSUNG RS80A彩色多普勒超声诊断仪，探头频率为10～12 MHz，患者取仰卧位，头部后仰，使颈部充分暴露。使用高频线阵探头多切面扫查甲状腺，观察甲状腺整体形态、内部回声及血流情况；发现结节后，仔细记录结节所在位置、大小、边缘、内部和边缘有无强回声及大小、与被膜关系以及结节血流信号；扫查颈部淋巴结，并对淋巴结的形态、淋巴门结构、内部有无强回声及液暗区并观察血流模式进行记录。多病灶患者分析直径最大病灶。

1.3 统计学方法

应用SPSS 25.0统计软件进行分析。计量资料以（±s）表示，计数资料以[n（%）]表示，BRAF V600E突变与无突变组间临床病理特征、PTC超声单因素分析采用χ2检验或Fisher精确概率检验，BRAF V600E突变与颈部淋巴结转移和超声征象相关性采用Spearman相关分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组临床病理特征比较

BRAF V600E突变组患者292例（男性91例，女性201例），年龄13～73（40.6±12.0岁）；无BRAF V600E基因突变组患者31例（男性6例，女性25例），年龄20～59（36.7±11.0）岁，BRAF V600E突变率为90.4%。两组在年龄及性别组成方面差异均无统计学意义（P＞0.05，表1）。 存在BRAF V600E基因突变的PTC患者出现甲状腺被膜侵犯及颈部淋巴结转移的比例略高于无BRAF V600E基因突变的患者，但差异无统计学意义（P＞0.05，表1）。相关性分析显示，BRAF V600E突变与PTC颈部淋巴结转移无相关性（r=0.038，P=0.498）。

表1 两组患者临床特征比较[n（%）]

2.2 两组超声特征比较

BRAF V600E无突变组中结节微钙化发生比例（80.6%）高于BRAF V600E突变组（57.9%），差异有统计学意义（P=0.014）。两组患者结节数、大小、边缘、纵横比及内部回声方面比较，差异无统计学意义（P＞0.05，表2）。相关性分析显示，PTC患者BRAF V600E突变与PTC微钙化具有弱负相关性（r=-0.137，P=0.014，表3）。

表2 PTCBRAFV600E突变组与BRAFV600E无突变组超声特征比较[n（%）]

表3 BRAFV600E突变与PTC微钙化相关性

3 讨论

PTC中基因突变较为常见，且与肿瘤特定的临床、组织病理学和生物学特征相关[8]，其中BRAF 基因备受关注，并被指南推荐用于甲状腺结节术前FNA穿刺中[9]。免疫组织化学检测 BRAF V600E 突变具有较高的灵敏度及特异度，与分子检测BRAF V600E突变相比总体符合率达97.4%[10]，已在临床中用于黑色素瘤、PTC等诊断。BRAF 基因可编码 RAF 家族丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，调节丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋 白 激 酶（motigen-activated proteinkinase/extracelluar regulated protein kinase，MAPK/ERK）信号通路，诱导肿瘤细胞过度增殖。据中国和韩国的研究显示，BRAF V600E在PTC中的突变率在80%以上[4，9，11]，本研究纳入的323例PTC患者中BRAF V600E突变率为90.4%，与既往研究一致。研究认为PTC中BRAF V600E突变在肿瘤局部浸润中起重要作用，是PTC发生甲状腺被膜侵犯及淋巴结转移的危险因素[4，12-13]。一项Meta分析显示[14]，BRAF V600E突变与女性患者、肿瘤多灶性、甲状腺腺外扩散、淋巴结转移、血管侵犯以及复发等临床病理特征有相关性，而与患者年龄、肿瘤大小和远处转移等因素之间无相关性。本研究中BRAF V600E突变组被膜侵犯及淋巴结转移比例稍高于突变组，但无统计学意义，与曲琪等研究一致[15-16]。其原因可能与本研究中微小乳头状癌患者所占比例较高有关，郭曼等[16]研究发现甲状腺微小乳头状癌颈中央区淋巴结转移与BRAF基因突变无相关性。

超声因其可清楚显示甲状腺肿块的大小、形态、边缘及微钙化等特征成为甲状腺影像学检查的首选。甲状腺结节的回声、纵横比、边缘、微钙化等超声特征与BRAF V600E突变相关性的既往研究中结论不尽一致。Park等[17]研究发现BRAF V600E突变和无BRAF V600E PTC超声特征之间没有显著差异。Lee等[18]研究认为甲状腺癌内微钙化与BRAF基因有关。Kabaker等[19]在对 ≥1 cm 的PTC的超声特征与BRAF V600E突变相关性研究显示，BRAF V600E突变与大多数可疑恶性超声表现相关，包括纵横比、边界不清、粗或微钙化。国内多项研究显示[20-22]，BRAF V600E突变组中超声表现为病灶多发、边缘不光整、钙化、接触被膜、结节内血流丰富的患者均显著高于无BRAF V600E突变组，且与BRAF V600E突变具有相关性。超声造影后病灶较前增大与BRAF V600E突变也存在相关性[23]。本研究中仅PTC内部微钙化在两组间差异具有统计学意义，且BRAF V600E突变与微钙化为负相关，结果与上述研究存在差异。在今后的研究中应纳入更多的非微小乳头状癌患者，并加大无BRAF V600E突变的PTC患者样本量。

本研究未发现BRAF V600E突变与PTC颈部淋巴结转移相关，无BRAF V600E突变的PTC中微钙化比例更高。