阿拉善双峰驼直肠电刺激法采精初步探索

孟克巴依尔，朱莉仙，其其格，聂 慧，艾尔青萨仁高娃，乌力吉，莫日根毕力格

（1.阿拉善盟畜牧兽医技术推广中心，内蒙古 阿拉善 750300；2.阿拉善左旗动物疫病预防控制中心，内蒙古 阿拉善 750300）

阿拉善双峰驼在畜牧业生产中占有举足轻重的地位，是阿拉善盟两大优势畜种之一[1]。连续干旱、草场退化和破坏、市场价格因素、退牧还林还草和牧民搬迁转移等因素导致出现了“人退带骆驼退”的情况，受诸多因素影响使得阿拉善双峰驼数量急速下降[2]。阿拉善双峰驼保种工作迫在眉睫，阿拉善双峰驼被我国农业农村部于2006年发布662号公告重列入国家级畜禽遗传资源保护名录[3]。2008年，阿拉善左旗双峰驼保护区和保种场被确定为国家级保护区和保种场。2011年08月17日，“阿拉善双峰驼”被中华人民共和国农业农村部批准实施农产品地理标志登记保护。2020年7月27日，阿拉善双峰驼入选中欧地理标志第二批保护名单。政府高度重视阿拉善双峰驼的保种繁育工作。

国际上，迪拜在单峰驼的采精、精液液化、冷冻保护剂的配制以及平衡时间等方面技术成熟。国内对双峰驼电刺激采精精液目前属于空白，假阴道采精实施相对困难，对于精液冷冻相关的文献及报道极少。目前，阿拉善双峰驼保种最经济有效的方法是建立阿拉善双峰驼的胚胎基因库，关键技术是胚胎冷冻保存，但有关阿拉善双峰驼胚胎冷冻的相关研究鲜见报道。为了有效保护好阿拉善双峰驼品种优质资源，我们尝试通过在阿拉善盟内选择优秀的种公驼和母驼，采集精液，冷冻精液，利用现代胚胎技术，通过供体母驼超数排卵、采集胚胎等一系列生物技术而达到生物基因保种的目的。

为充分发挥优秀种公驼的作用，加快良种繁育保种步伐，改良双峰驼及其产品质量，提高绒、肉产量，增加经济效益，促进养驼业发展，探索骆驼人工授精技术，对开拓和实现荒漠地区畜牧业现代化有着重要意义[4]。本试验对种公驼实施直肠电刺激方法采集精液，为下一步精液理化分析进行研究以及骆驼诱导超数排卵特性提供基础材料。

1 材料与方法

1.1 试验地点

阿拉善左旗巴彦浩特镇巴彦霍德嘎查，采精场所宽敞、平坦、安静、清洁。

1.2 试验动物

两峰骆驼都来自阿拉善双峰驼种驼场。

每天保证3h左右的运动量，集中饲喂，经常调教训练做到人骆驼亲和，防止发生恶癖。

1.3 试验仪器（型号）

动物电子采精器 PULSATOR IV（规格35.6cm×26.4cm×15.2cm *）

显微镜 铂特莱

恒温水浴锅 上海博迅（HHS-21-6）

保定架 自制

1.4 动物保定

焊接适合骆驼体型的保定架，固定头部防止骆驼咬人，将骆驼保定成电刺激时呈犬坐姿势，如图1。打开左侧上方的护栏便于操作时观察阴茎状态及射精情况，打开右侧下方护栏便于采精。

1.5 精液采集方法

擦洗公驼生殖器、肛门后，将涂抹过润滑剂的直肠电极棒轻轻插入公驼肛门内，深度约20～25cm，接通电源，依照电子采精器9档设置，遵循手动挡位设置由低档到高档、断续刺激的方法，进行通电刺激采精。当骆驼在某一档位电压刺激下射精后可继续断续刺激直至射精完毕。

将集精杯对准骆驼的阴茎，不可与公驼阴茎的方向呈太大角度，通电刺激后观察阴茎勃起及伸长情况，及时采集精液或在电刺激间歇手捋阴茎，捋出精液。

1.6 预处理

将采集到的鲜精放置37℃恒温水浴锅中，镜检。

1.7 液化

1.7.1 准备

凡是接触精液的器皿和液化液均应放在37℃的恒温箱中，冷冻液置于室温备用。

1.7.2 液化处理

将采集的精液镜检后，与配置好的液化液按照1：1稀释（图2），保存在37℃温箱中30min，期间不断用移液器轻轻抽取混合液使其充分液化，每隔5分钟，观察液化情况，待完全液化，可观察精子浓度（用血细胞计）。

1.7.3 镜检

取一滴精液于载玻片上，加盖盖玻片后在38℃恒温装置的显微镜上评定活力，镜检活力合格者进行冷冻。

2 结果与分析

2.1 种公驼采精时生殖器形态

双峰驼生殖器随着挡位的变化而变化，在电刺激勃起的形态如图3，勃起时长度约为12～20cm，阴茎最前端为一向右向下再向左弯（从后面看）的钩状构造。

2.2 采精结果

通过保定架固定好骆驼，电刺激后采集精液，参数及结果见表1。

2.3 精液观察

精液乳白色，无云雾状，含少量胶状物质，无特殊气味，如图4。

2.4 精液品质

用滴管搅匀并从中取一滴滴在载玻片上，放置在显微镜（400X）下观察，显微镜下精虫游动（非直线运动），活力强，密度较差。精子呈蝌蚪状，如图5，图6。

精液冷冻后解冻品质分析结果见表2。

表2 精液冷冻后解冻品质

3 讨论

本次采精是在春季、夏季进行，并非骆驼发情期，属于反季节采精。由于骆驼排精情况不同，采出的精液质量相对不稳定。

收集出精液后需将精液置于37℃的恒温桶中保存，方便观察，大多情况下，5岁公驼在电刺激下分泌腺液，腺液为黏稠半透明的稀薄液体，是精液的组成成分之一，但在显微镜只能观察出极少数精子。

采精当日灌新鲜鸡蛋20颗，是为了增强营养，提高精液质量。公驼饲养良好可以适当增加采精次数。但如果随意增加采精次数，不但会降低精液的质量，而且会对公驼的生殖机能以及健康状况带来不良影响。

电刺激采精仪是利用低电压小电流交流电刺激骆驼荐锥部低级神经中枢，被刺激后骆驼会不自觉地产生射精过程，达到采集精子的目的[5]。经探索研究，电刺激法能够刺激双峰驼阴茎勃起和射精，可以应用在生产实践当中。

首次使用电刺激方法进行采精，超越了传统假阴道采精方法，这项技术的掌握，对提高优秀种公驼利用率，加快选育步伐[6]，提高阿拉善双峰驼的生产性能具有重要意义，意味着我盟在双峰驼人工保种繁育进程中迈出了第一步。