不同免疫检验方法检测乙肝病毒感染血清标志物的效果分析

李鑫 李志勤 苏彬彬 张海军 王小娟

（庄浪县中医医院，甘肃 平凉 744699）

乙型肝炎病毒（Hepatitis B，HBV）有着极高的感染几率，而乙肝患者若是没有得到及时有效的治疗，随着病情的不断发展，极有可能会导致患者出现肝炎以及肝硬化的情况，严重时甚至会导致患者发生肝癌，对患者的身体健康和生命安全带来了极大的威胁[1-2]。而且乙肝病毒具备了发病率高、易反复难治疗的特征，在发病初期不会出现显著的临床症状，诊断难度也相对较高[3]。根据相关研究显示[4]，全球大约有1/3的人感染过乙型肝炎病毒，每年因为感染乙肝病毒所引发的各类疾病致死人数超过了65万人。而且我国一直是乙肝的重点流行区域，这也引发了国家的重视，随着我国的乙肝疫苗大量普及，近年来急性乙肝病毒感染患者的数量得到了控制。根据临床研究指出，乙肝病毒属于肝脏病毒科，导致发病机制就是乙肝病毒感染造成[5-6]。而且乙肝病毒是一种DNA病毒，其和其他的病毒有着很大区别，有着很强的耐药性，除此之外还具备了耐紫外线、耐高温、耐低温的特性，治疗难度极大[7]。当患者感染了乙肝病毒以后，肝脏会受到损害，乙肝病毒在其体内大量的繁殖和复制，会造成患者的肝脏细胞严重受损，进而出现乙肝。因此对于乙肝患者的及早诊断和治疗十分重要[8]。现阶段，对于乙肝病毒的检测诊断方法一般是根据血清标志物（hepatitis B virus serum markers，HBV-M）进行，其中主要包括乙肝表面抗体（抗-HBs）、乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝核心抗体（抗-HBc）、乙肝e抗体（抗-HBe）、乙肝e抗原（HBeAg）[9]。现阶段针对乙肝病毒血清标志物的检查方法主要分为实时荧光定量法（polymerase chain reaction，PCR）和化学发光法（Chemiluminescence immunoassay，CLIA）检查两种，其中化学发光法是由酶联免疫吸附试验（Enzymelinkde immunosorbent assay,ELISA）改良而来，酶联免疫吸附试验是一种传统的血清标志物检验方法，具备了操作简单、成本低的显著优势，能够有效的对人体免疫反应进行检测，在以往的乙肝病毒感染检查中受到了广泛的应用。但是因为酶联免疫吸附试验的检查结果准确性会受到多种因素影响，包括内源性物质、外源性物质等等，HBsAg可能会因为变异情况表现为假阴性，HBsAg的含量如果过大也有可能会造成钩状效应的出现，检查效果存在着一定局限性。随着医疗技术的持续发，化学发光法受到了广泛的认可和应用，对比传统的酶联免疫吸附试验，该方法也具备了操作简单、成本支出低的特点，而且该方法不会队人体造成辐射伤害，标记物具备较长的有效期，在开展检查的过程中使用的是全自动化操作，其检查准确性更高。除此之外，化学发光法检查同时具备了更高的灵敏度和特异性，线性范围宽，能够用于对患者机体病毒感染定量检测。本次研究选取2019年12月至2020年12月在我院就诊的乙肝患者92例进行观察，所有患者均予以实时荧光定量法（PCR）和化学发光法（CLIA）检查，分析了不同免疫检验方法检测乙肝病毒感染血清标志物的效果，详细报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本次研究选取2019年12月至2020年12月在我院就诊的乙肝患者92例进行观察，所有患者均予以实时荧光定量法（PCR）和化学发光法（CLIA）检查。其中男性54例、女性38例，年龄26～76岁，平均（44.29±4.56）岁。

纳入标准：（1）经检验确诊为乙肝患者；（2）签署了知情同意书的患者。

排除标准：（1）有精神疾病史或者处于妊娠期的患者；（2）伴有其它身体重大疾病的患者。

1.2 方法

在凌晨对患者进行肘静脉血进行抽取，要求患者保持空腹状态受检，血量抽取为5 mL，将抽取的静脉血当作本次研究所使用的检验样本，血液抽取完毕后使用离心机予以离心处理，离心率调整为3000 r/min、，离心的时长为15 min，离心处理完成后将样本放置于低温环境进行储存。所有患者均予以实时荧光定量法（PCR）和化学发光法（CLIA）检查，其中PCR检测方法选择 PCR 荧光分析仪（制造企业：广州达安；型号：DA7600 ）。CLIA检测方法选择全自动化学发光仪（制造企业：郑州安图生物公司；型号：Autlo 2000 plus）,试剂盒选择为郑州安图中物公司制造。

1.3 观察指标

（1）观察对比两种检测方法检测准确率；（2）观察对比两种检测方法血清标志物检出率。

1.4 统计学方法

采用SPSS25.0软件对本次研究数据进行统计分析，计数单位通过[n（%）]表示，计量单位采用（±s）表示，采取t检验方法，当P＜0.05时，则表示两组数据具有统计学意义。

2 结果

2.1 两种检测方法诊断准确率对比

CLIA检测法诊断准确率显著高于PCR检测法，对比有明显差异（P＜0.05），具备统计学意义，见表1。

表1 两种检测方法诊断准确率对比（n, %）

2.1 两种检测方法血清标志物检出率对比

两种检测方法HBsAb、HBcAb检出率对比没有显著差异（P＞0.05），不具备统计学意义，在HBsAg、HBeAb、HBeAg检出率中，CLIA检测方法显著高于PCR检测方法，对比有明显差异（P＜0.05），具备统计学意义，见表2。

表2 两种检测方法血清标志物检出率对比[n（%）]

3 讨论

乙型肝炎病毒感染会造成患者出现机体肝硬化情况，引发乙型病毒性肝炎发生，如果得不到及时有效的治疗，随着病情的发展甚至会造成患者出现肝癌，严重的危害了患者的身体健康和生命安全，对患者的生活质量也有着极大的影响[10]。因此，针对乙肝病毒感染患者，应当要秉承早诊断、早治疗的原则，及早的对其进行有效的干预，提高患者的治疗效果[11]。在现阶段，针对乙肝病毒的感染检测之中，血清标志物是非常关键的一项指标，通过对该指标的检测能够很好的对患者机体免疫情况进行了解。而现阶段针对乙肝病毒血清标志物的检查方法主要分为实时荧光定量法（PCR）和化学发光法（CLIA）检查两种，化学发光法（CLIA）检查是一种较为先进的检测手段，具备了较好的灵敏度与特异性，受到了广泛的认可和应用，但是这两种检查方式的效果在临床中仍然存在争议。根据现阶段的临床研究显示[12-13]，乙肝病毒感染一般高发于人类幼年时期，当患者受到了乙肝病毒感染以后，非常有可能会发生肝掌严重情况，进而导致增生问题出现，小叶结构受到损伤，肝细胞内部出现季节，引发肝脏纤维化等。在针对乙肝病毒进行治疗时，该病毒会产生耐药性和变异性情况，这也造成了该病毒的治疗难度较高，因此必须要及早的予以诊断和治疗，以此来提高患者的治疗效果，减少其死亡率[14]。

在临床中认为，造成乙型肝炎的主要诱因就是乙肝病毒。乙肝病毒是嗜肝DNA病毒的一类，而其对于高温和低温都有着较强的耐性，还具备了非常强的抗紫外线能力，这也造成了乙肝病毒临床治疗的效果始终难以达到预期。乙肝患者的发病以后，其肝脏组织结构会因为病症的影响，导致出现较大范围的干细胞受损情况发生，最终诱发患者发生乙型肝炎。而为了能够更好的对乙肝患者进行治疗，其早期诊断具备重要意义，而临床中对患者的血清标志物检查，是现阶段最为有效的一种乙肝病毒检查方法，可以良好的掌握患者现阶段机体免疫反应状况。其中HBsAg是乙肝病毒的蛋白外科，这一物质本身没有传染性，但患者一旦出现乙肝病毒感染以后，会造成HBsAg水平的大幅度提高，因此对于患者的HBsAg指标检测能够很好的反映患者的乙肝病毒感染情况。乙型肝炎是因为乙肝病毒感染所诱发的具备高传染性的一种疾病，对患者的身体危害极大。而乙肝病毒在患者的体内具备一定的潜伏期，在潜伏期过后会导致患者出现乙肝情况。现阶段，CLIA和PCR是对乙肝病毒的主要检测方法，由其是应用于乙肝病毒血清标志物检测过程中。在实际的操作中。PCR是一种病原学检测方法，具备了灵敏度高和特异性高的优势。

ELISA检查法是以往针对乙肝病毒感染的一种常用检查方法，具备了简便、高效的优势，但是该检查方法不能够进行定量检测，只可以进行定性分析，所以其检查准确率并不理想，常常会出现误诊和漏诊的现象。除此之外，ELISA检查的稳定性不高，其检查结果也非常容易受到外部因素干扰，包括试剂质量、保存情况等，假阴性情况较为多见[17]。CLIA检测方法是对酶联免疫吸附（ELISA）检测方法的改良后诞生的，其具备了操作简单，其成本较低，与ELISA检测方法对比无太大差异，检测时效更快，而且CLIA检测方法的准确率也显著较高，在临床中有着更好的检测效果。CLIA检测方法是应用仪器对电化学发光强度进行监测，能够对血清标志物进行定量分析，灵敏度相对更高。除此之外，CLIA检测方法在检查过程之中应用的全自动仪器和配套试剂，因此其具备了更高的稳定性，因此，现阶段临床大多都会采用CLIA检测方法对乙肝病毒感染患者血清标志物进行检查。

综上所述，针对乙肝病毒感染患者的血清标志物检查，应用CLIA检查方法效果显著，其对比PCR检查方法具备了更高的准确率，而且成本较低、操作简便，能够为患者的后续治疗提供可靠的参考依据，值得临床推广应用。