某地区部分猪场5种疫病抗体及病原的检测

2022-10-27钱振波

现代畜牧兽医 2022年8期

钱振波

（张掖市农畜产品检验检测中心，甘肃张掖 734000）

生猪养殖是养殖业的重要组成部分，直接影响养殖经济收益，在振兴乡村建设中发挥重要作用[1]。猪场疫情是导致生猪养殖减产的主要原因，目前猪场养殖中面临的猪疫情种类多，仅凭直观肉眼诊断方式无法精准、及时地掌握猪场疫病情况，随着先进技术发展，借助现代化的手段可实现对疫病的精准监测[2-3]。科学有效的实验室检测方式可及时发现处于疾病潜伏期的生猪，全面了解猪群患病情况，指导生产活动。通常情况下，猪场发病不仅仅由一种疾病导致，常存在多种疫病混合感染的情况[4]。因此，工作人员应了解关键致病因素，予以针对性治疗。猪瘟、蓝耳病、口蹄疫、猪圆环病毒病、猪伪狂犬病等均属病毒性疾病，本文对某地区部分猪场5种疫病抗体及病原进行检测，以期为相关疾病的防控提供参考。

1 材料与方法

1.1 样本来源

选择某地区26个猪场，猪场规模饲养猪100～1 000头。共采集血清样品3 000份，病料1 000份，用于检测猪瘟病毒（CSFV）、猪蓝耳病病毒（PRRSV）、口蹄疫病毒（FMD）、猪圆环病毒（PCV）、猪伪狂犬病病毒（PrV）等5种病毒抗体及病原；每种病毒血清样品600份，病料200份。所有样品均进行详细编号，-20℃冰箱冷冻保存。

1.2 试剂与仪器

主要试剂：CSFV、PRRSV、FMD、PCV、PrV抗体检测试剂盒（北京爱德士元亨生物科技有限公司）；核酸提取试剂、反转录试剂、Trizol试剂、TE试剂、琼脂糖凝胶等。

主要仪器：YCD-265冰箱（澳柯玛股份有限公司）、Multiskan fc酶标仪（赛默飞世尔科技公司）、D3024离心机（大龙医疗设备有限公司）、Research pro多道移液器（eppendorf公司）、MM-2微量振荡器（金坛市医疗仪器厂）等。

1.3 试验方法

1.3.1 抗体检测及结果判定

血液样本4 000 r/min离心10 min，取血清。以ELISA检测方法，操作步骤严格按照CSFV、PRRSV、FMD、PCV、PrV抗体检测试剂盒使用说明书进行，结果判定方法参考试剂盒说明书。

CSFV：阻断率不低于40%，判定为阳性；阻断率低于40%，判定为阴性。PRRSV：S/P值不低于0.40，判定为阳性；S/P值低于0.40，判定为阴性。FMD：S/N值不超过0.35，判定为阳性；S/N值超过0.35，判定为阴性。PCV：阻断率不低于40%，判定为阳性；阻断率低于40%，判定为阴性。PrV：S/N值不超过0.6，判定为阳性；S/N值超过0.7，判定为阴性；处于中间时属疑似。

1.3.2 病原检测

剪碎组织研磨，按照使用说明进行病毒基因组DNA/RNA提取，PCR法检测CSFV、PRRSV、FMD、PCV、PrV病原，检测引物均由陕西中科基因检测技术有限公司提供。

2 结果与分析

2.1 5种疫病抗体检测结果（见表1）

表1 5种疫病抗体检测结果Tab.1 Detection results of antibodies against five diseases

由表1可知，某地区部分猪场提供的血清样本中CSFV阳性率为8.83%、PRRSV阳性率为8.50%、FMD阳性率为7.17%、PCV阳性率9.50%、PrV阳性率8.33%。

2.2 5种疫病病原检测结果（见表2）

由表2可知，某地区部分猪场提供的病料中CSFV阳性率8.50%、PRRSV阳性率9.50%、FMD阳性率0.50%、PCV阳性率14.50%、PrV阳性率3.00%。

表2 5种疫病病原检测结果Tab.2 Detection results of five kinds of epidemic pathogens

3 讨论

本研究中，某地区部分猪场CSFV抗体检测阳性率为8.83%，病原检测阳性率为8.50%，说明猪场CSFV免疫水平较高，但也存在一定疫病发生风险，应予以重视。成年猪感染CSFV多为隐性感染，可通过持续排毒传播。CSFV感染具备较强的持续性，可对机体正常免疫机制造成破坏，最终导致机体免疫细胞功能障碍，白细胞数量减少，造成免疫抑制[5-6]。猪场疫病防控中，应重点做好猪瘟免疫工作，注意种猪免疫，提升仔猪的抗体水平；有条件的猪场可测定母源抗体消长时间，以此合理确定仔猪的免疫时机[7]。通过制定科学的免疫程序，获得良好的CSFV免疫水平。

本研究中，某地区部分猪场PRRSV抗体阳性率为8.50%，表明整体抗体水平处于合格范围，但病原检测阳性率为9.50%，表示该地区存在一定风险；因此，也应重点做好猪蓝耳病防治工作[8]。通过对该某地区猪群蓝耳病情况进行分析，发现存在较高的PRRSV隐性感染率，育肥猪、仔猪以及种猪的抗体阳性率不存在明显差异。此外，感染率较高的原因可能是该地区6～10月份属于高温、高湿季节，利于PRRSV流行，且该地区养殖密度较大，可能为病毒的传播提供了便利条件。猪蓝耳病属于免疫抑制性疾病，养殖过程中应结合当地实际情况，积极使用疫苗并做好种猪净化工作，以免猪蓝耳病传播[9-10]。

本研究中FMD抗体、病原检测的阳性率均相对较低，表明该地区出现口蹄疫疫情的风险较低，未来工作中注重口蹄疫日常防范即可。目前，大多数猪场均使用疫苗免疫预防口蹄疫，但近年有关FMD流行情况分析显示，现阶段口蹄疫主要流行毒株已发生了较大变化，出现了泛亚谱系及MYA98谱系等，可对猪场养殖造成较大危害，导致猪群大量发病，短时间内出现死亡情况[11-12]。而肽苗所含抗原属于1段合成片段，在流行毒株较为复杂的情况下，无法有效抵御病毒攻击，猪场单纯使用肽苗将存在一定隐患[13]。虽然该地区部分猪场FMD抗体水平已满足农业农村部的标准，但仍需不断强化口蹄疫防控工作，进一步提升FMD抗体水平。

本调查中的26个猪场均进行了PCV疫苗接种，但抗体、病原检测结果显示阳性率分别达到9.50%和14.50%，均为本调查中5种病毒中最高，表明该地区PCV流行情况较为严重，可能已出现隐性感染。现阶段，猪场疫病流行逐渐复杂化，猪圆环病毒病属于一种免疫抑制性疾病，可对体液免疫功能产生抑制，严重影响生猪养殖[14]。猪场应坚持自繁自养原则，重点实施种猪免疫净化工作，并对猪群进行合理免疫，进而有效防控猪圆环病毒病。

猪伪狂犬病更易感染仔猪，严重可导致死亡；而成年猪感染猪伪狂犬病则呈隐性带毒[15]。本研究中，某地区猪场PrV抗体检测阳性率为8.33%，病原检测阳性率为3.00%；调查的猪场全部进行了PrV疫苗免疫，具备较强的猪伪狂犬病防范意识，故获得了良好的猪伪狂犬病防控效果。种猪感染猪伪狂犬病的临床症状与猪蓝耳病等疫病存在较大的相似性，故猪场进行猪蓝耳病及猪瘟等疫病的免疫时，也应做好猪伪狂犬病的免疫工作；有条件的猪场可全部淘汰PrV阳性的种猪[16]，保证猪场养殖环境良好；还应做好灭蚊灭鼠工作，严格开展引种检疫，避免引进带毒猪，多手段提升猪场猪伪狂犬病防控效果。