783例新生儿感染病原菌分布及耐药分析

高 阳,吉彤珍,杨冬梅,刘 然

(首都医科大学附属北京妇产医院/北京妇幼保健院 检验科，北京100026)

新生儿感染是新生儿常见疾病，也是引起新生儿死亡的主要原因，由于新生儿免疫功能尚不健全以及侵入性操作较多，所以新生儿重症监护室(NICU)是医院感染防控的重点，导管相关血流感染、呼吸道感染是新生儿常见的医院感染[1-2]。近年来由于抗生素的广泛使用，越来越多的耐药菌被检出[3]。本研究通过对北京妇产医院NICU2019年1月至2021年12月患者标本中分离出的783病原菌和耐药情况进行分析，为临床治疗和院感防控提供依据。

1 材料与方法

1.1 菌株来源

1.1.1试验菌株 收集北京妇产医院2019年1月至2021年12月NICU患儿的送检标本(包括咽拭子、血液、气管插管尖端、静脉置管断端等)培养分离出的病原菌783株，已剔除同一患儿相同部位的重复菌株。送检标本严格依据《全国临床检验操作规程》进行接种。

1.1.2质控菌株 大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、金黄色葡萄球菌ATCC29213。质控菌株均购自国家菌毒种中心。

1.2 培养、鉴定及药敏试验

1.2.1培养基和药敏纸片使用OXIOD产品，有哥伦比亚血琼脂培养皿、3号麦康凯培养皿、万古霉素巧克力培养皿。

1.2.2细菌鉴定是通过识别菌落形态、革兰染色、氧化酶等试验进行初筛，将分离的菌株在梅里埃VITEK2 COMPACT仪器进行菌株鉴定和药敏试验。药敏结果是根据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)M100标准判定敏感、中介和耐药。

1.3 统计学分析

实验数据采用WHONET5.6及SPSS25软件进行统计分析。

2 结果

2.1 病原菌分布

783株病原菌中共检出革兰阴性菌432株(55.17%)，革兰阳性菌295株(37.68%)，真菌56株(7.15%)。革兰阴性菌中检出较多的为大肠埃希菌331株(42.27%)，肺炎克雷伯菌26株(3.32%),鲍曼不动杆菌26株(3.32%)。革兰阳性菌中凝固酶阴性菌和肠球菌较常见，其中表皮葡萄球菌79株(10.09%)，溶血葡萄球菌64株(8.17%)，沃氏葡萄球菌18株(2.30%)，粪肠球菌38株(4.85%)，屎肠球菌25株(3.19%)。真菌中白色念珠菌30株(3.83%),近平滑念珠菌17株(2.17%)。

2.2 革兰阴性菌耐药情况

检出的革兰阴性菌主要包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌，其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)检出率分别为23.26%和7.69%。大肠埃希菌对阿米卡星、头孢替坦、碳青霉烯类药物、哌拉西林/他唑巴坦均不耐药；肺炎克雷伯菌对头孢吡肟、碳青霉烯类药物、哌拉西林/他唑巴坦均不耐药；没检出鲍曼不动杆菌耐药株(表1)。

表1 主要革兰阴性菌对抗生素的耐药率(%)

2.3 主要凝固酶阴性葡萄球菌对抗生素的耐药情况

检出的凝固酶阴性葡萄球菌中表皮葡萄球菌占比最大；所有凝固酶阴性葡萄球菌均未检测到对利奈唑胺、奎奴普丁/达福普丁、替加环素、万古霉素的耐药株(表2)。

表2 主要革兰阳性葡萄球菌对抗生素的耐药率(%)

2.4 肠球菌对抗生素的耐药情况

肠球菌以粪肠球菌和屎肠球菌为主；粪肠球菌和屎肠球菌均未检出奎奴普丁/达福普丁、替加环素、万古霉素的耐药株(表3)。

表3 粪肠球菌和屎肠球菌对抗生素的耐药率(%)

2.5 真菌对抗生素的耐药情况

白色念珠菌和近平滑念珠菌为主要检出菌，检出菌对两性霉素和5-氟胞嘧啶均敏感(表4)。

表4 主要真菌对抗生素的耐药率(%)

3 讨论

新生儿重症监护室收治的多为早产儿、严重宫内窘迫综合征、低体重儿和多种并发症的新生儿，多数经口气管插管进行呼吸机辅助呼吸及深静脉置管，抗菌药物应用时间长，这些因素增加了感染的风险[4]。在本研究中，大肠埃希菌的检出率最高达42.27%，ESBLs 是主要的耐药菌。ESBLs能够特异性地将β-内酰胺环打开，使头孢菌素和青霉素类抗菌药失活，它可通过质粒介导在细菌间传播耐药性，同时还能携带耐药基因并造成ESBLs对磺胺类、氨基糖苷类、β-内酰胺类及喹诺酮类抗菌药耐药[5-7]。产ESBLs大肠埃希菌的增多可能与患儿自身免疫系统不完善、抵抗力差、呼吸支持、中心静脉置管等治疗措施和抗感染治疗时选用相对安全的β-内酰胺类抗菌药物等因素导致大肠埃希菌的高产酶率[8]，所以合理使用抗菌药尤为重要。本研究还显示凝固酶阴性葡萄球菌感染中表皮葡萄球菌占比较大，与曾月瑶等[9]研究相似，溶血葡萄球菌感染率高于其研究，可能与地区病原学分布差异有关。凝固酶阴性葡萄球菌是人类皮肤和黏膜的正常菌群，NICU新生儿由于各个器官和功能发育不成熟，免疫力较低，凝固酶阴性葡萄球菌会通过机械通气、静脉置管等有创操进入血液循环，增加了患儿感染的风险[10-12]。另外工作人员手部卫生不合格及环境污染也会增加患儿葡萄球菌定植[13]。在肠球菌中粪肠球菌和屎肠球菌对奎奴普丁/达福普丁、替加环素、万古霉素均不耐药，在真菌感染中白色念珠菌对两性霉素和5-氟胞嘧啶无耐药情况，近平滑念珠菌对两性霉素和5-氟胞嘧啶、氟康唑和伏立康唑无耐药出现。白色念珠菌对氟康唑和伏立康唑的耐药率分别为23.33%和26.67%，高于吴思颖等[14]的分析，不同念珠菌对常用抗真菌药物敏感性有差异或固有耐药，以及因治疗产生的获得性耐药使其成为治疗的主要问题[15]，由于抗菌药物的广泛应用，病原菌的耐药率明显上升，不同地区不同科室耐药率也有差异。