新生儿上呼吸道解脲支原体和无乳链球菌感染的流行病学分析

龚唯鸣，唐 红，肖晓冬

（深圳市盐田区人民医院儿科，广东 深圳 518081）

解脲支原体（ureaplasma urealyticum，UU）是一种无细胞壁的原核细胞型微生物，可在体外培养基中生长繁殖。有研究指出，解脲支原体能在泌尿生殖道及呼吸道黏膜表面定植和复制，可引起早产、呼吸道感染和中枢神经系统感染等疾病[1]。B 族链球菌（Group B Streptococcus，GBS）又叫无乳链球菌，其主要是定植在胃肠道和生殖道，属于条件致病菌。近年来有研究发现其与新生儿脑膜炎、新生儿败血症及新生儿肺炎密切相关[2]。在本文中，笔者主要是分析新生儿上呼吸道解脲支原体和无乳链球菌感染的流行病学特征。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2018 年1 月至2021 年6 月在深圳市盐田区人民医院新生儿科住院的新生儿1206 例，其中有男孩590 例、女孩616 例，其日龄为0 ～28 d。这些新生儿均为高危儿、早产儿或被确诊患有新生儿败血症、新生儿高胆红素血症、低血糖、新生儿窒息、羊水吸入综合征、脐炎等疾病。

1.2 方法

1.2.1 标本的采集 采用两支一次性的无菌咽拭子轻柔、迅速地擦拭患儿的两腭弓、咽及扁桃体，将一支无菌咽拭子插入塑料管中，贴上患者的标签条码，立即送检或保存于-20℃的冰箱中待检（用于检测解脲支原体DNA），另一支放入无乳链球菌增菌培养液中进行细菌培养鉴定。

1.2.2 DNA 的提取 向咽拭子标本管内加入1 mL 灭菌生理盐水，充分震荡摇匀，挤干棉拭子。将上述标本生理盐水混合物倒入1.5 mL 的离心管内，以12 000 rpm 的速度离心5 min。吸去上清液，在沉淀物中加入灭菌生理盐水1 mL。对沉淀物进行吹打混匀，以12 000 rpm的速度离心5 min。再次吸去上清液，在沉淀物中加入DNA 提取液50 μL，并充分混匀。以100℃恒温处理（10±1）min。以12 000 rpm 的速度离心5 min，取上清液作为DNA 模板。

1.2.3 PCR 扩增 每次实验均设置阴性、弱阳性和强阳性质控品，与临床未知标本同时上机扩增检测。在每管PCR 反应体系内均加入DNA 模板2 μL，PCR循环反应条件为：93℃预变性2 min ；93℃变性45 s，55℃延伸60 s，共10 个循环；93℃变性30 s，55℃延伸45 s，共扩增30 个循环，收集荧光信号。

1.2.4 结果判定 样本检测值低于检测下限5.00×102基因拷贝/mL 且扩增曲线呈S 形判定为有反应性。在弱阳性质控品检测值允许范围为2.5×104～4.0×105基因拷贝/mL、强阳性质控品检测值允许范围为2.5×106～4.0×107基因拷贝/mL 的条件下，阴性质控结果应为阴性（且扩增曲线不呈S 形），弱阳性和阳性质控结果应为阳性（且扩增曲线呈S 形）。上述要求需在同批次实验中同时满足，否则该实验为无效，需要重新检测。

1.2.5 细菌培养鉴定 对采样咽拭子进行增菌处理后将其置于血培养基中，置入37℃的培养箱中恒温培养24 h，挑选可疑菌落进行GBS 鉴定。

1.3 统计学分析

采用SPSS 11.0 软件进行数据处理，计量资料用均数± 标准差（±s）表示，采用t检验，计数资料用百分比（%）表示，采用χ² 检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 1206 例患儿上呼吸道解脲支原体和无乳链球菌感染的分布情况

1206 例患儿解脲支原体的总感染率、无乳链球菌的总感染率分别为12.02% 和1.07%，男患儿与女患儿解脲支原体的感染率、无乳链球菌的感染率相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。详见表1。

表1 1206 例患儿上呼吸道解脲支原体和无乳链球菌感染的分布情况

2.2 1206 例患儿中男、女患儿上呼吸道解脲支原体感染的发生率及治愈情况

1206 例患儿中男、女患儿上呼吸道解脲支原体感染的发生率及治愈率相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。详见表2。

表2 1206 例患儿中男、女患儿上呼吸道解脲支原体感染的发生率及治愈情况

2.3 145 例上呼吸道解脲支原体感染患儿中男、女患儿DNA 检测结果的分布情况

进行解脲支原体感染DNA 检测的结果显示，145 例上呼吸道解脲支原体感染患儿中男患儿与女患儿的低拷贝率和高拷贝率相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。详见表3。

表3 145 例上呼吸道解脲支原体感染患儿中男、女患儿DNA 检测结果的分布情况[%( 例)]

2.4 145 例上呼吸道解脲支原体感染患儿中男、女患儿低拷贝率与高拷贝率的比较

进行解脲支原体感染DNA 检测的结果显示，145例上呼吸道解脲支原体感染患儿中男、女患儿的低拷贝率均低于高拷贝率，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表4。

表4 145 例上呼吸道解脲支原体感染患儿中男、女患儿低拷贝率与高拷贝率的比较[%( 例)]

2.5 上呼吸道解脲支原体和无乳链球菌感染在不同疾病中的分布情况

145 例解脲支原体感染患儿中早产儿、新生儿败血症患儿、新生儿高胆红素血症患儿、高危儿和其他疾病患儿的占比相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。13例无乳链球菌感染患儿中早产儿、新生儿败血症患儿、新生儿高胆红素血症患儿、高危儿和其他疾病患儿的占比相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。详见表5。

表5 上呼吸道解脲支原体和无乳链球菌感染在不同疾病中的分布情况

3 讨论

解脲支原体主要存在于人类生殖腺及泌尿生殖道中，属于条件致病菌，主要传播途径包括性传播、母婴垂直传播和医源性传播。其中母婴垂直传播可诱发新生儿/ 胎儿免疫反应，从而可导致低出生体重、早产、肺炎、支气管肺发育不良、慢性肺疾病、脑膜炎、呼吸窘迫综合征和败血症等相关疾病的发生[3]。有研究指出，新生儿感染解脲支原体还可引起脑室内出血、视网膜病变和坏死性小肠结肠炎等疾病[4]。近年来，无乳链球菌感染的发病率呈逐年上升的趋势，由其导致的新生儿败血症已引起医学界的高度重视。本研究的结果显示，1206 例患儿解脲支原体的总感染率为12.02%。这与Kwak DW 等[5]报道的62.5%差距较大。有研究指出，解脲支原体在成年妊娠女性生殖道中的定植率为40% ～80%[6]。本研究的结果显示，1206例患儿中男患儿与女患儿解脲支原体的感染率相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。这说明，新生儿感染解脲支原体的风险不受性别因素的影响。从本研究中的表2 和表4 可以看出，虽然新生儿感染解脲支原体后咽喉部所携带的病原体数量较多，但经积极治疗后治愈率较高。据统计，有18% ～55% 的围生期解脲支原体感染是由母婴垂直传播引起的[7-9]。有研究指出，宫内感染的传播途径可分为血行感染、上行感染和产时感染[4]。本研究的结果显示，145 例解脲支原体感染患儿中早产儿、新生儿败血症患儿、新生儿高胆红素血症患儿、高危儿和其他疾病患儿的占比相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。可见，解脲支原体感染能引起全身各系统的多种疾病，而非某种单一的特定疾病。郑拉洁等[10]研究发现，在＜34 周早产儿下呼吸道分泌物中检出解脲支原体阳性可能与其出生体质量较低有关。有研究显示，患有新生儿呼吸窘迫综合征的极低出生体重儿其下呼吸道感染解脲支原体可增加其支气管肺发育不良的发生率，下呼吸道感染解脲支原体与支气管肺发育不良和新生儿先天性肺炎的发生有关[11]。Resch B 等[12]的研究表明，新生儿轻度脑损伤及肺疾病与解脲支原体感染有显著的相关性, 发生解脲支原体感染会增加极低体重出生儿患支气管肺发育不良的风险。有研究显示，合并解脲支原体感染的孕妇其自发性流产、胎膜早破、早产、分娩低出生体重儿、死胎、死产的发生率均显著高于未感染解脲支原体的孕妇[13]。国外有报道称，解脲支原体感染导致的早产是由微生物及其产物（如Toll 样受体）相互作用形成炎性反应引起的一种不良妊娠结局[14]。本研究的结果显示，1206 例患儿无乳链球菌的总感染率仅为1.07%。这与金娴等[15]报道的10.67% 相差甚远。这可能与标本来源及检测方法存在差异有关。陆月合等[16]研究发现，新生儿无乳链球菌感染主要是以Ⅲ、Ⅰb、Ⅴ型为主。刘玲等[17]发现，存在低出生体重、早产、经阴道分娩及缺氧等因素的新生儿感染无乳链球菌的风险较大。从本研究中的表5 可以看出，无乳链球菌可引起早产、新生儿败血症等多种疾病，尤其易引起新生儿败血症。厉世笑等[18]发现，3月龄以下的婴幼儿其发生无乳链球菌血流感染后病情较凶险，应早期使用抗生素进行治疗。杨鸿等[19]发现，新生儿无乳链球菌早发型败血症与晚发型败血症的临床表现不同，且早发型败血症的病死率较高。本研究中所有感染病例在及时使用抗生素治疗后均痊愈出院。这说明，早筛查、早诊断和早治疗对新生儿上呼吸道解脲支原体和无乳链球菌感染患儿的预后至关重要。笔者认为，全面了解新生儿上呼吸道解脲支原体和无乳链球菌感染的流行病学特征，可为相关新生儿疾病的预防和诊治提供参考依据。

综上所述，新生儿上呼吸道感染解脲支原体和无乳链球菌的传播途径主要是母婴传播，患儿感染解脲支原体后咽喉部所携带的病原体数量较多，且感染情况不受性别差异的影响。解脲支原体和无乳链球菌感染均可引起新生儿各系统的多种疾病，应引起临床重视，及时予以干预。