2019—2021年张家港市小反刍兽疫免疫抗体和病原学检测效果评价

李雅梅，张文飞，王嘉熠

（1.扬州大学动物科学与技术学院，江苏 扬州 225000；2.江苏省张家港市畜牧兽医站，江苏 张家港 215600）

0 引言

2016年以来，张家港市按照国家要求，对全市羊进行小反刍兽疫疫苗全覆盖强制免疫，并定期进行免疫效果及疫情风险评估。2019—2021年，全市小反刍兽疫平均免疫抗体合格率超过92%，均达到国家要求的免疫合格水平，未检出小反刍兽疫病毒，小反刍兽疫防控工作取得了显著成效[1]。

1 基本情况

张家港市处于长江下游南岸，地貌类型属于三角洲冲积平原，地形南高北低。羊的养殖以长江三角洲白山羊、湖羊为主，近年受环保和价格因素的影响，养殖逐步萎缩，2019年存栏 0.36万头， 2020年存栏0.53万头、2021年存栏0.55万头，以小散户为主，100头以上的羊养殖场一直维持在10个以下，见表1。

表1 2019—2021年张家港市羊养殖情况

2 免疫情况

张家港市根据国家和江苏省动物疫病免疫计划有关要求，组织开展春秋两季重大动物疫病集中防疫行动和夏季重大动物疫病集中补免和消毒灭原行动，保证常年免疫程序落实到位，突击防疫工作不放松，实现全市羊小反刍兽疫免疫全覆盖。疫苗选用新疆天康畜牧生物技术股份有限公司和扬州威克生物科技公司生产的小反刍兽疫疫苗。

3 材料与方法

3.1 样品采集

对全市羊养殖场按镇、存栏分类采样的方法，每镇随机抽取5个场群，不足5场群的镇100%抽取，场群抽取优先次序为规模养殖场、散养户。每场群随机抽取10份血清样品，不足10份的100%抽取（存栏量≥30只的养殖场以场为单位统计、羊存栏量小于30只的散养户以行政村为单位统计）。羊个体样品应优先抽取调入动物、繁殖障碍动物及有乳腺炎、睾丸炎、附睾炎、关节炎的发病或发病史的动物。

2019—2021年，共对张家港市8个镇的羊养殖场（户）累计采集161场（户）次，采集样品2 946份，其中血清学样品1 804份，病原学样品1 142份。样品采集按照95%置信水平，假定流行率0～10%，同一养殖场点覆盖不同生长阶段和不同栋舍的羊群。采样时详细填写采样单，标明疫苗种类（毒株）、免疫次数、疫苗生产企业、末次免疫时间等相关信息。

3.2 诊断试剂与仪器设备

3.2.1 诊断试剂

免疫抗体检测试剂使用法国ID和青岛立见公司生产的小反刍兽疫竞争 ELISA 抗体检测试剂盒；病毒核酸检测使用用哈尔滨国生生物科技股份有限公司生产的 RTPCR 检测试剂盒。

3.2.2 仪器设备

荧光定量PCR仪、全自动核酸提取仪、酶标仪、洗板机、恒温培养箱、冰箱、微量移液器、纯水仪等设备。

3.3 检测方法与判定标准

（1）血清学样品。抗体采用竞争 ELISA方法（GB/T27982—2011）进行免疫效果监测。

（2）病原学样品。采用荧光RT-PCR方法（GB/T27982—2011）进行病毒核酸检测。

（3）判定标准。免疫抗体检测判定标准：小反刍兽疫抗体S/N%≤50%为抗体阳性；50%＜S/N%≤60%为抗体可疑；S/N%＞60%为抗体阴性。病毒检测判定标准：样品有特异性扩增曲线而且 Ct值≤40 判为实时荧光 RTPCR扩增阳性，表述为检出小反刍兽疫病毒核酸；样品Ct值＞40 或者无特异性扩增曲线判为实时荧光 RT-PCR扩增阴性，表述为未检出小反刍兽疫病毒核酸。

4 检测结果

4.1 总体情况

2019—2021年，检测的1 804份血清样品中，检出小反刍兽疫免疫抗体合格样品1 685份，平均免疫抗体合格率为93%，超过国家规定的大于70%的标准。采集样品的161个养殖场（户）次中150场（户）次免疫抗体合格率超过70%，场均合格率为93%。1 142 份羊口鼻拭子样品中，未检出小反刍兽疫病原学阳性样品，见表2。

表2 2019—2021年张家港市小反刍兽疫监测情况

4.2 不同年份情况

2019—2021年，免疫抗体合格率均超过90%，分别为92%、93%、95%，逐年稳步提高；病原学检测未检出小反刍兽疫病毒，见表3。

表3 不同年份小反刍兽疫监测情况

4.3 不同场点情况

3年检测场点数累计为161场（户）次，其中商品代羊场检测26场（户）次、散养户检测135（户）次，商品代羊场免疫抗体合格数为26场（户）次、散养户免疫抗体合格数为124场（户）次，合格率分别为100%、92%，场均免疫抗体合格率为93%。商品代、散户病原学检测均未检出小反刍兽疫病毒。见表4。

表4 不同场点小反刍兽疫监测情况

4.4 不同地区情况

从不同地区分布来看，张家港市8个地区的免疫抗体合格率均超过85%，主要分布在88%～99%，原学检测未检出小反刍兽疫病毒。见表5。

表5 不同地区小反刍兽疫监测情况

5 结果分析

（1）从张家港全市范围分析。2019年以来，小反刍兽疫免疫抗体总体合格率多年来一直保持在88%以上，疫苗免疫效果很好，能够较好的起到免疫保护作用；小反刍兽疫病原学检测未检出阳性样品，免疫净化的效果明显，发生小反刍兽疫的概率较低。

（2）从不同的年份分析。合格率逐年稳步提高，说明全市小反刍兽疫防控工作有序开展、落实到位，免疫行动“真苗、真打、真有效”。

（3）从不同场点情况分析。商品代羊场免疫抗体合格率达到100%，高于散养户92%的水平，说明规模养殖场严格执行免疫程序，散养户主体责任意识需进一步加强。主要原因为商品代羊场饲养周期长，免疫次数多，管理水平高；散养户主体意识淡薄，免疫次数不够、免疫时间间隔长、操作不规范，造成免疫效果不好。

（4）从不同地区情况分析。全市共分为8个镇，免疫抗体合格率均超过88%，符合国家标准，其中抗体合格率最高为凤凰镇，最低为乐余镇，分析原因为2019年乡镇动防站开展机构改革，防疫监管人员有所变动，导致部分镇（区）动物防疫工作衔接不够、防疫工作推动不及时。

6 讨论与结论

张家港市小反刍兽疫整体免疫效果较好，疫情暴发风险较低，基本达到了免疫无疫，但仍要从以下几个方面持续开展工作，巩固小反刍兽疫的防控的成果。

（1）持续开展好疫情排查。结合省、市级相关要求，每年开展全市羊存栏摸底排查，全面掌握辖区内羊养殖情况，了解小反刍兽疫防控情况，科学评估疫情风险，推动全市小反刍兽疫消灭计划。

（2）继续落实好疫苗免疫。按照“预防为主”的指导思想，强化基础免疫，确保免疫质量，做好小反刍兽疫集中免疫和日常补免工作，确保免疫密度和抗体水平达到国家的要求，构建有效的免疫屏障[2]。

（3）坚持开展好免疫监测。以规模养殖场、散养户、交易市场等区域为重点，强化风险监测，广泛开展流行病学调查工作，强化监测调查结果的分析应用，提升疫情预警预报能力。

（4）从严落实好生物措施。对羊养殖场（户）强化技术指导，督促养殖场（户）落实好生物安全防控措施，定期开展消毒灭原工作，严禁落实产地检疫报检制度，禁止从高风险区购进羊进行养殖[3]。