某农场一起鸡球虫病的暴发调查

2022-10-14高晟斌王从童刘彦黎韦雪华孙蓉蓉

中国动物检疫 2022年10期

高晟斌，徐栋，陈峰，王从童，杨敏，刘彦黎，姜波，温政，韦雪华，孙蓉蓉

（1.中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032；2.威海市动物疫病预防与控制中心，山东威海 264200；3.山东省动物疫病预防与控制中心，山东济南 250000；4.高密市畜牧业发展中心，山东高密 261500；5.荣成市畜牧兽医事业发展中心，山东荣成 264300；6.威海市文登区农业机械发展中心，山东威海 264400）

鸡球虫病（chicken coccidiosis）是由一种或多种球虫感染后引起的鸡肠道寄生虫病[1]。2022 年5月11 日，山东省威海市环翠区温泉镇某农场饲养的肉鸡出现大量不明原因死亡。为了解疫病发生情况，查明病因，以便及时控制疫病，相关专业技术人员赴现场开展了紧急流行病学调查。

1 材料和方法

1.1 病例定义

2022 年5 月5 日起，出现突然排出大量血粪、精神沉郁、反应迟钝、闭目呆立、两翅下垂、步态揺摆、运动失调、急性死亡等症状之一的，定为疑似病例；疑似病例死后，经盲肠内容物盐漂浮法镜检可见球形虫卵者，定为确诊病例[1]。

1.2 调查方法

按照现场流行病学调查方法[2]，实地观察农场周边环境、鸡舍布局、饲养模式等情况，询问场主和工作人员鸡场发病情况。

1.3 实验室诊断

显微镜检查[3]：将病死鸡肠道内容物放在玻璃片上，加入一定量的生理盐水，通过显微镜观察球虫卵囊或裂殖体；取患病雏鸡的新鲜粪便若干，将其放在玻璃容器中，加入一定量的氯化钠溶液，用玻璃棒充分搅匀后过滤，静置15 min 后，取表面液体放在玻璃片上，显微镜下观察球虫卵囊。

核酸检测：采集鸡咽喉-泄殖腔拭子、组织样品，采用北京森康生物技术开发有限公司生产的通用型禽流感病毒实时荧光RT-PCR 检测试剂盒和新城疫病毒荧光RT-PCR 检测试剂盒，分别进行两种病毒的核酸检测。

2 结果

2.1 基本情况

该农场建于2021年，为养殖、种植复合型农场，地处山东省威海市环翠区温泉镇，西部临河，东部临街，占地1 500 m2（图1）。该场共有5 个禽舍，分别饲养60日龄蛋鸡200只、35日龄琅琊鸡800只、38 日龄肉鸡500 只、30 日龄山鸡518 只，以及鸽子50 只、孔雀3 只。山鸡、肉鸡、鸽子、孔雀为散养，且饲养在同一围栏中。主要饲喂玉米面、豆粕、菜叶。豆粕购于当地饲料销售商，玉米面、菜叶来自自家农场。

图1 鸡场地理位置

2.2 诊断

2.2.1 临床症状病鸡出现精神沉郁、站立不稳、采食饮水大幅下降、粪便发红、拉稀等症状（图2），可初步判断为疑似球虫病病例。

图2 病鸡和血便

2.2.2 剖检症状脏器和肌肉颜色暗淡，有贫血症状；盲肠肿大、充血，肠壁呈暗红色，肠壁增厚；肠黏膜脱落，肠内有坏死组织；小肠肠管增厚，内有气体和积液，肠道表面有出血点和淡白色坏死斑点；肠道内容物中有血液、血凝块和褐色黏稠物。具体见图3。

图3 剖检症状

2.2.3 实验室诊断涂片检查发现，病死鸡肠道内容物有大量球虫卵囊，患病雏鸡新鲜粪便内有大量圆形球虫卵囊。通用型禽流感病毒荧光RT-PCR检测和新城疫病毒荧光RT-PCR 检测结果均为阴性（图4）。

图4 荧光RT-PCR 检测结果

2.3 发病情况

2.3.1 时间分布 2022 年5 月5 日，该场分别从山东省青岛市、菏泽市调运2 批鸡，其中从青岛市调运了800 只30 日龄琅琊鸡，饲养在2、3 号禽舍；从菏泽市调运了518 只35 日龄山鸡，饲养在5 号围栏。5 月6 日死亡3 只山鸡，5 月7 日死亡3 只山鸡，5 月9 日死亡2 只山鸡，5 月10 日死亡1 只山鸡、8 只琅琊鸡，5 月11 日死亡2 只山鸡、2 只琅琊鸡，5 月12 日死亡5 只琅琊鸡，5 月13 日死亡3 只琅琊鸡。具体发病死亡数量及处理时间轴见图5。

图5 发病死亡数量及处理时间轴

2.3.2 空间及群间分布 1 号舍饲养蛋鸡，2、3号舍饲养调入的琅琊鸡，4 号围栏饲养肉鸡，5 号围栏饲养调入的山鸡。5 月6 日，首发病例出现在5 号围栏；5 月10 日，3 号鸡舍出现病例；5 月11日，2 号鸡舍出现病例（图6）。病例分布在刚调入的山鸡和琅琊鸡群，经卡方检验，两群死亡率无显著性差异（P=0.879 ＞0.05，表1）。

表1 不同饲养禽类发病死亡情况

图6 空间分布

2.4 病因假设及验证

现场调查发现，本次发病的3 个鸡群均为5月5 日调入，其他鸡群未发病死亡；临床检查发现，发病鸡临床症状符合鸡球虫病症状；实验室检测发现，发病鸡群肠道内容物及粪便中有球虫卵，且排除了禽流感和新城疫等病原的感染。综上推测，该农场出现的鸡群死亡由球虫感染引起。

经调查，山鸡群调运前，未申报检疫。通过电话询问，启运山鸡的场点为粗放型养殖场，生物安全管理措施落后，因此调入的部分山鸡调运前可能已感染球虫，进场后也未进行驱虫，到达环境湿热的威海市后，由于长途调运产生应激[4]，以及饲养环境卫生条件较差（地面为渣土、碎石结构，尘土多，饮水器周边已形成泥水，粪便清理不及时），导致疫病暴发。5 号舍鸡群发病后，由于所有禽舍共用一名饲养员管理，共用饲料运输车辆等生产工具，饲养员在不同栏舍间来回串行，可能将病原传播到其他栏舍，因2 号、3 号舍饲养的是刚调入的琅琊鸡，受长途运输、环境改变等应激因素影响，机体抵抗力下降，导致发病，而其他栏舍未有应激暂未受到影响。

5 月11 日确诊的当天，全群饲喂敌菌净，清扫鸡舍，并对鸡舍进行全方位消毒。采取以上措施后，疫情未得到控制；5 月13 日，更换用药，全群使用复方磺胺氯哒嗪钠和维生素C，5 月14 日后未再出现新病例，由此也验证了病因假设。

3 讨论

感染鸡的球虫种类繁多，寄生部位各异。堆型艾美耳球虫、哈氏艾美耳球虫、变位艾美耳球虫等寄生于小肠前段；毒害艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫寄生于小肠中段；布氏艾美耳球虫寄生于小肠后端、直肠和盲肠近端；柔嫩艾美耳球虫寄生于盲肠[5]。受实验室检测条件限制，本次调查没有使用球虫的特异性引物进行核酸扩增，没有对球虫的生物信息[6]进行进化分析。根据解剖结果，主要病变发生在小肠、盲肠部位，且盲肠病变较为严重，由此推测，引起该场发病的球虫可能为以柔嫩艾美耳球虫为主的多种球虫混合感染。

本次调查的农场为2021 年新建农场，发病禽舍为首次启用的新舍，发病动物为该场引进饲养的首批动物，自然疫源感染的可能性较低。受地域限制，本次调查没有对启运场点进行实验室检测，但启运山鸡的场点管理粗放，生物安全管理措施松散，球虫感染的可能性较大。此次球虫病暴发提示：产地检疫是限制球虫病场群间传播的重要防控手段；兽医主管部门应当进一步加大产地检疫重要性的宣传培训力度，提高养殖从业人员防疫意识；养殖场户应在引种调入前加强检疫，提高饲养管理水平，保持养殖环境卫生清洁，做好定期消毒灭源。