猪瘟与伪狂犬疫苗联合使用免疫效果评估试验研究

孙心，李叔伟

（1.哈药集团生物疫苗有限公司 哈尔滨 150040；2.齐齐哈尔大学 黑龙江齐齐哈尔 161000）

从目前我国流行非洲猪瘟趋势上来看，以后非洲猪瘟在我国会存在相当长的一段时间，那么在非洲猪瘟长期存在的情况下，减少猪群疫苗免疫次数，减少疫苗接种后对猪群带来的应激是一个趋势，对于猪群来说猪瘟疫苗和伪狂犬疫苗是最为基础也是最为重要的疫苗。由于仔猪和母猪的猪瘟和伪狂犬疫苗的免疫程序相似（包括伪狂犬的1～3 日龄的滴鼻免疫和猪瘟的超前免疫），免疫次数大体一致，疫苗生产工艺和免疫效果评价都很成熟，基于以上原因，笔者建议猪瘟疫苗和伪狂犬疫苗进行同时混合接种，这样减少免疫次数的同时减少接种疫苗对猪群造成的应激。

1 试验材料与方法

1.1 试验用品

猪瘟抗体检测试剂盒、伪狂犬gB、伪狂犬gE 检测试剂盒购自IDEXX 公司。

猪瘟疫苗20 头份、伪狂犬疫苗20 头份和稀释液均为哈药疫苗公司提供的高端蓝瓶产品。

国内某公司猪瘟疫苗20 头份、国内某公司伪狂犬疫苗20 头份均在正规兽药市场采购。

1.2 试验动物

90 头1 日龄仔猪，分为三组，每组30 头，黑龙江某规模化猪场。

1.3 试验分组与疫苗接种（表1）

试验分组与疫苗接种计划设计见表1。

表1 试验分组与疫苗接种计划设计

1.4 免疫剂量

猪瘟与伪狂犬各1 头份，每头份用1mL 专用稀释液进行稀释，联合免疫时，每头猪接种2mL。

1.5 母源抗体检测

检测母猪猪瘟与伪狂犬抗体水平，挑选出仔猪猪瘟和伪狂犬母源抗体在同一水平线上的猪群进行试验，这样主要是为了避免母源抗体不整齐，影响试验效果。根据仔猪试验数量和母猪产子数量，对20 头母猪进行抗体检测。

1.6 抗体检测

三个试验组，每组在不同日龄分别检测20 头猪血清，分别在35、70、100、130、160 日龄进行采血，每个组别分别采集20 头猪血液，分离血清，检测猪瘟和伪狂犬抗体滴度。猪瘟疫苗抗体和伪狂犬疫苗抗体的检测应用猪瘟抗体检测试剂盒、伪狂犬gB、伪狂犬gE 检测试剂盒参照IDEXX 公司的试剂盒说明书检测猪瘟和伪狂犬抗体。

1.7 体温测定

疫苗接种后分别在1、2、4、8、12、24h 对三个组别猪群进行体温测定。

1.8 应激反应观察

三组猪群（每组20 头）疫苗接种后，在2h 内通过猪群的精神状态、呕吐、发热、抽搐、死亡等症状观察猪群的整体状态，并记录。

2 试验结果

1）母源抗体效价结果见表2。

表2 母源抗体效价结果

2）猪瘟抗体效价检测结果（阻断率%平均值）见表3 和图1。

图1 不同组别猪瘟抗体滴度消长规律

表3 猪瘟抗体效价检测结果

在35 日龄和70 日龄两次对猪群进行猪瘟和伪狂犬疫苗联合免疫后，70 日龄后猪瘟阻断率在55%以上。A、B、C 三组之间并无明显差异，保护期能维持160 日龄。

3）猪瘟抗体阳性率检测结果（阳性率%平均值）见表4 和图2。

表4 猪瘟抗体阳性率检测结果

图2 不同组别猪瘟阳性率消长规律

在35 日龄和70 日龄两次对猪群进行猪瘟和伪狂犬疫苗联合免疫后，100 日龄后猪瘟阳性率在80%以上。A、B、C 三组之间并无明显差异，说明联合免疫疫苗对猪群猪瘟有很好的保护率。

4）伪狂犬gE 抗体效价检测结果（S/N 值平均值）见表5 和图3。

图3 不同组别伪狂犬gE 抗体效价消长规律

表5 伪狂犬gE抗体效价检测结果

在35 日龄和70 日龄两次对猪群进行猪瘟和伪狂犬疫苗联合免疫后，70 日龄后伪狂犬gE 均为阴性，说明猪群没有伪狂犬野毒感染。A、B、C 三组之间并无明显差异，保护期能维持160 日龄。

5）伪狂犬gB 抗体效价检测结果（S/N 值平均值）见表6 和图4。

表6 伪狂犬gB抗体效价检测结果

图4 不同组别伪狂犬gB 抗体效价消长规律

在35 日龄和70 日龄两次对猪群进行猪瘟和伪狂犬疫苗联合免疫后，70 日龄后伪狂犬gB 均为阴性，说明伪狂犬疫苗在猪群中产生较高的保护率。B 组要略好于A 组和C 组，A、B、C 三组之间并无明显差异，保护期能维持160 日龄。

6）猪群免疫后体温平均值测定结果（℃）见表7 和图5。

表7 猪群免疫后体温平均值测定结果

图5 不同组别猪群体温检测结果

疫苗联合使用后在疫苗接种后1、2、4、8、12、24h 监测猪群体温，A、B、C 三组猪群体温正常。

7）猪群应激反应观察。三组别接种疫苗后，通过猪群的精神状态、呕吐、发热、抽搐、死亡等症状观察2h，猪群整体状况良好（表8）。

表8 猪群应激反应观察

3 讨论

3.1 母源抗体检测

本试验在进行联合免疫前，对分娩母猪在产前进行猪瘟和伪狂犬母源抗体测定，确定母源抗体水平，同时挑选出母源抗体水平相对一致的母猪，进行后续仔猪联合免疫试验，以确保本试验整体效果。本试验所选取的10 头母猪的猪瘟抗体值和伪狂犬抗体值相近，猪瘟阻断率是89.08%，伪狂犬（gE）为1.044，伪狂犬（gB）为0.1093，说明母猪的猪瘟和伪狂犬抗体水平都很好，相对仔猪也有较好的保护力。

3.2 日龄选择

接种日龄是根据目前常规免疫程序制定，猪瘟和伪狂犬接种均为三次免疫。猪瘟1 日龄免疫属于超前免疫，在免疫中可以不进行接种，本试验主要是为了与猪瘟伪狂犬联合疫苗进行对比，由于在临床上1 日龄接种猪瘟疫苗较少，本试验在1 日龄免疫程序中，不接种猪瘟疫苗。

3.3 免疫剂量选择

本次试验猪瘟和伪狂犬疫苗都选择最小接种剂量，猪瘟和伪狂犬联合疫苗也选择最小剂量，接种剂量相同，就可以在同等水平下对比免疫效果。在临床上一般使用剂量会大一些，但是这并不影响本次试验的对比结果。

3.4 猪瘟抗体滴度分析

在仔猪35 日龄进行猪瘟和伪狂犬联合免疫，同时采血检测抗体，由于母源抗体的保护，35 日龄A、B、C 三组猪瘟阻断率为阳性，70 日龄再次接种猪瘟和伪狂犬疫苗联合免疫，同时采血检测抗体，A、B、C 三组猪瘟阻断率为阳性，100、130、160 日龄进行检测，A、B、C 三组猪瘟阻断率都升高，均为阳性。二免70 日龄后，猪瘟阻断率都为阳性，而且三组阻断率都在80%以上，A 组和B 组与对照组C 组之间无明显差异，说明猪瘟和伪狂犬疫苗联合免疫与单独免疫猪瘟疫苗对猪群产生猪瘟抗体值无影响，对猪群都有较好的保护率。

3.5 伪狂犬抗体滴度分析

伪狂犬是在1 日龄进行滴鼻免疫，35 日龄和70 日龄联合免疫，从35 日龄、70 日龄、100 日龄、130 日龄的检测结果说明，A、B、C 三组伪狂犬gE 均为阴性，伪狂犬gB 均为阳性，A 组和B 组与对照组C 组相比较伪狂犬gE 值无显著差异。A 组和B 组与对照组C 组相比较伪狂犬gB 值无显著差异，但相对比较B 组伪狂犬gB 值要略低于A 组和对照组C 组，说明B 组伪狂犬疫苗保护率要好于A 组和对照组C 组，但是无显著差异。

3.6 猪群体温测定结果分析

本试验猪瘟和伪狂犬联合免疫主要从两个方面说明本试验是否可以进行，第一点是联合免疫疫苗使用后对猪群的保护率情况，第二点是联合免疫疫苗是否对猪群有应激反应。本试验在联合疫苗接种后的1、2、4、8、12、24h 进行体温测定，同时观察猪群精神状态，A、B、C 三组猪群体温正常，精神状态正常，猪群并无应激反应症状。

4 结论

本试验通过猪瘟和伪狂犬疫苗联合免疫，选取两个厂家的疫苗进行联合免疫，对单独猪瘟和伪狂犬疫苗免疫进行对比，从检测猪瘟阻断率和伪狂犬gE 和gB 值判断联合免疫疫苗对猪群的保护率情况，从检测结果看，A 组和B 组疫苗联合免疫使用与C 组单独疫苗免疫所产生的猪瘟抗体值和伪狂犬抗体值并无明显差异，差异不显著，而且对猪群都能产生较高的保护率，来预防猪群猪瘟和伪狂犬疫病的发生。

本试验通过疫苗接种后在不同时间点测定猪群体温并且同时观察猪群的精神状态，以此判断猪瘟和伪狂犬疫苗联合使用是否对猪群产生应激反应，结果表明试验A 组、B 组和对照组C 组猪群体温正常，精神状态正常，三组猪群无不良反应，说明猪瘟和伪狂犬疫苗联合免疫对猪群无应激反应，安全。

综上所述，猪瘟与伪狂犬疫苗联合使用对猪群产生较好的猪瘟抗体滴度和伪狂犬抗体值，对猪群有较好的保护率，无相互干扰的问题，同时疫苗联合免疫对猪群无明显应激反应。在生产中可以推广猪瘟与伪狂犬疫苗联合使用方案，可以减少免疫次数节约成本，又可以减少多次免疫对猪群造成的应激反应。