核桃蛋白营养评价及其对DSS 诱导小鼠急性结肠炎的改善作用

刘丹丹，朱俊松，张雪莉，陈 敏，郭怡廷,2，马海乐,2,

（1.江苏大学食品与生物工程学院，江苏镇江 212013；2.江苏大学食品物理加工研究院，江苏镇江 212013；3.江苏大学实验动物中心，江苏镇江 212013）

炎症是机体对损伤、感染等刺激发出的一种防御反应，包括急性炎症和慢性炎症。急性炎症是人体组织对有害刺激的最初反应，主要涉及局部血管系统，免疫系统及受伤组织内的各种细胞。慢性炎症主要导致炎症部位细胞类型的逐步转变，其特征在于炎症过程中组织同时破坏和愈合。慢性炎症会损害人体正常组织，削弱免疫耐受反应，从而发展出自身免疫性疾病，代谢紊乱和进行性疾病。炎症性肠病（Inflammatory Bowel Disease，IBD）是一种典型的慢性炎症疾病，其主要包括克罗恩病和溃疡性结肠炎，主要是遗传易感性、免疫学、肠道微生物和外部环境之间复杂的相互作用所致。IBD 在全球范围内蔓延，其发病率与流行率逐年攀升，已成为一种严重危害人类健康的疾病。预计到2025 年，中国的IBD患病人数将超过150 万人。

IBD 的治疗主要是控制炎症和免疫反应，通常是长期服用非甾体类抗炎药和皮质类固醇。长期服用这些药物有一定的副作用，对人体健康存在潜在的风险。因此，越来越多的研究开始关注食源性生物活性物质对IBD 的预防及治疗作用。Alberto 等从黑加仑中提取多酚并进行体外模拟消化，消化物能够抑制白介素-1（Interleukin-1，IL-1）诱导的Caco-2 细胞中白介素-6（Interleukin-6，IL-6）和肿瘤坏死因子-（Ttumor necrosis factor alpha，TNF-）的分泌，显著下调环氧合酶2（Cyclooxygenase 2，COX-2）和诱导型一氧化氮合酶（Inducible nitric oxide synthase，iNOS）的mRNA 表达，从而表现出良好的抗炎作用。Liang 等研究了玉米多肽的消化产物对结肠炎的抗炎活性，发现玉米多肽的消化物可以显著降低TNF-诱导的Caco-2 细胞中COX-2、iNOS 和白介素-8（Interleukin-8，IL-8）的表达，同时对葡聚糖硫酸钠（Dextran sodium sulfate，DSS）诱导的小鼠结肠炎也具有预防和缓解作用。Huang 等研究发现鸡蛋卵转铁蛋白中分离出来的三肽IRW 可以通过抑制p50 和p65 的核转位的NF-B 信号通路介导来显著降低TNF-诱导的人血管内皮细胞粘附分子ICAM-1 和VCAM-1 的上调，从而抑制血管炎症。对食源性活性物质，尤其是食源性生物活性肽的抗炎效果虽不及药物显著，但是也可以显著抑制炎症因子的活性，对部分炎症可以起到预防作用。

核桃（L.）是一种营养丰富的坚果，在东亚、北美和欧洲东南部广泛种植。据联合国粮食与农业组织（FAOSTAT）统计，2019 年中国的核桃种植面积达631330 公顷，核桃（含壳）年产量为2521504 吨，居世界首位。除了少部分核桃简单加工后直接食用，大部分核桃用于榨取核桃油，因此产生了大量高蛋白含量的核桃粕副产物。核桃粕经过简单的脱脂处理后，即为核桃蛋白（蛋白含量≥75%）。核桃蛋白作为一种优质的植物蛋白资源，具有较高的消化率，易被人体胃肠消化道中的消化酶水解成小分子肽段或氨基酸。本课题组之前的研究发现，核桃蛋白经过胃蛋白酶与胰酶的体外模拟胃肠消化后，可以被分解成分子量较小的多肽和氨基酸，直接食用核桃蛋白即可发挥良好的降血压与抗氧化活性。因此，本文通过核桃蛋白的氨基酸组成与含量，评价了核桃蛋白的营养价值和消化性能，并通过DSS 诱导的急性结肠炎小鼠模型，研究了核桃蛋白经过小鼠胃肠道消化后的抗结肠炎活性，并与碱性蛋白酶酶解制备的核桃蛋白酶解物作比较。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

核桃蛋白 辽宁长白仙子生物科技有限公司；碱性蛋白酶（350507 U·g） 南京诚纳化工有限公司；DSS MP Biomedicals 公司；SPF 级雌性Balb/c小鼠（6～8 周龄，体重20±2 g） 江苏大学实验动物中心提供，生产许可证号：SCXK（苏）2018-0012，合格证编号：201 918521；IL-1试剂盒RGB-60013M、IL-6试剂盒RGB-60023M 和TNF-试剂盒RGB-60080M北京瑞格博科技发展有限公司；髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）试剂盒A044-1-1 南京建成生物工程研究所；苏木精-伊红染色试剂盒G1120北京索莱宝科技有限公司。

DF-101S 集热式磁力搅拌器 江苏金坛西城新瑞仪器厂；TGL-16 高速台式冷冻离心机 上海沪粤明仪器公司；Tecan Infinite PRO TWIN 200 多功能酶标仪 瑞士帝肯（TECAN）集团公司；PHS-25 型数显式pH 计 上海精密科学仪器有限公司；S433D 氨基酸分析仪 德国卡塞姆有限公司；FreeZone 12plus真空冷冻干燥机 美国Labconco 公司；Leica 6500光学显微镜 德国徕卡。

1.2 实验方法

1.2.1 核桃蛋白氨基酸组成分析 根据Ketnawa 等的方法测定核桃蛋白的氨基酸组成及含量。准确称取一定量的蛋白粉置于密闭水解管中，加入6 mol/L HCl（含0.1%苯酚，v/v）在110 ℃下水解24 h，冷却后过滤，定容，取1 mL 滤液在离心浓缩仪上浓缩挥发掉剩余的HCl。浓缩后的样品稀释20 倍后，取1 mL 使用自动氨基酸分析仪上机检测。

1.2.2 核桃蛋白营养价值评价 以氨基酸组成为基础，参照邹平的方法，进行核桃蛋白的营养价值分析，主要包括以下几项指标：

必需氨基酸（E）与总氨基酸（T）之比，即E/T%，是表征八种必需氨基酸占全部氨基酸的比重，并与FAO/WHO 推荐的模式标准比较，以此检验核桃蛋白氨基酸组成的平衡性。

蛋白质的功效比值（Protein efficiency ratio，PER）预测值，根据以下回归方程计算：

蛋白质的生物价（Biological value，BV）预测值，根据回归方程计算：

用a代表蛋白质中每种必需氨基酸含量与必需氨基酸总量的比值。当a≤a时，q=a/a参考值；当a≥a时，q=a/a。

1.2.3 核桃蛋白酶解物的制备 参照Liu 等的方法，制备物料浓度为5%（w/v）的核桃蛋白悬浊液，充分搅拌后于恒温水浴锅中预热至50 ℃，用4 mol/L NaOH 调节至9.0，然后加入7000 U/g（E/S）的碱性蛋白酶开始酶解。在酶解过程中使用0.5 mol/L NaOH 维持反应体系pH 恒定，当水解度到达8%时结束酶解反应，沸水浴灭酶10 min 后，冷却，调至pH7.0，得到灭酶和中和后的酶解液，并进行下一步操作。

1.2.4 动物实验设计 本实验遵守动物福利3R 原则、符合国际实验动物伦理学要求，并获江苏大学实验动物管理与动物福利委员会（UJS IACUC）的审查批准。参照梁秋芳的方法，将50 只SPF 级雌性Balb/c 小鼠（6～8 周龄），体重20±2 g，饲养于江苏大学实验动物中心的屏障系统内。饲养环境昼夜各半，温度20～26 ℃，湿度40%～70%，自由进食饮水。适应环境一周后，称重并随机分为5 组，每组10 只，分别为对照组、模型组、核桃蛋白酶解物组、核桃蛋白低剂量组和核桃蛋白高剂量组。

每天记录小鼠体重，观察急性结肠炎临床症状。14 d 后，摘眼球取血，分离血清。脱颈处死小鼠，取结肠，将血清与结肠-80 ℃冻存，用于下一步分析检测实验。具体实验流程如图1 所示。

图1 动物实验设计流程图Fig.1 Flow chart of animal experiment design

1.2.5 疾病活动指数（DAI）评分 小鼠每天称重并记录体重；每天检查粪便情况，肛周出血情况以及外观表现情况，并参照Wirtz 等的方法进行DAI 评分。具体评分标准如下：粪便评分：0=正常；1=湿/粘粪便；2=软粪便；3=腹泻。血便：0=无血；1=粪便或肛周有血；2=严重出血。外观表现：0=正常；1=皮毛褶皱或步态改变；2=嗜睡或垂死状态。

1.2.6 血清中IL-1、IL-6、TNF-以及MPO 浓度检测 收集小鼠血液后，在室温下静置2 h，待分层后于4 ℃下3000 r/min 离心10 min，分离小鼠血清。将血清稀释2 倍后，使用酶标仪及酶联免疫试剂盒测定小鼠血清中IL-1、IL-6、TNF-以及MPO 浓度。

1.2.7 组织切片染色 取小鼠的部分结肠组织，使用4%甲醛浸泡固定后，进行石蜡包埋。组织切片机切片、苏木精和伊红（H&E）染色，在光学显微镜下观察并拍照。

1.3 数据处理

实验数据分析使用软件SPSS 19.0 进行单因素方差分析，结果以平均值（n=3）±标准差（Mean±SD）表示，采用检验分析组间数据差异性，不同字母代表差异显著（＜0.05）；**代表差异极显著（＜0.01）。图表采用OriginPro8 绘制。

2 结果与分析

2.1 核桃蛋白的氨基酸组成分析

核桃蛋白的氨基酸组成及含量如表1 所示，结果显示，在核桃蛋白中，谷氨酸含量最高（23.74%），其次是精氨酸（14.27%）和天冬氨酸（9.92%），与毛晓英的研究结果相似。表2 的必需氨基酸评分显示，与WHO/FAO推荐的氨基酸模式相比，核桃蛋白的大多数必需氨基酸含量高于成年人日常所需的标准值，其中，赖氨酸是第一限制性氨基酸，蛋氨酸是第二限制性氨基酸，这一结果与已报道的研究相似。根据表3，核桃蛋白中，必需氨基酸占总氨基酸的26.98%，氨基酸组成合理。因此，核桃蛋白是一种优质的植物蛋白。与此同时，核桃蛋白中疏水性氨基酸（27.18%）与酸性氨基酸（33.66%）含量丰富，这导致了核桃蛋白的溶解度较低。

表1 核桃蛋白的氨基酸组成及含量Table 1 Amino acid composition and content of walnut protein

表2 核桃蛋白的必需氨基酸评分Table 2 Essential amino acid score of walnut protein

表3 核桃蛋白必需氨基酸及氨基酸残基分布Table 3 Amino acid residues distribution and essential amino acids of walnut protein

蛋白质的营养价值和消化特性很大程度上取决于蛋白质的氨基酸组成。从Liu 等的研究可以发现，腰果蛋白与核桃蛋白的氨基酸组成相似，都具有高含量的谷氨酸、精氨酸和天冬氨酸，都具有必需氨基酸含量（29.92%）高，疏水性氨基酸（39.37%）和酸性氨基酸（29.04%）含量丰富的特点。研究表明，腰果蛋白具有很高的体外消化率。其他具有高消化率的优质蛋白，如花生蛋白和杏仁蛋白的氨基酸组成也与核桃蛋白相似。这是由于胃蛋白酶主要分解酸性氨基酸羧基端的肽键，尤其是羧基为芳香族氨基酸（苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸等）的肽键。胰蛋白酶会特异性地切割碱性氨基酸（精氨酸或赖氨酸）的羧基端肽键，而胰凝乳蛋白酶特异性切割芳香族氨基酸或大型疏水性氨基酸残基旁边的肽键。坚果蛋白的高消化率得益于蛋白中酸性氨基酸、疏水性氨基酸和精氨酸含量高。综上氨基酸分析的结果表明，核桃蛋白是一种氨基酸组成合理，消化率高的优质植物蛋白。

2.2 核桃蛋白的营养价值分析

核桃蛋白的营养价值分析结果如表4 所示。PER是衡量蛋白质利用率的指标之一，优质蛋白的PER标准为2.0。本研究中使用的核桃蛋白粉的PER I、II 预测值分别为1.55 和1.58，高于其他蛋白，如菜粕蛋白，说明核桃蛋白的利用率高。BV 主要反映食物中的蛋白质被机体消化吸收后，机体能够利用的程度。由于色氨酸为未检测氨基酸，在本研究中式（3）的最后一项计为1。经过计算得出的核桃蛋白BV预测值为87.96，低于其他研究中体内实验的实测值（98.77%），预测值与实际值有一定的差异。但总体来说，核桃蛋白是一种易于被机体消化吸收的优质蛋白。

表4 核桃蛋白质的营养价值分析结果Table 4 Nutrition value of walnut protein

2.3 核桃蛋白及其酶解物对急性结肠炎小鼠临床症状的影响

2.3.1 体重变化 DSS 可以破坏小鼠结肠上皮细胞，破坏肠道屏障的完整性，激活促炎细胞因子的分泌和基因表达，并导致严重的结肠炎，是常用的结肠炎动物模型造模剂。本研究使用DSS 诱导的结肠炎小鼠模型评价核桃蛋白及核桃蛋白酶解物的体内抗炎作用。灌胃核桃蛋白及其酶解物对结肠炎小鼠体重变化的影响如图2 所示。结果显示：在实验的前7 d，小鼠体重均没有显著下降（＞0.05），说明灌胃核桃蛋白与核桃蛋白酶解物对小鼠体重没有显著影响。在饮用水中添加DSS 的第4 d 起，与对照组相比，模型组与灌胃核桃蛋白与核桃蛋白酶解物的治疗组的小鼠体重均显著下降（＜0.05），第5 d 起，治疗组小鼠体重的下降幅度显著低于模型组（＜0.05）。实验结束时，模型组小鼠体重下降严重，部分小鼠出现死亡，而治疗组的体重下降幅度显著低于模型组（＜0.05）。低剂量、高剂量的核桃蛋白及核桃蛋白酶解物之间没有显著差异（＞0.05）。结果表明，灌胃核桃蛋白及核桃蛋白酶解物均可以显著抑制DSS 诱导的结肠炎小鼠的体重减轻。Fujun 等也同样报道，核桃油对DSS 诱导的结肠炎小鼠也有类似的效果。

图2 核桃蛋白及其酶解物对DSS 诱导的结肠炎小鼠体重变化的影响Fig.2 Effect of walnut protein and its hydrolysate on the body weight loss of DSS-induced colitis mice

2.3.2 DAI 评分 实验进行的14 d 内，小鼠DAI 评分如图3 所示。结果显示：在引用水中添加DSS 后的第2 d 起，与对照组相比，模型组与治疗组的部分小鼠开始出现粪便湿软的状况，随着实验进行，结肠炎症状加重，小鼠进一步出现腹泻，肛周出血，便血，嗜睡，皮毛无光泽等症状。然而，与模型组相比，治疗组小鼠的症状出现时间较晚，临床症状有所改善。实验结束后，治疗组小鼠DAI 评分显著低于模型组（＜0.05），在治疗组中，核桃蛋白酶解物组＜核桃蛋白低剂量组组＜核桃蛋白高剂量组（＜0.05）。结果表明，灌胃核桃蛋白及其酶解物能显著缓解DSS 诱导的结肠炎小鼠的临床症状，如腹泻、便血、嗜睡等，且核桃蛋白酶解物优于高剂量核桃蛋白优于低剂量核桃蛋白。

图3 核桃蛋白及其酶解物对DSS 诱导的结肠炎小鼠疾病活动指数（DAI）的影响Fig.3 Effect of walnut protein and its hydrolysate on disease activity index of DSS-induced colitis mice

2.3.3 结肠长度 由DSS 引起的小鼠结肠长度变化如图4 所示。结果显示，与对照组相比，在饮用水中添加DSS 的模型组以及治疗组的小鼠结肠显著缩短（＜0.01），但灌胃核桃蛋白及核桃蛋白酶解物并未显著缓解急性结肠炎小鼠结肠缩短的状况（＞0.05）。急性结肠炎发病迅速，灌胃功能性食品的治疗只能延缓发病时间，减轻发病症状，并不能抑制炎症发作，因此并没有显著缓解结肠炎引起的小鼠结肠缩短状况。

图4 核桃蛋白及其酶解物对DSS 诱导的结肠炎小鼠结肠长度的影响Fig.4 Effect of walnut protein and its hydrolysate on the colonic length of DSS-induced colitis mice

2.4 核桃蛋白及其酶解物对急性结肠炎小鼠血清炎症因子的影响

细胞因子在IBD 的发生和发展中起着至关重要的作用，其可以激活巨噬细胞、嗜中性粒细胞和T 细胞，引起免疫反应失调和慢性炎症。灌胃核桃蛋白及核桃蛋白酶解物对DSS 诱导的结肠炎小鼠血清中IL-1含量的影响如图5 所示。模型组小鼠血清IL-1含量为11.92 ng/L，极显著高于对照组（＜0.01），造模成功。与模型组相比，灌胃低剂量、高剂量的核桃蛋白及核桃蛋白酶解物均可以显著降低小鼠血清中的IL-1含量（＜0.01）。IL-1是结肠组织释放的主要促炎细胞因子之一，在IBD 的发生和发展中起着至关重要的作用，可以触发和放大炎症反应，导致促炎趋化因子和趋化因子水平升高。结果表明，核桃蛋白及酶解物经过小鼠的体内消化后，产生的小分子肽类及氨基酸被小肠吸收后，可以有效缓解结肠炎引起的血清IL-1含量升高，对炎症的预防及治疗有一定效果。

图5 核桃蛋白及其酶解物对DSS 诱导结肠炎小鼠血清中IL-1β 含量的影响Fig.5 Effect of walnut protein and its hydrolysate on IL-1β content in the serum of the DSS-induced colitis mice

灌胃核桃蛋白及核桃蛋白酶解物对DSS 诱导的结肠炎小鼠血清中IL-6 含量的影响如图6 所示。与对照组相比，DSS 组小鼠血清中IL-6 的含量（74.18 ng/L）显著升高（＜0.01），模型建立成功。与模型组相比，核桃蛋白低剂量组、核桃蛋白高剂量组以及核桃蛋白酶解物组的小鼠血清IL-6 含量分别为44.25、42.72 和40.04 ng/L，显著低于模型组（＜0.01），并与对照组没有显著性差异（＞0.05）。IL-6 是研究最深入的细胞因子，是治疗慢性炎症的药物靶标，可刺激黏附分子的产生和内皮活化，以及多形核细胞和单核细胞对炎症灶的结合和募集。IL-6 的选择性抑制剂可以有效抑制IBD。因此，在本研究中核桃蛋白及其酶解物通过降低IL-6 的含量来有效减轻结肠炎症状。

图6 核桃蛋白及其酶解物对DSS 诱导结肠炎小鼠血清中IL-6 含量的影响Fig.6 Effect of walnut protein and its hydrolysate on IL-6 content in the serum of the DSS-induced colitis mice

核桃蛋白及核桃蛋白酶解物对DSS 诱导的结肠炎小鼠血清中TNF-含量的影响如图7 所示。结果显示，与对照组相比，模型组小鼠血清中TNF-的含量高达120.53 ng/L，是对照组的3.48 倍（＜0.01）。灌胃核桃蛋白及核桃蛋白酶解物后，核桃蛋白低剂量组、高剂量组以及核桃蛋白酶解物组小鼠血清的TNF-含量分别为64.54、62.72 和61.39 ng/L，显著高于对照组（＜0.05），且极显著低于模型组（＜0.01）。TNF-是由巨噬细胞和单核细胞产生的一种促炎细胞因子，在急性炎症反应和其他促炎细胞因子产生中起重要作用。灌胃核桃蛋白和核桃蛋白酶解物能显著抑制DSS 引起的小鼠血清中TNF-含量升高，减缓结肠炎发病时间，减轻炎症反应。

图7 核桃蛋白及其酶解物对DSS 诱导结肠炎小鼠血清中TNF-α 含量的影响Fig.7 Effect of walnut protein and its hydrolysate on TNF-α content in the serum of the DSS-induced colitis mice

2.5 核桃蛋白及其酶解物对结肠炎小鼠血清MPO 酶活性的影响

核桃蛋白及核桃蛋白酶解物对DSS 诱导的结肠炎小鼠血清中MPO 酶活的影响如图8 所示。结果显示，在引用水中添加DSS 后，与对照组相比，模型组小鼠血清中MPO 酶的活力显著增加（＜0.01），结肠炎模型建造成功。核桃蛋白低剂量组、核桃蛋白高剂量组和核桃蛋白酶解物组小鼠血清中的MPO酶活力略高于对照组但极显著低于模型组（＜0.01）。MPO 是中性粒细胞的一种酶，是中性粒细胞浸润的一个重要指标，在肠道发炎组织中MPO 酶活性升高，生成有害的次氯酸，从而加剧炎症反应。核桃蛋白及其酶解物进入小鼠的胃肠道后，经过胃肠道消化酶的消化后，生成分子量较小的小肽及氨基酸，这些小分子物质在小肠末端被吸收后，降低了结肠炎小鼠血清中MPO 酶的活性，从而减轻结肠炎反应。

图8 核桃蛋白及其酶解物对DSS 诱导结肠炎小鼠血清MPO 酶活力的影响Fig.8 Effect of walnut protein and its hydrolysate on MPO activity in the serum of the DSS-induced colitis mice

2.6 核桃蛋白及其酶解物对结肠炎小鼠结肠组织的形态学影响

通过分析结肠的组织学和形态学变化评估了核桃蛋白及其酶解物给药对组织损伤严重程度的影响。DSS 处理会引起的粘膜屏障功能的物理破坏，通常在DSS 处理的小鼠中会观察到与病理学改变相关的炎症的组织学现象，包括炎症细胞浸润，胎盘侵蚀和结肠溃疡等。该研究中小鼠结肠组织形态如图9 所示，结果显示，对照组的结肠切片显示出正常腺体的典型特征，上皮中的杯状细胞丰富，无粘膜增生，浸润的免疫细胞较少（图9a）。相比之下，经DSS 处理的模型组结肠粘膜结构丧失，炎性细胞浸入粘膜和粘膜下层，并且结肠组织的各层均出现较强的细胞炎症（图9b）。在治疗组中，低剂量与高剂量核桃蛋白组（图9c、图9d）的结肠组织中存在一定量的炎症细胞，但炎症细胞的数量少于模型组，组织的细胞结构基本完整。核桃蛋白酶解物组（图9e）仍然可见少量炎症细胞浸润到粘膜和粘膜下层，但组织的细胞结构基本完整，形态接近对照组。灌胃核桃蛋白及核桃蛋白酶解物对DSS 诱导的细胞形成和多灶性黏膜溃疡均显示出明显的预防和缓解作用。根据组织学分析，灌胃核桃蛋白及核桃蛋白酶解物均可改善DSS 诱导的急性结肠炎小鼠的结肠炎症。

图9 核桃蛋白及其酶解物对DSS 诱导结肠炎小鼠的结肠组织形态影响（H&E 染色）Fig.9 Photomicrographs of H&E-stained colon sections from walnut protein and its hydrolysate administered DSS-induced mice

综合以上实验结果，核桃蛋白在胃肠道消化酶的作用下，可以形成具有抗结肠炎活性的小分子肽段，与商业蛋白酶体外酶解得到的核桃蛋白酶解物相似。在一定浓度的条件下，经过胃肠消化后的核桃蛋白及核桃蛋白酶解物可以通过抑制促炎细胞因子分泌，促进抗炎因子产生以及保护肠道上皮屏障的完整性来改善DSS 诱导的急性结肠炎小鼠的症状，对结肠炎的急性发病阶段具有较好的保护作用，这与皮蛋蛋白的胃肠消化物、大豆衍生肽、蛋清卵转铁蛋白的抗炎活性研究结果相似。

3 结论

本研究通过氨基酸组成评价了核桃蛋白的营养与消化特性，并通过DSS 诱导的结肠炎小鼠模型探究了核桃蛋白与核桃蛋白酶解物的抗炎效果。结果显示，核桃蛋白是一种高消化率的优质植物蛋白，经过胃肠消化后可以缓解DSS 诱导的结肠炎小鼠的临床症状，减缓结肠炎导致的小鼠体重下降，抑制促炎细胞因子的分泌，改善结肠炎小鼠的形态学特征，减轻结肠组织损伤。核桃蛋白的直接利用不仅避免了过度加工引起的资源浪费，而且为预防结肠炎的发生和发展的功能性食品的开发提供理论依据。