HE 染色在临床病理诊断中的应用价值研究

刘微

病理诊断是对疾病确诊的主要方式之一,其具有准确、客观、权威等特点,但是此种方法检查结果准确性会受到操作人员具体操作水平的影响,且会受到切片质量、染色效果的影响［1］。同时临床进行病理检查时尚无具体标本检验的时间规范,这样则可能导致病理组织受到脱水不完全等的影响而出现试剂浓度变化,以此对病理制片的质量造成影响,导致患者疾病诊断的难度提高,影响诊断结果的准确性［2,3］。因此,应合理改进HE 染色技术,以此促进病理诊断准确性的提高。本研究主要对HE 染色在临床病理诊断中的应用价值进行分析,报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 以2018 年1 月～2020 年12 月本院72 张病理组织石蜡切片为研究对象,随机分为实验组和对照组,各36 张。实验组中,胃肠肝胆制片12 张,脂肪组织制片9 张,子宫内膜制片8 张,骨制片7 张。对照组中,胃肠肝胆制片11 张,脂肪组织制片8 张,子宫内膜制片9 张,骨制片8 张。两组的一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。见表1。

表1 两组的一般资料比较(张)

1.2 方法 对照组病理诊断中实施常规HE 染色,将病理组织放置于固定液中,以此促进蛋白质更好的凝固,最大程度保持细胞组织结构,以酒精作为脱水剂实施脱水干预,将脱水后的相关组织在二甲苯中存放,其中的酒精被全部置换后进行浸蜡包埋处理,通过切片机实施标本的切片,厚度为5～6 mm,薄片水浴烫平烘干处理,之后粘贴标签。采用二甲苯脱去石蜡,以70%、80%、95%浓度的酒精加蒸馏水,蜡脱水洗后进行相应的染色处理,其中加入苏木精时会出现细胞核以及核糖体变蓝的情况,之后继续将伊红染料置入,可见细胞质变为红色或淡红色,分析操作中存在的缺陷,并制定相应的改进措施,在实验组中应用。

实验组病理诊断中实施改进HE 染色,结合病理组织存在的特点,确定具体染色的方法,并合理控制固定和脱水所需时间。将病理组织置于固定液中,可促使蛋白质的凝固,以此保持细胞组织结构,以酒精作为脱水剂,实施脱水干预,脱水后的组织在二甲苯中放置,在组织被酒精所置换后实施浸蜡包埋干预,采用切片机对标本进行切片处理,控制厚度范围为5～6 mm,水浴对薄片烫平处理,并进行烘干,粘贴标签。若标本的体量较小,则适当缩短缩水时间和固定时间,对于大体量的脂肪组织标本,则相对延长固定时间和脱水时间。染色的过程中,密切关注制品的厚度和温度,并以制品的厚度和温度为参考,合理调整操作的时间。新产品使用前,应首先实施试染操作,采用有色瓶保存染色中需要的试剂,在染色瓶上粘贴标签,包括名称、含量、时间等,分析具体的情况,确定是否需要进行冷藏。染色产生化学反应后,进一步进行研究,并与二次检测的结果进行比较,若为试剂或染色液原因所致,则及时更换。在检查的过程中,确保制品均处于干燥状态,避免对检查的结果产生不良影响。染色完成后,对制片情况观察,采用显微镜查验结果。

1.3 观察指标 比较两组的病理诊断符合率,即胃肠肝胆制片、脂肪组织制片、子宫内膜制片、骨制片诊断符合率。

1.4 统计学方法 采用SPSS18.0 统计学软件进行统计分析。计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P<0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

实验组骨制片、子宫内膜制片、脂肪组织制片、胃肠肝胆制片诊断符合率分别为85.71%、87.50%、77.78%、91.67%,对照组骨制片、子宫内膜制片、脂肪组织制片、胃肠肝胆制片诊断符合率分别为50.00%、55.56%、50.00%、63.64%。实验组病理诊断总符合率为86.11%,高于对照组的55.56%,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 两组的病理诊断符合率比较(%)

3 讨论

实施病理检查的过程中,病理组织染色的质量会直接影响疾病诊断的结果,从而影响疾病治疗方案的制定,最终影响患者疾病治疗的效果以及预后情况［4,5］。实施病理检查的过程中,染色的质量主要取决于细胞核染色的质量,染色是在物理作用与化学作用下所完成的检验操作,因此应客观分析影响诊断结果的因素,并积极防控,以此促进诊断技术的提高,保证诊断结果的准确性［6,7］。

HE 染色法是石蜡切片染色方法的一种,其主要是采用苏木精碱性染液实施细胞核内核酸、染色质的着色,并实施伊红酸性染料染色处理细胞外基质以及细胞质,应用较为广泛［8］。实施HE 染色中,细胞核染色质量会影响具体的染色质量,在组织中存在大量微小空洞,采用染色剂浸透后与组织结合会出现溶解、扩散的情况,且组织细胞中存在不同水平的碱性物质或酸性物质,与染液中阴离子、阳离子相结合可增强固定的效果［9,10］。送检组织需要实施固定处理,保留组织活性在合理的范围内,以此确保组织形态结构不会发生改变,保证组织与活体时的形态、成分基本一致,防止在后期处理中发生组织自溶的情况［11,12］。组织在原有结构消失或破坏后,会影响制片的质量,从而对诊断的结果造成影响［13,14］。HE 染色法中细胞、组织染色质量比较容易受到脱水、固定、取材等的影响,实施组织染色中需要结合不同的标本,合理选择取材的范围和工具,以此降低对组织结构的影响程度,保持其完整性［15,16］。

HE 染色法具体操作可能会对HE 染色结果造成影响,为了保证染色的质量,在实施染色的过程中应分析其中存在的缺陷,并进行经验的总结,针对性的制定完善方案和改进方案,重点强调取材的方法以及操作的时间,选择操作工具时应最大限度对病理组织结果保留,若使用钳子难以顺利夹取组织,或会对组织造成破坏,则需要更换为针管等操作,保持谨慎吸出组织,最大程度防止标本、组织受到损伤,常规情况下在癌细胞、肿物等坏死组织中较为适用［17,18］。同时,实施病理组织检查时较易出现脱钙的情况,其主要发生于骨组织中,实施操作的过程中需要明确实施脱钙操作,在脱钙操作完成后实施制片干预,尽量保证结构的完整性,确保染色的效果［19,20］。实施组织检查时首先应实施固定处理,尽快送检标本,若不能及时送检或固定处理,则可将标本冷藏,并延长固定处理的时间［21,22］。

本研究中,实验组病理诊断符合率为86.11%,高于对照组的55.56%,差异有统计学意义(P<0.05)。表明改进HE 染色能够促进病理诊断符合率的提高,更好保证诊断结果的准确性。实际实施病理诊断的过程中需要与切片的特点相结合,差别化应用染色技术,合理调整,以此促进切片质量的提高,保证诊断结果的准确性。

综上所述,改进HE 染色在病理诊断中应用有着较高的价值,可更好指导临床疾病的诊治,意义重大。