肺癌CT图像特征与高尔基磷酸化蛋白3、Ki-67的相关性分析

侯海文 李菊慧 唐孝武

近年来，肺癌的发生率逐年升高，CT检查是临床常用技术，是诊断肺癌的重要技术手段之一。Ki-67属于核蛋白，对肿瘤的生物学行为起重要作用，且高表达与病人的预后相关[1]。高尔基磷酸化蛋白3(golgi phosphoprotein 3，GOLPH3)属于高尔基体复合物相关蛋白，在多种恶性肿瘤组织中高表达，且与病人的预后密切相关[2]。本文观察肺癌的CT影像学特征及Ki-67、GOLPH3的表达情况，评估两者之间的关系。

对象与方法

一、对象

2019年1月 ～ 2021年4月在我院接受手术治疗的肺癌病人120例，其中男性75例，女性45例，年龄40～78岁，平均(61.18±7.28)岁。病理分型：腺癌38例，鳞癌42例，小细胞肺癌31例，腺鳞癌9例。病理分期:Ⅰ～Ⅱ级69例，Ⅲ级51例。肿瘤直径1.5～8.3 cm 。纳入标准：(1)病理明确诊断；(2)均给予根治性手术治疗；(3)不合并肺部其他疾病；(4)病人均知情同意，随访资料完整。排除标准：合并其他部位肿瘤或远处转移；合并肺部其他疾病；精神疾病。

二、方法

1.胸部CT检查：使用Siemens 128排CT进行检查。扫描参数:管电压120 kV，管电流200 mAs，层厚8 mm，1 mm薄层重建，增强时经肘静脉以3.5～4.0 ml/s流速注射碘海醇(300 mg I/ml)75 ml，注入对比剂后30～35秒开始扫描。病人取仰卧位，一次屏气先进行全肺平扫，从肺尖到肺底。观察CT图像特征主要表现，包括肿瘤直径、位置、毛刺征象、深分叶征象及坏死空洞。所有CT片均采用双盲方法进行读片，由同一位副主任医师职称以上的放射科医师阅片。

2.病理学分型及免疫组织化学 ：所有标本均术中组织检查获取，采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(streptavidin-perosidase，SP)法检测肺癌组织中Ki-67、GOLPH3的表达。使用免疫组化试剂盒检测肿瘤标志物。 Ki-67蛋白定位于细胞核，GOLPH3蛋白定位于细胞膜，随机观察1 000个细胞，记录阳性细胞比例：< 10 %定义为阴性(-)；阳性细胞10%～49%定义为弱阳性(+)；50%～89%定义为中等阳性(++)；≥90%定义为强阳性(+++)。

3.分析指标：检测肺癌组织中 Ki-67、GOLPH3阳性表达率，分析病人CT特征与Ki-67、GOLPH3表达的相关性。

三、统计学方法

采用SPSS 17.0软件分析数据，计数资料采用例(%)表示，用χ2检验。Spearman相关分析Ki-67和GOLPH3表达的相关性。P<0.05为差异有统计学意义。

结果

1.CT图像特征 ：120例肺癌病人中，病灶直径>3 cm 76例(63.33%)，周围型肺癌61例(50.83%)，无坏死空洞84例(70.00%)，无毛刺征象71例(59.17%)，有深分叶征象79例(65.83%)，见表1。肺癌典型CT图像见图1。

表1 120例肺癌病人CT图像特征

鳞癌病人，轴位(1A)、冠状位(1B)和矢状位(1C)显示右肺上叶囊腔，壁不均匀增厚，后壁形成软组织肿块，侵犯胸壁。腺癌病人，轴位(1D)、冠状位(1E)和矢状位(1F)显示左肺下叶囊腔，壁不均匀增厚，可见分叶、毛刺及胸膜凹陷。腺癌病人，轴位(1G)、冠状位(1H)显示右肺下叶囊腔，壁不均匀增厚，囊内有分隔，可见分叶、毛刺及囊腔周围磨玻璃图1 肺癌的典型CT征象

2.Ki-67和GOLPH3在肺癌组织中的表达：120例肺癌组织中，Ki-67阳性率为88.33%(106/120)；GOLPH3阳性率为79.17%(95/120)。Spearman相关性分析表明，Ki-67、GOLPH3在鳞癌型肺癌组织中的表达呈正相关(r=0.381，P=0.000)，在腺癌型肺癌组织中的表达呈正相关(r=0.271，P=0.018)。见图2。

A、C、E：Ki-67在肺癌组织中强、弱及中等表达；B、D、F：GOLPH3在肺癌组织中强、弱及中等表达图2 Ki-67和GOLPH3在肺癌组织中的表达(SP×400)

3.Ki-67和GOLPH3的表达与CT征象的关系：有毛刺征象病人肺癌组织Ki-67和GOLPH3表达阳性率高于无毛刺征象者，有深分叶征象病人肺癌组织Ki-67和GOLPH3表达阳性率高于无深分叶征象者，有坏死空洞病人肺癌组织Ki-67和GOLPH3表达阳性率高于无坏死空洞者，差异有统计学意义(P=0.001，0.015，0.002)，(P=0.001，0.002，0.000)；肿瘤直径>3 cm、肺癌类型为中央型病人肺癌组织Ki-67和GOLPH3表达阳性率高于肿瘤直径≤3 cm、肺癌类型为周围型者，差异无统计学意义(P>0.05)。提示坏死空洞、毛刺征象、深分叶征象与Ki-67和GOLPH3表达有相关性，而肿瘤直径、肿瘤位置与Ki-67和GOLPH3表达无关。见表2和表3。

表2 肺癌组织中Ki-67表达与CT图像特征的关系

表3 肺癌组织中GOLPH3表达与CT图像特征的关系

4.Ki-67和GOLPH3的表达与病理分级的关系：Ki-67、GOLPH3表达在腺癌、鳞癌、腺鳞癌及小细胞肺癌4种病理类型间比较差异有统计学意义(P<0.05)。病理分级Ⅲ～Ⅳ的表达高于Ⅰ～Ⅱ级的表达，差异有统计学意义(P<0.05)。见表4、5。

表4 病理类型、病理分级与Ki-67表达的关系

表5 病理类型、病理分级与GOLPH3表达的关系

讨论

肺癌是人类常见恶性肿瘤。CT作为肺癌早期诊断的手段之一，操作简单、时间短、分辨率高。CT图像特征主要有肿瘤直径、肿瘤位置、坏死空洞、毛刺征及深分叶等[3]。短毛刺征的病理基础为肿瘤向周围浸润生长，侵犯周围组织，导致边缘毛糙，呈毛刺状[4]。

空泡征的病理基础为肿瘤生长速度过快，导致肿瘤内部血供不足，引起肿瘤坏死[5]。分叶征的病理基础为肿瘤在不同肺叶中的生长速度、方向不一致导致，虽然部分良性病变也会出现分叶征，但它的出现是恶性病变的可靠征象[6]。我们将肿瘤直径3 cm作为临界值[7]。结果表明，120例肺癌中，病灶直径>3 cm，无坏死空洞，无毛刺征象，有深分叶征象病人居多，提示CT典型图像特征对肺癌诊断价值高。江海涛等[8]研究表明，肺癌病人的CT特征表现为坏死空洞，毛刺征象，深分叶，与本研究结果基本一致。

GOLPH3属于高尔基体复合物相关蛋白，是近年来发现的首个定位于反面高尔基网的癌基因，在促进肿瘤发生发展过程中发挥至关重要的作用。多中心研究表明，GOLPH3可以促进多种肿瘤细胞的增殖和迁移[9-10]。有研究表明，GOLPH3在结直肠癌组织中存在高表达，与肿瘤的临床病理因素有关[11]。另外研究表明，早期非小细胞肺癌组织中高表达，且GOLPH3表达与肿瘤组织中的血管密度、预后差密切相关[12]。Ki-67属于核蛋白，在细胞侵袭、转移及增殖中起作用，在多种恶性肿瘤组织中高表达，与预后相关[13]。大量研究表明，Ki-67在多种恶性肿瘤组织中高表达，且与病人的预后密切相关[14]。我们研究结果表明，Ki-67和GOLPH3在肺癌组织中高表达，两者呈正相关。

尽管对Ki-67、GOLPH3在肺癌中表达研究较多，但其与肺癌组织学类型是否相关目前意见尚不统一。本研究发现Ki-67在腺癌、鳞癌的表达无统计学差异。但也有研究表明，腺癌的Ki-67的表达明显高于鳞癌。本组病例中Ki-67、GOLPH3在腺癌、鳞癌、腺鳞癌及小细胞肺癌四种病理类型间差异有意义，Ⅲ～Ⅳ中的表达显著高于Ⅰ～Ⅱ级，与以往研究一致[15],表明恶性程度高的肿瘤细胞生长旺盛需要更多的营养物质，从而刺激Ki-67、GOLPH3的高表达。

肺癌的Ki-67表达与CT图像征象的关联性已有报道[16]。研究表明，肺浸润性腺癌的CT增强值、增强方式与Ki-67表达呈正相关[17]。也有研究提示，周围型肺癌CT征象，如深分叶征、瘤体直径、增强CT值、胸膜凹陷征及支气管气相与Ki-67表达相关[18-19]。我们分析了CT征象(肿瘤直径、位置、毛刺征象、深分叶征象及坏死空洞)与肺癌Ki-67、GOLPH3表达的相关性，结果表明，有毛刺征象病人肺癌组织Ki-67和GOLPH3表达阳性率高于无毛刺征象者，有深分叶征象病人肺癌组织Ki-67和GOLPH3表达阳性率高于无深分叶征象者，有坏死空洞病人肺癌组织Ki-67和GOLPH3表达阳性率高于无坏死空洞者。提示Ki-67和GOLPH3阳性者肿瘤细胞分化差，恶性度高，具有更高的侵袭力。可能是因为GOLPH3、Ki-67促进肿瘤内组织血管生长，促进肿瘤的增殖、浸润能力，使肿瘤组织向四周淋巴管和血管浸润。

本研究尚存在一定的局限性，未对更多CT特征与免疫指标进行分析，未能进行随访。

肺癌的CT图像特征与Ki-67和GOLPH3表达存在一定的相关性，综合考虑影像表现、临床资料与免疫组化指标有助于提高诊断率。