金银花醇沉液的分离方法探讨

尧 忱，刘朝猛，龚 军，胡莹莹

（华润三九（雅安）药业有限公司，四川 雅安 625000）

引言

金银花为忍冬科植物忍冬（lonicera japonica thunb）的干燥花蕾或带初开的花[1]，具有清热解毒、凉散风热之功效，所含化学成分有绿原酸、异绿原酸、黄酮化合物、芳樟醇和双花醇等，具有抑菌、抗病毒、抗炎、免疫调节等作用，为最常用中药之一[2]。绿原酸（CM omgemcacid）和异绿原酸（isochlorogenicaeid）是金银花的抗菌有效成分，银黄注射液、双黄连注射液、茵栀黄口服液等多种中药复方制剂均含有金银花[3]。金银花提取物的提取精制工艺常为水提醇沉法。采用水提取法的水提液往往溶解有大量的淀粉、树胶、蛋白质、果胶、多糖、黏液质色素等，通过加入适量的乙醇，使这类醇不溶物析出沉淀，吸取的乙醇上清液含有鞣质、生物碱、醇溶性氨基酸、甙类等，藉此来除去杂质，提取药用有效成分[4]。水提液经醇沉后需进行固液分离，收集液体，弃去固形物（杂质）。因金银花水提液醇沉后析出物较多且沉淀物含液量较高，醇沉后的固液分离如只是简单抽取上清液直接弃去沉淀物，在大生产中存在两个问题：一是药液损失较大，造成提取物收率降低；二是含醇含液量较高的沉淀物直接弃掉，有安全、环保风险。因此在金银花提取物的制备工艺中，在醇沉后的固液分离中如何降低醇沉固形物中的含液率，提高分离效率，是需要重点考虑的。中药提取液常用分离设备有板框过滤器、管式离心机、平板式（三足式）离心机、碟片式离心机及隔膜式压滤机等，且分离设备往往配套不同材质的滤布及滤纸等，需根据提取液及醇沉析出物的特点进行选择使用，以过到最佳效果。本文对大生产中使用板框过滤器、平板式吊袋离心机、隔膜式压滤机三种设备分离金银花醇沉液的方法进行研究，考察分离后的药液量、澄清度及绿原酸含量，对三种分离方法进行评价。

1 试验仪器与材料

1.1 仪器设备

平板式吊袋离心机，PSD1250 型，苏州业之峰离心机制造有限公司；板框过滤器，TY400 型，海宁永胜膜过滤设备制造有限公司；隔膜式压滤机，XMYG20/800X800-u 型，景津环保股份有限公司；高效液相色谱仪，Agilent 1260。

1.2 试剂与对照品

色谱乙腈，默克，批号JA 089830；甲醇，分析醇，成都市科隆化学品有限公司；绿原酸对照品，批号：110753-201817，中国食品药品检定研究院。

1.3 试验样品

金银花醇沉液，批号200301-200309。

2 方法与结果

2.1 金银花醇沉液不同分离方法（见下页表1）

表1 分离金银花醇沉液的不同方法

方法一：金银花加水煎煮，合并滤液减压浓缩，加入2.8 倍乙醇，搅拌1 h，静置1 h 后，抽取上清液经板框过滤机（滤纸）过滤，滤液减压浓缩，测定绿原酸含量。

方法二：金银花加水煎煮，合并滤液减压浓缩，加入2.8 倍乙醇，搅拌1 h，在搅拌状态下抽取药液经平板式吊袋离心机（尼龙滤布）过滤，滤液减压浓缩，测定绿原酸含量。

方法三：金银花加水煎煮，合并滤液减压浓缩，加入2.8 倍乙醇，搅拌1 h，在搅拌状态下抽取药液经隔膜式压滤机（锦纶滤布）过滤，滤液减压浓缩，测定绿原酸含量。

2.2 滤液澄清度检查

取经分离（过滤）后的药液约100 mL，倒入容量为250 mL的三角烧瓶内，对光目视，应澄清。

2.3 绿原酸含量测定

2.3.1 色谱条件与系统适用性实验

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸溶液（0.4%）（体积比为13∶87）为流动相；检测波长为327 nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于1 000。

2.3.2 对照品溶液的制备

取绿原酸对照品，精密称定，置棕色量瓶中，加75%甲醇制成每10 mg/mL 的溶液，即得。

2.3.3 供试品溶液的制备

精密量取金银花醇沉滤液的浓缩液2 mL，置50 mL量瓶中，加注射用水稀释至刻度，摇匀，过滤，即得。

2.3.4 测定法

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

2.4 实验结果

方法一采用抽取上清液采用板框过滤器过滤金银花醇沉液，时间最短，但药液损失最大，主要原因为金银花醇沉物较为松散，内含药液较多；方法二使用离心机分离金银花醇沉液，滤液较为浑浊，达不到工艺要求。此外，药液损失仍然较大，离心机滤袋上拦截的醇沉物（滤饼）含液量仍然较高；方法三使用隔膜式压滤机过滤金银花醇沉液，时间较长（约一半时间为停机去除滤布上的滤饼，滤饼含液量很低），药液损失较低，收率最高。实验及检测数据见表2，不同方法的实验及检测数据均值比较见表3。

表2 不同方法分离金银花醇沉液比较

表3 不同方法分离金银花醇沉液比较（均值）

3 结果讨论

用不同分离方法分离金银花醇沉液，从时间上看，方法一（板框过滤器）≤方法二（平板式离心机）≤方法三（隔膜式压滤机）；从滤液澄清度上看，方法一、三澄清，方法二浑浊达不到要求；从过滤收率上看，方法一（板框过滤器）≤方法二（平板式离心机）≤方法三（隔膜式压滤机）；从含量上看，三者无差别。方法一和方法二分离出的醇沉固形物含液量较高，如应用于大生产，不仅影响产品收率，且处理滤饼较困难，不易达到环保要求；而方法三优点是收率高，滤饼含液量极低，符合环保要求，虽然分离时间较长一些（高于其他二种方法20%），但相对于它的优点（收率高、滤饼符合环保要求）是完全可以接受的。此外，隔膜式压滤机使用的滤布经清洗处理可以反复使用，而板框过滤机使用的滤纸为一次性用品，从成本及环保上考虑使用隔膜式压滤机都是更好的选择。因此，综合安全（环保）、质量、成本三个生产管理的重要指标考虑，推荐在大生产中使用隔膜式压滤机分离金银花醇沉液。

金银花醇沉液析出物特点是黏性较小、呈松散状，使用隔膜式压滤机分离效果较好，生产结束后压滤机滤布上的滤饼也易于清除；同理，醇沉析出物物理性质相似（黏性较小、呈松散状）的栀子、五味子等中药醇沉液，也可使用隔膜式压滤机进行分离。但如茵陈、麦冬、红花等中药醇沉液，醇沉析出物黏稠且较为致密，使用压滤机不仅易造成滤布过早堵塞影响过滤，且滤布上的滤饼因黏性较大清除困难，造成生产效率低下。

使用隔膜式压滤机，滤布的选择很重要，在过滤过程中起着很关键的作用；滤布有丙纶、涤纶及锦纶等。丙纶布具有质轻、强度高、弹性好、耐酸、耐碱、耐磨损，质地坚牢耐用，而且无毒；涤纶滤布耐酸不耐碱,耐高温；锦纶布耐碱不耐酸。滤布性能的好坏，直接影响过滤的效果，为了达到比较理想的过滤效果和速度，需根据物料的颗粒大小、密度、黏度、化学成分和过滤工艺条件来进行选择。