血清Hcy、hs-CRP及抗β2糖蛋白1抗体、抗心磷脂抗体与脑梗死的关系

陶晓明，刘伟，陈向华，宗春光，丁萌，赵春楠，尤立扬

(承德医学院附属医院，1.检验科；2.神经内科；3.体检科，河北 承德 067000)

脑梗死是神经科常见病，发病率、致残率和致死率高是该病的特点。目前，临床对于急性脑梗死危险因素的研究较多，大量的研究[1]已证明，高脂血症、动脉粥样硬化、高血压等是导致急性脑梗死发生的危险因素，心房血栓、吸烟、糖尿病等也与急性脑梗死的发生有密切关系。但上述诸多危险因素只能部分解释急性脑梗死的发生，如急性脑梗死患者中仅有15%左右是由高脂血症、动脉粥样硬化引起，有10%左右是由高血压等引起，而大部分患者急性脑梗死发生的原因不明。由此有学者推断尚有新的危险因素未发现。神经内分泌系统的炎症反应和氧化应激，被认为是脑梗死病理生理学的重要方面。近年来，相关研究[2]发现，脑梗死患者中部分生物标志物会出现显著的改变，在高危患者筛查中有极大的潜力。同型半胱氨酸(Hcy)、超敏 C 反应蛋白(hs-CRP)是动脉粥样硬化型的危险因素[3]。最近，抗磷脂抗体与急性脑梗死的相关性受到临床的高度关注，抗磷脂抗体包括抗β2糖蛋白1抗体(aβ2-GP1)、抗心磷脂抗体(ACA)成为病因研究的热点。本研究旨在探讨Hcy、hs-CRP、aβ2-GP1及ACA水平与脑梗死的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2015年6月至2019年6月承德医学院附属医院诊治的192例脑梗死患者为研究对象，根据入院时美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)评分分为轻度组(NIHSS 评分<5分，n=103)、中度组(NIHSS 评分=5～15 分，n=57)和重度组(NIHSS 评分≥16分，n=32)；另选60名同期年龄、性别配对的体检健康志愿者为对照组。本研究经院医学伦理委员会批准，患者及家属知情同意。纳入标准：(1)病例组患者均为首发急性脑梗死，经CT或MRI检查有明确的梗死病灶，符合中华医学会神经病学分会2014年修订的中国急性缺血性脑梗死诊断标准；(2)对照组为健康体检者。排除标准：(1)合并合并血液系统疾病患者；(2)肝、肾、子宫等器质性病变患者；(3)合并精神疾病患者；(4)合并恶性肿瘤患者。

1.2 方法

分别采集健康体检者体检当天及病例组患者入院次日清晨空腹静脉血10 mL，3 500 rpm离心5 min 分离血清。采用酶循环法检测(贝克曼 AU5800全自动生化仪，试剂盒生产厂家为南京澳林生物科技有限公司)Hcy水平，血清Hcy>15 μmol/L为阳性；采用免疫散射比浊法检测(西门子BNⅡ特种蛋白分析仪及配套试剂)hs-CRP水平，hs-CRP>3 mg/L为阳性;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测aβ2-GP1和 ACA滴度水平，均为IgGAM混合型(试剂盒购自德国欧蒙医学实验诊断股份公司)，严格按说明书步骤操作。aβ2-GP1和ACA单位均以RU/mL表示。

1.3 观察指标

(1)各组对象基线资料：包括年龄、性别、吸烟史、基础疾病、NIHSS评分等；(2)各组对象血清Hcy、hs-CRP、aβ2-GP1及ACA水平；(3)Hcy、hs-CRP、aβ2-GP1及ACA水平对脑梗死的诊断价值；(4)Hcy、hs-CRP、aβ2-GP1及ACA水平诊断脑梗死的准确性。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 各组对象基线资料比较

各组对象年龄、性别、吸烟史比例，差异无统计学意义(P>0.05)；各组对象基础疾病及病例组NIHSS评分比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 各组患者基线资料比较

2.2 各组对象血清Hcy、hs-CRP、aβ2-GP1及ACA水平比较

各组对象血清Hcy、hs-CRP、aβ2-GP1及ACA水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)，且重度组>中度组>轻度组>对照组(P<0.05)。见表2。

表2 各组对象血清Hcy、hs-CRP、aβ2-GP1及ACA水平比较

2.3 血清 Hcy、hs-CRP、aβ2-GP1及ACA水平对脑梗死的诊断价值

ROC曲线分析显示，血清Hcy、hs-CRP、aβ2-GP1、ACA的Cut-off值为9.72 μmol/L、2.05 mg/L、14.28 RU/mL、8.93 RU/mL时，AUC曲线下面积(AUC)分别为0.715、0.670、0.729、0.872，对脑梗死诊断有一定的价值。见表3。

表3 血清Hcy、hs-CRP、aβ2-GP1及ACA水平对脑梗死的诊断价值

2.4 各指标诊断脑梗死的准确性比较

192例脑梗死患者及60名对照组健康体检者均以血清Hcy 9.72 μmol/L、hs-CRP 2.05 mg/L、aβ2-GP1 14.28 RU/mL、ACA 8.93RU/mL为Cut-off值，高于Cut-off值为阳性，低于Cut-off值为阴性。以是否发生脑梗死为金标准，采用kappa一致性检验，Hcy诊断脑梗死的kappa=0.285，一致性差；hs-CRP诊断脑梗死的kappa=0.323，一致性差；aβ2-GP1诊断脑梗死的kappa=0.485，一致性一般；ACA诊断脑梗死的kappa=0.499，一致性一般；联合检测以其中任一指标阳性则为阳性。敏感性为94.27%，特异性为50.00%。联合检测诊断脑梗死的kappa=0.613，一致性较好。见表4。

表4 各指诊断脑梗死的准确性比较

3 讨论

研究新的未知的引起脑梗死的因素，对于脑梗死的一级和二级预防有重大意义。Hcy是一种含硫氨基 酸，临床研究[4-5]已证实，高同型半胱氨酸血症患者血管内皮损伤发生的机率更高，更容易发生脂质氧化及血栓形成等。hs-CRP 是微量存在于血清中一种敏感性较高的炎症标志物，也是不稳定动脉粥样斑块血栓形成的危险信号，其水平升高往往提示血管内皮细胞出现慢性、持续性损伤。既往对于aβ2-GP1、ACA的检测主要用于诊断系统性红斑狼疮、抗磷脂抗体综合征等疾病中。近年来，aβ2-GP1、ACA与脑梗死的关系开始受到临床的广泛关注，有研究[6-9]发现，调整了高血压、高脂血症等传统脑梗死危险因素后，aβ2-GP1、ACA阳性者脑梗死发生的风险约是阴性者的5.6倍。有研究对女性脑梗死患者与健康人群的aβ2-GP1、ACA水平进行了比较，结果显示，前者高于后者，因此认为高aβ2-GP1、ACA水平是女性脑梗死发生的独立危险因素[10]。

在各组患者基线资料比较发现，病例组患者高血压、冠心病、糖尿病等的构成比例高于对照组(P<0.05)，说明传统的危险因素是脑梗死发生的重要原因之一。但危险因素并不止于此。健康对照组与脑梗死不同严重程度亚组间血清Hcy、hs-CRP及aβ2-GP1、ACA水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)，且重度组>中度组>轻度组>对照组(P<0.05)。提示血清Hcy、hs-CRP及aβ2-GP1、ACA水平与脑梗死密切相关，血清Hcy、hs-CRP及aβ2-GP1、ACA水平越高，脑梗死的程度越严重。脑梗死患者hs-CRP水平高于对照组(P<0.05)，原因可能是由于动脉粥样硬化引发慢性血管炎症，血管内皮细胞损伤所致，hs-CRP水平越高，血管炎症，血管内皮细胞损伤越严重，脑梗死程度越严重。而机体代谢受阻时Hcy在体内聚集，会加重炎症反应、氧化应激及血管内皮损伤。aβ2-GP1、ACA升高主要反应自身免疫和感染两种疾病状态，其生物学功能及产生的机制尚未完全阐明，有研究[11-12]认为 aβ2-GP1、ACA是一组针对蛋白复合物和带负电荷的磷脂或磷脂的异质性抗体。另有研究[13-14]认为与血小板减少、血栓形成有关。而aβ2-GP1、ACA可能通过多种方式干扰凝血系统，随着aβ2-GP1、ACA水平升高，血液呈现高凝状态,继而血栓形成增加，从而加速动脉粥样硬化进程，最终斑块破裂而发生致脑梗死。所以如检测高危人群血清Hcy、hs-CRP及aβ2-GP1、ACA水平升高，一是提示血液高凝状态，有血栓形成的风险，二是提示存在慢性血管炎症，血管内皮细胞损伤，应引起重视，采取积极的措施做好脑梗死的一级防治。本研究结果显示，血清Hcy、hs-CRP、aβ2-GP1、ACA的Cut-off值为9.72 μmol/L、2.05 mg/L、14.28 RU/mL、8.93 RU/mL时，Youden最高，以上各指标单独检测的敏感度分别为77.60%、81.77%、83.85%、89.06%，特异度分别为53.33%、51.66%、61.67%、60.00%。而联合检测的敏感性为94.27%，特异性为67.74%。联合检测敏感度和特异度均高于单一指标检测。kappa一致性检验结果显示，Hcy、hs-CRP诊断脑梗死的一致性差；aβ2-GP1、ACA诊断脑梗死的一致性一般；联合检测诊断脑梗死的一致性较好。

综上，血清Hcy、hs-CRP、aβ2-GP1、ACA与脑梗死的严重程度相关，在高风险人群脑梗死筛查中，aβ2-GP1、ACA的诊断价值高于Hcy、hs-CRP，四种指标联合可提高准确率。本研究由于研究时间较短，样本量不足，研究结果有待进一步扩大样本加以证实。