PGR、G-17、miR-27b-3p对慢性胃炎患者预后不良和癌变的预测价值

陈树添，黄泽洧，林明河，林欣乾，赵楷

汕头市第二人民医院检验科，广东汕头 515031

慢性胃炎是消化系统常见的疾病之一，主要分为慢性浅表性胃炎、慢性糜烂性胃炎、慢性萎缩性胃炎三种，不同类型慢性胃炎的临床表现有所不同，发展成胃癌的风险也有所差异［1］。胃镜检查和胃黏膜活检是慢性胃炎最可靠的诊断手段，但检查过程患者较为痛苦且组织活检成本较高。有研究报道，慢性胃炎出现胃黏膜萎缩时，血清胃蛋白酶原Ⅰ（PGⅠ）、胃蛋白酶原Ⅱ（PGⅡ）水平升高，而PGⅠ/PGⅡ（PGR）则会降低，并且PGR可作为慢性胃炎病情进展的重要预测指标之一［2］。胃泌素17（G-17）是一种多肽类激素，由胃窦部G细胞分泌，是反映胃黏膜损伤的重要指标。PGR、G-17等作为胃黏膜“血清学活检”指标在胃肠疾病的辅助诊断和治疗监测中具有重要价值［3］。miR-27b-3p定位于人9号染色体，能够参与多种胃部疾病的发生、发展。有研究报道，慢性胃炎癌变过程中，血清miR-27b-3p 水平显著升高［4］。因此，PGR、G-17、miR-27b-3p有可能成为预测慢性胃炎患者预后不良或癌变的生物标志物，但目前相关研究报道较少。本研究探讨了PGR、G-17、miR-27b-3p对慢性胃炎患者预后不良和癌变的预测价值。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2018年2月—2020年10月在汕头市第二人民医院就诊的慢性胃炎患者257 例（观察组），男189 例、女68 例，年龄38～65（48.56±4.91）岁。慢性胃炎诊断依据《中国慢性胃炎共识意见精简版（2017 年，上海）》［5］，并经胃镜检查证实。纳入标准：①符合慢性胃炎诊断标准；②年龄≥18岁；③入组前1个月内未服用可能干扰研究结果的药物。排除标准：①合并其他胃部疾病者；②既往有胃部手术史者；③合并心、肝、肺、肾等重要脏器严重疾病者；④合并其他部位肿瘤者；⑤合并造血系统疾病或神经精神疾病者。随机选取同期在汕头市第二人民医院体检健康的志愿者153 例（对照组），男102例、女51 例，年龄39～64（38.49±3.15）岁。两组性别、年龄具有可比性。本研究经汕头市第二人民医院医学伦理委员会批准（伦理编号：GD11001823），所有研究对象或其家属知情同意并签署书面知情同意书。

1.2 血清PGⅠ、PGⅡ、G-17、miR-27b-3p 检测 观察组入组次日，对照组体检当日，采集清晨空腹肘静脉血，离心留取血清。取部分血清，采用日立7180型全自动生化分析仪检测血清PGⅠ、PGⅡ，采用TESMI i100 全自动化学发光免疫分析仪检测血清G-17，计算PGR。PGR=PGⅠ/PGⅡ。

另取部分血清，采用血清miRNA 提取分离试剂盒提取血清总RNA，经紫外可见分光光度计鉴定，提取的总RNA纯度和浓度合格。按逆转录试剂盒说明，将总RNA 逆转录为cDNA。以cDNA 模板，按RTFQPCR试剂盒说明进行PCR扩增。所有引物由苏州金唯智生物科技有限公司设计合成。引物序列：miR-27b-3p 上游引物5"-TTCACAGTGGCTAAGTTCTGC-3"，下 游 引 物5"-TCACAGTGAACCGGTCTCTTT-3"；GAPDH 上游引物5"-GTCAAGGCTGAGAACGGGAA-3"，下游引物5"-AAATGAGCCCCAGCCTTCTC-3"。按RTFQ-PCR 试剂盒说明配制反应体系。反应条件：90 ℃15 min，80 ℃6 s、60 ℃15 s、52 ℃40 s 共30 个循环。PCR扩增反应结束，绘制熔解曲线，收集循环阈值（CT）数。以GAPDH 为内参，采用2-ΔΔCT法计算miR-27b-3p水平。

1.3 预后评估 所有慢性胃炎患者规范治疗3 个月后进行预后评估。预后良好：临床症状明显改善，各项体征趋于正常，Hp 检测阴性，生活行为有所改善；预后不良：临床症状无明显改善，各项体征仍不正常，Hp 检测阳性，生活行为无明显改善。经规范治疗3个月，预后良好202例、预后不良55例。

1.4 胃癌风险筛查 慢性胃炎患者入组后，根据《中国早期胃癌筛查流程专家共识意见（草案）》［6］中新型胃癌筛查评分系统，筛查胃癌风险。新型胃癌筛查评分系统总分0～23分，其中17～23分为高危、12～16分为中危、0～11分为低危。257例慢性胃炎患者中，高危62例、中危74例、低危121例。

1.5 统计学方法 采用SPSS26.0 统计软件。计量资料经Kolmogorov-Smirnov 检验符合正态分布，以± s 表示，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t 检验，两组比较采用独立样本t 检验。计数资料比较采用χ2检验。预测效能分析采用受试者工作特征（ROC）曲线。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清PGⅠ、PGⅡ、G-17、miR-27b-3p 水平及PGR比较 见表1。

表1 两组血清PGⅠ、PGⅡ、G-17、miR-27b-3p水平及PGR比较（±s）

表1 两组血清PGⅠ、PGⅡ、G-17、miR-27b-3p水平及PGR比较（±s）

注：与对照组比较，*P＜0.05。

组别对照组观察组n 153 257 PGⅠ（ng/mL）90.23± 9.04 129.36±41.37*PGⅡ（ng/mL）6.73±0.65 12.54±8.97*PGR 13.58±1.37 8.89±4.85*G-17（pmol/L）9.38±0.95 6.23±0.64*miR-27b-3p 0.89±0.12 5.13±2.19*

2.2 慢性胃炎患者预后良好者与预后不良者血清PGⅠ、 PGⅡ、G-17、miR-27b-3p水平及PGR比较 见表2。

表2 慢性胃炎患者预后良好者与预后不良者血清PGⅠ、PGⅡ、G-17、miR-27b-3p水平及PGR比较（±s）

表2 慢性胃炎患者预后良好者与预后不良者血清PGⅠ、PGⅡ、G-17、miR-27b-3p水平及PGR比较（±s）

注：与预后不良比较，*P＜0.05。

预后情况预后不良预后良好n 55 202 PGⅠ（ng/mL）134.51±35.27 105.56±38.63*PGⅡ（ng/mL）13.67±7.63 9.14±5.75*PGR 8.92±5.09 11.02±2.52*G-17（pmol/L）7.04±0.58 9.06±0.44*miR-27b-3p 5.96±2.18 1.12±0.24*

2.3 PGR、G-17、miR-27b-3p 对慢性胃炎患者预后 不良的预测效能分析 见表3。

表3 PGR、G-17、miR-27b-3p对慢性胃炎患者预后不良的预测效能分析结果

2.4 慢性胃炎患者不同胃癌风险者血清PGⅠ、PGⅡ、G-17、miR-27b-3p水平及PGR比较 见表4。

2.5 PGR、G-17、miR-27b-3p 对慢性胃炎患者胃癌风险的预测效能分析 见表5。

3 讨论

慢性胃炎是消化系统常见的疾病之一，主要分为三种类型，而不同类型慢性胃炎的临床表现有所不同，发展成胃癌的风险也有所差异［1］。胃镜检查和胃黏膜活检是慢性胃炎最可靠的诊断手段，但检查过程患者较为痛苦且组织活检成本较高。而血清学检查具有操作简便、创伤小、重复性好等优点，逐渐成为慢性胃炎患者胃癌风险筛查的重要手段。

表4 慢性胃炎患者不同胃癌风险者血清PGⅠ、PGⅡ、G-17、miR-27b-3p水平及PGR比较（± s）

表4 慢性胃炎患者不同胃癌风险者血清PGⅠ、PGⅡ、G-17、miR-27b-3p水平及PGR比较（± s）

注：与低危比较，*P＜0.05；与中危比较，#P＜0.05。

胃癌风险低危中危高危n 121 74 62 PGⅠ（ng/mL）102.70±39.61 127.27±40.26*144.42±45.34*#PGⅡ（ng/mL）7.55± 8.24 11.06± 9.20*13.41±10.57*#PGR 12.76±5.12 9.78±4.08*6.24±5.02*#G-17（pmol/L）8.50±0.61 6.04±0.62*5.44±0.48*#miR-27b-3p 1.38±0.41 3.45±1.02*5.80±1.80*#

表5 PGR、G-17、miR-27b-3p对慢性胃炎患者胃癌风险的预测效能分析结果

胃蛋白酶原（PG）是胃黏膜特异性功能酶胃蛋白酶的前体，可分为PGⅠ和PGⅡ两种亚型［7-8］。樊宇靖等［9］研究报道，PG 可间接反映胃黏膜的分泌功能，并具有较高的特异性。当人体胃黏膜发生病变时，血清PG水平会发生改变。如胃酸分泌增多或胃黏膜慢性炎症时，在胃酸及炎症因子作用下，血清PGⅠ、PGⅡ水平显著升高；胃酸分泌减少或胃黏膜萎缩和癌变后，血清PGⅠ、PGⅡ水平则逐渐降低。本研究结果显示，观察组血清PGⅠ、PGⅡ水平高于对照组，而PGR 则低于对照组；慢性胃炎患者预后良好者血清PGⅠ、PGⅡ水平低于预后不良者，而PGR 则高于预后不良者；血清PGⅠ、PGⅡ水平慢性胃炎患者癌变高危者＞中危者＞低危者，而PGR 慢性胃炎患者癌变高危者＜中危者＜低危者。进一步研究发现，PGR 对慢性胃炎患者预后不良或癌变具有较高的预测价值。提示PGR 可作为预测慢性胃炎患者预后不良或癌变的生物标志物。

胃泌素由胃窦、胃体、十二指肠等处的G细胞分泌，其中G-17 占胃泌素总量的90%以上，对调节消化系统功能和维持其结构完整性具有重要作用［10］。当胃窦萎缩时，胃窦G细胞数量减少，胃泌素分泌不足，导致血清G-17水平下降；当胃体萎缩时，胃酸分泌量减少，胃窦G 细胞分泌胃泌素增多，导致血清G-17 水平上升［11］。薛辉等［12］研究报道，慢性胃炎患者血清G-17水平升高，通过血清G-17水平能够筛查慢性胃炎的高危人群，对其早期诊断和治疗具有重要意义。本研究结果显示，观察组血清G-17 水平低于对照组；慢性胃炎患者预后良好者血清G-17 水平高于预后不良者；血清G-17 水平慢性胃炎患者癌变高危者＜中危者＜低危者。由此推测，在慢性胃炎发病过程中，胃酸对胃窦部G 细胞分泌胃泌素的反馈抑制作用减弱，导致血清G-17 水平降低，胃黏膜萎缩概率大大增加，最终导致慢性胃炎继发癌变的风险增加。

有研究报道，miR-27b-3p 可作为一种抑癌基因在口腔癌、食管癌、肺癌等组织中异常表达［13］。miR-27b-3p 与靶基因结合后能够抑制其表达，以负调控的方式调节靶基因的表达。在胃癌组织中，miR-27b-3p 可与靶基因酪氨酸激酶样孤儿受体结合，抑制其下游STAT3 信号通路活性［14］。本研究结果发现，观察组血清miR-27b-3p 水平高于对照组；慢性胃炎患者预后良好者血清miR-27b-3p 水平低于预后不良者；血清miR-27b-3p 水平慢性胃炎患者癌变高危者＞中危者＞低危者。由此推测，在慢性胃炎发病过程中，随着病变进展血清miR-27b-3p 水平逐渐升高。

综上所述，PGR、G-17、miR-27b-3p 可作为预测慢性胃炎患者预后不良和癌变的生物标志物，三者联合时预测价值更高。但本研究为单中心回顾性研究，样本量较小，今后还需多中心、大样本量研究进一步验证。