葡萄炭疽病防治药剂的筛选和残留安全性评价*

马桂梅，普继雄，孙秀梅，马泽辉，杨跃明，张俊祥

（1 弥勒市农业技术推广中心，云南652399）（2 中国农业科学院果树研究所）

葡萄炭疽病主要由胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）引起，在我国葡萄产区均有发生[1-2]。葡萄炭疽病菌主要为害近成熟期的葡萄果实，引起果粒腐烂[3]。在云南省弥勒市，葡萄炭疽病发病率20%～30%，受害葡萄失去商品价值，严重影响弥勒市葡萄产业的发展。葡萄炭疽病通常以化学药剂防治为主，化学药剂的长期使用导致葡萄炭疽病菌产生了抗药性[4-7]。因此，筛选高效、低毒、低残留农药，指导葡萄炭疽病防治尤为重要。本研究选取17 种药剂对葡萄炭疽病菌的室内毒力进行了测定，在此基础上开展了田间防效评价和残留安全性评价，旨在为葡萄炭疽病的防治提供参考。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

葡萄炭疽病菌菌株S1，分离于云南省弥勒市一果园的葡萄果实（品种为水晶葡萄），保存于中国农业科学院果树研究所果树植物保护研究中心。

1.2 供试药剂

50%多菌灵可湿性粉剂，由苏农（广德）生物科技有限公司生产；80%代森锰锌可湿性粉剂，由湖南农大海特农化有限公司生产；430 g/L 戊唑醇悬浮剂，由天津华宇农药有限公司生产；20%吡噻菌胺悬浮剂，由日本三井化学AGRO 株式会社生产；41.7%氟吡菌酰胺悬浮剂，由拜尔作物科学（中国）有限公司生产；43%腐霉利悬浮剂，由日本住友化学株式会社生产；450 g/L 咪鲜胺水剂，由天津市施普乐农药技术发展有限公司生产；40%嘧霉胺悬浮剂，由陕西上格之路生物科学有限公司生产；240 g/L 噻呋酰胺悬浮剂，由河北冠龙农化有限公司生产；200 g/L 氯氟醚吡唑酯悬浮剂+200 g/L 吡唑醚菌酯悬浮剂，由巴斯夫欧洲公司生产；25%乙嘧酚悬浮剂，由江西禾益化工股份有限公司生产；50%啶酰菌胺水分散粒剂，由巴斯夫欧洲公司生产；250 g/L 嘧菌酯悬浮剂，由先正达南通作物保护有限公司生产；40%双胍三辛烷基苯磺酸盐可湿性粉剂，由日本曹达株式会社生产；25%吡唑醚菌酯悬浮剂，由山东康乔生物科技有限公司生产；22.5%啶氧菌酯悬浮剂，由美国杜邦公司生产；25%苯醚甲环唑悬浮剂，由深圳诺普信农化股份有限公司生产。

1.3 葡萄炭疽病菌室内药剂筛选

根据每种农药使用浓度的不同，配置相应的3个浓度梯度（表1）的含药PDA 平板。采用菌丝生长速率法[8]测定17 种供试药剂对葡萄病原菌的抑制活性。将葡萄炭疽病菌菌株S1 接种到PDA 培养基上，置于温度26 ℃恒温培养箱、黑暗培养5 d 后，挑取少量菌丝成团状（直径约1 mm），分别接种到含药的PDA 平板上，以无药PDA 平板为对照。每个处理重复4 次，置于温度26 ℃恒温培养5 d，待对照组菌落长满平板时，用十字交叉法测量各处理的菌落直径，计算菌丝生长抑制率。

抑制率（%）=［（空白对照菌落直径-药剂处理菌落直径）/空白对照菌落直径］×100

1.4 田间药效试验

1.4.1 试验地条件

试验于2021 年6—7 月在云南省弥勒市弥阳街道章保社区章保村一葡萄园（东经103°25′59″、北纬24°21′57″）进行。试验地葡萄品种为水晶葡萄，露地栽培，土壤为黏壤土，管理水平中等。

1.4.2 试验设计

试验共设7 个处理（表2），以清水为对照，每个处理重复3 次，试验小区24 m2，随机排列。2021年6 月25 日第1 次施药（未见病果），7 月5 日第2次施药。施药器械为背负式电动喷雾器（东田3WBD-15L 型），喷孔直径0.8 mm，工作压力0.25～0.40 MPa。喷雾时叶片正反面均匀着药、湿润为止。

1.4.3 调查时间和方法

按照《农药田间药效试验准则 第13 部分：杀菌剂防治葡萄炭疽病》（NY/T 1464.13—2007）进行调查。调查方法为每小区随机选取不同部位果穗20个，调查记录每个果穗的总果粒数和病果粒数。

病果率（%）=（病果粒数/总果粒数）×100

防治效果（%）=［（空白对照区施药后病果率-药剂处理区施药后病果率）/空白对照区施药后病果率］×100

1.5 农药残留安全性评价

从各试验小区随机摘取0.5 kg 新鲜葡萄果粒，由中国农业科学院果树研究所农业农村部果品及苗木质量监督检验测试中心完成农药残留量检测，具体参照《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》（GB 2763—2021）进行。测定结果与葡萄中相应药剂最大残留限量进行比较，若测定值小于或等于最大残留限量，则判定农药残留符合国家食品安全标准。

1.6 数据统计方法

试验数据采用DPS 7.05软件进行统计与差异显著性分析[9]。

2 结果与分析

2.1 葡萄炭疽菌的室内药剂筛选

由表1 可知，在17 种供试药剂中，80%代森锰锌可湿性粉剂、430 g/L 戊唑醇悬浮剂、20%吡噻菌胺悬浮剂、450 g/L 咪鲜胺水剂和25%苯醚甲环唑悬浮剂各浓度对葡萄炭疽菌的抑菌效果均较好，菌丝生长抑制率均在86%以上。其中，80%代森锰锌可湿性粉剂500 倍液对菌丝生长抑制率高达95.6%。而50%啶酰菌胺水分散粒剂、240 g/L 噻呋酰胺悬浮剂、50%多菌灵可湿性粉剂各浓度对葡萄炭疽菌的抑菌效果均较差，菌丝生长抑制率均在34%以下。

表1 17 种供试药剂对葡萄炭疽病病原菌菌丝生长的影响

续表1

2.2 田间药效试验结果

田间防效试验结果（表2）表明，第2 次施药后7 d，80%代森锰锌可湿性粉剂500 倍液、430 g/L 戊唑醇悬浮剂2 000 倍液、20%吡噻菌胺悬浮剂1 500倍液、450 g/L 咪鲜胺水剂1 200 倍液、25%苯醚甲环唑悬浮剂1 000 倍液的防治效果分别为86.8%、85.8%、88.7%、93.4%和89.6%，均极显著高于对照药剂50%多菌灵可湿性粉剂500 倍液的防效（55.7%）。第2 次施药后14 d，450 g/L 咪鲜胺水剂1 200 倍液防效达93.7%，防治效果最好。80%代森锰锌可湿性粉剂500倍液和430 g/L戊唑醇悬浮剂2 000 倍液的防效无显著性差异，防效在88%以上。20%吡噻菌胺悬浮剂1 500 倍液和25%苯醚甲环唑悬浮剂1 000 倍液也均表现出较好的防效，防效在86%以上。

表2 6 种药剂防治葡萄炭疽病田间药效试验结果

2.3 农药残留安全性评价

农药残留分析结果表明（表3），在果实成熟前期田间施药2 次后，根据我国《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》（GB 2763—2021）有关检测方法和规定，因吡噻菌胺在葡萄上尚没有制定相应的最大残留限量而无法作出评价外，其他药剂（代森锰锌、戊唑醇、咪鲜胺、苯醚甲环唑）及对照药剂（多菌灵）残留实测值均低于国家标准规定的最大残留限量，符合国家食品安全标准。

表3 供试药剂使用剂量处理后的葡萄农药残留检测结果

3 结论与讨论

通过对17种药剂的室内生物活性测定和5种药剂田间应用试验结果分析得出，咪鲜胺在葡萄炭疽病防治中表现出较高的防治效果，可作为葡萄炭疽病防治的首选药剂。此外，代森锰锌、吡噻菌胺、戊唑醇和苯醚甲环唑也表现较好的防治效果，可以作为葡萄炭疽病防治的备选药剂或轮换使用药剂。这5 种药剂均对葡萄生长无不良影响，药剂残留实测值均低于国家标准规定的最大残留限量，符合国家食品安全标准，建议在生产中推广使用。

在葡萄近成熟时，除了防治葡萄炭疽病外，尚需对葡萄白腐病和葡萄灰霉病进行防治。本研究结果所推荐的药剂中，戊唑醇和苯醚甲环唑可以兼防葡萄白腐病[10-11]，吡噻菌胺可以兼防葡萄灰霉病[12]和葡萄白粉病[13]，而代森锰锌作为一种保护性杀菌剂对葡萄白腐病和葡萄灰霉病均具有良好的预防效果[14-15]。因此，本研究结果为葡萄炭疽病、葡萄灰霉病和葡萄白腐病兼防兼治提供了理论依据。