浊度仪法检测注射用头孢唑林钠溶液的澄清度

于晓娜，刘莹，时佳静，焦云飞，杨轩，李敏，杨梦德，表亚囡

（1.华北制药河北华民药业有限责任公司，石家庄 052165；2.抗生素酶催化与结晶技术国家地方联合工程实验室，石家庄 052165；3.河北省头孢类药物制备技术创新中心，石家庄 052165）

头孢唑林钠属于第一代头孢菌素类抗生素，具有杀菌能力强、毒性低的特点，对革兰氏阳性球菌具有良好的抗菌活性。有研究表明注射用头孢唑林钠溶液的澄清度与细胞毒性有明显的相关性[1]，因此将该检测项作为注射用头孢唑林钠的主要质量控制项目。

《中国药典》2020年版四部通则0902澄清度检查法[2]及《欧洲药典》10.0溶液的澄清度[3]均收载了目视法与浊度仪法，现多采用目视法，若增加浊度仪法，可对目视法无法判断的样品提供补充检测方法。其中仪器法常有三种类型，透射光式、散射光式和透射光-散射光比较测量模式（比率浊度模式）。采用散射光式进行测定时，中国药典报道其仅适用于无色供试品溶液的澄清度测定，同时也有报道称浊度仪无法消除有色溶液颜色对浊度的干扰[4]。因注射用头孢唑林钠溶液有颜色，因此需选择能消除颜色影响的浊度仪。

有文献报道采用哈希浊度仪在860 nm红外LED光源检测澄清度可不受溶液的颜色影响[5]。经咨询厂家同时结合文献[6-7]报道选取TL2310型号浊度仪对注射用头孢唑林钠的溶液澄清度进行方法建立，并进行方法学验证。

1 仪器与试剂

仪器：TL2310型台式浊度计，（860±30）nm下的发光二极管（LED），5 mL比浊管，美国哈希试剂：注射用头孢唑林钠（批号分别为190801、190802、190803、190804、190805、190806）；硫 酸 肼（天津光复）、乌洛托品（天津光复）；纯化水（自制）、2NTU二级标准浊度校准液（哈希）；氯化钴比色液标准物质（北京中科二环科技）、重铬酸钾比色液标准物质（北京中科二环科技）、硫酸铜比色液标准物质（北京中科二环科技）。

2 测定方法与结果

2.1 测定步骤

取纯化水及2NTU二级标准浊度校准液进行仪器校准，将供试品溶液缓慢倒入比浊管中，避免产生气泡，测得浊度值。

2.2 溶液的配制

2.2.1 空白溶液：纯化水

2.2.2 供试品溶液

取本品，按标示量分别加水制成每1 mL中含0.1 g的溶液，立即测定。

2.3 专属性试验

因注射用头孢唑林钠溶液为黄色或黄绿色，因此需考察颜色对浊度的影响。分别取氯化钴比色液标准物质、重铬酸钾比色液标准物质、硫酸铜比色液标准物质按照中国药典2020年版四部通则0901溶液颜色检查法[8]配制黄色及黄绿色标准贮备液，同时配制0.5号～10号黄色及黄绿色标准比色液取样检测。结果见表1，结果显示，各个比色液均与水的浊度值接近，因此溶液的颜色不会干扰测定。

2.4 检测限和定量限试验

取纯化水平行测定11次，3σ/k为本方法检测限，10σ/k为本方法定量限，σ为11次测定值的标准偏差，k为线性的斜率。试验结果见表2，结果显示本方法的检测限为浊度标准原液的0.01%，定量限为浊度标准原液的0.03%，即可测定至与水一样的澄清度。

2.5 线性试验

分别取硫酸肼及乌洛托品按照中国药典2020年版四部通则0902澄清度检查法制备0.5号～4号浊度标准液，取样检测。以浊度标准液的浓度为横坐标（X），浊度值为纵坐标（Y），进行线性回归分析，试验结果见图1。结果显示，各浊度标准液与浊度值线性相关为y= 38.155x+ 0.5627，系数大于0.999，线性相关性良好。

2.6 精密度试验

取供试品溶液，重复测定6次，结果显示，6次溶液的浊度值的RSD值为1.8%，小于10.0%，因此本方法仪器精密度良好；平行配制6份供试品溶液，立即测定，结果显示，6份溶液的浊度值的RSD值为8.2%，小于10.0%，因此本方法重复性良好；取重复性溶液分别于不同天进行测定，结果显示，12份溶液的浊度值的RSD值为10.4%，小于20.0%，因此本方法中间精密度良好。

2.7 回收率试验

0.5号浊度加标溶液：取本品1.0 g，加入适量纯化水转移至10 mL量瓶中，加入浊度标准原液0.25 mL，用纯化水稀释至10 mL，平行配制3份；1号浊度加标溶液：取本品1.0 g，加入适量纯化水转移至10 mL量瓶中，加入浊度标准原液0.5 mL，用纯化水稀释至10 mL，平行配制3份；2号浊度加标溶液：取本品1.0 g，加入适量纯化水转移至10 mL量瓶中，加入浊度标准原液1 mL，用纯化水稀释至10 mL，平行配制3份。

供试品溶液：按“2.2.2”方法配制，平行配制2份。

分别取11份溶液立即进行测定，结果显示，各个浊度标准液的回收率在70%～125%范围内，9份回收率溶液的RSD值的平均值为4.0%，小于15%，因此本方法准确度较好。

2.8 溶液稳定性试验

取供试品溶液室温放置0 min、10 min，分别于每个点取样测定浊度值，测定结果显示10 min内浊度值波动超0.1 NTU，因此本品应立即测定。

2.9 耐用性试验

分别配制（0.1±0.01）g/mL供试品溶液，测定浊度值。测定结果见表3，结果显示供试品溶液浓度波动0.01 g/mL，浊度值波动0.02 NTU，小于0.1 NTU，因此本方法在供试品浓度波动0.01 g/mL范围内耐用性良好。

表3 耐用性结果Tab.3 The result of durability

2.10 样品测定

按“2.2.2”方法配制供试品溶液，同时取“2.4”中1号浊度标准液进行测定，结果见表4，由结果可知，6批样品均满足中国药典限度要求，即小于1号浊度标准液浊度值。

表4 样品测定结果Tab.4 Sample determination results

3 结束语

头孢类抗生素的溶液澄清度检测项为质量控制的关键项，该类溶液多为有色溶液，目测法判定溶液的澄清度受颜色的影响较大，因此需开发仪器法测定溶液的澄清度作为补充方法。目前中国药典认为仪器法只可检测无色溶液，本文查询文献同时结合实际试验结果建立一种可用于检测有色溶液的澄清度的仪器方法，同时对该方法进行全面的方法学验证，结果证明，该方法可用于检测有色溶液的澄清度，可作为目测法的补充检测方法。