禁欲天数之差对连续两次精液常规检查精子质量的影响*

张国忠，胡艳梅，张 玲，张曦予

攀枝花市妇幼保健院生殖医学中心，四川攀枝花 617000

据统计，育龄夫妇的不孕不育发生率约为15%，其中高达50%的病例是由男性不育相关因素引起，精子参数异常是引起男性不育的一个重要因素[1]。调查研究结果显示在过去的40年中男性精子浓度逐渐下降[2-3]。因此，必须对不育男性患者的病史、生育史、体检、精液参数[世界卫生组织(WHO)参考值]和激素水平等予以重视。精液常规检查是评估男性精液质量的常用方法，其检查参数有十几种，而精子浓度、精子总数、精子前向运动百分率和精子总活力是诊断男性不育最重要的参考依据[4]。精液常规检查是不育男性的一项基础检查，与受孕机会密切相关；当精液常规检查参数异常时，应该考虑至少再进行一次精液常规检查[1]。正常情况下，只有大约12%不育男性和41%有生育能力男性的精液参数是正常的；在有生育能力男性中，有36.9%存在一个精液参数异常，22.3%存在两个及以上的精液参数异常[5]。

WHO认为男性不育需进行2～3次精液常规检查后才能进行诊断[6]，目前临床工作中对男性不育进行诊断时存在精液常规检查次数不确定和禁欲间隔时间比较随意的现象。张敏建等[7]认为男性不育患者的精子浓度和活力均存在逐渐递增、逐渐递减和交叉增减的波动现象。因此，当患者进行两次及以上精液常规分析时，连续两次检查时不同的禁欲天数是否会对检查结果产生影响，目前少见相关研究报道。本研究将探讨多次精液常规检查中连续两次精液常规检查禁欲天数之差(第2次精液常规检查禁欲天数减去第1次精液常规检查禁欲天数的绝对值)对男性不育患者精子参数的影响，以期为临床提供更加准确的诊断依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 回顾性选择2018年8月至2021年3月到攀枝花市妇幼保健院生殖医学中心就诊的男性不育患者为研究对象。纳入标准：患者至少连续两次行精液常规检查。排除标准：无精子症和精子浓度小于2×106/mL患者。按照纳入标准，最终纳入466例患者，年龄22～57岁，平均(31.9±6.3)岁，共获得连续两次进行精液常规检查的精液标本共932份。本研究经医院医学伦理委员会审核批准。

1.2方法

1.2.1精液标本采集、分析 患者于取精室内采用手淫法采集精液于洁净干燥容器内，置37 ℃孵育箱内，待精液液化后1 h内检测。采用电子天平(BS-210)称重获得精液量，使用pH试纸测定精液pH值。精液液化后，采用计算机辅助精子分析技术和北京穗加SSA-Ⅱ精子自动检测分析系统进行精液常规检查，检测的主要参数包括精液量、pH值、精子浓度、精子总数、精子前向运动百分率、精子总活力等。安排男科实验室固定人员按照WHO第5版精液分析要求进行精液常规检查。

1.2.2观察指标 记录患者两次精液常规检查前的禁欲天数及检查结果，计算禁欲天数之差，根据禁欲天数之差将患者分为6组：0 d组(138例)、1 d组(164例)、2 d组(84例)、3 d组(51例)、4 d组(18例)和≥5 d组(11例)。比较不同禁欲天数之差两次精液常规检查结果，分析不同禁欲天数之差及两次精液常规检查与精液参数的相关性。

2 结 果

2.1不同禁欲天数之差两次精液常规检查结果比较 6组间两次精液常规检查中精液量、pH值、精子浓度、精子总数差异均无统计学意义(P>0.05)，而6组间两次精液常规检查中精子前向运动百分率、精子总活力差异均有统计学意义(P<0.05)，其他5组与0 d组比较，两次精液常规检查中精子前向运动百分率、精子总活力差异均有统计学意义(P<0.05)。同组两次精液常规检查结果比较，精子前向运动百分率、精子总活力差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 不同禁欲天数之差两次精液常规检查结果比较[M(P25,P75)或

2.2精液常规检查的次数和禁欲天数之差与精液参数的相关性 精液常规检查次数与精子前向运动百分率、精子总活力均呈正相关(r=0.140、0.137，P<0.05)；禁欲天数之差与精子总数、精子前向运动百分率、精子总活力均呈正相关(r=0.092、0.158、0.157，P<0.05)。见表2。

表2 精液常规检查的次数、禁欲天数之差与精液参数的相关性

3 讨 论

精液常规检查是评估男性生育潜力的最重要和应用最广泛的检查方法，在男科学领域起至关重要的作用。尽管已经开发出基于精子获能、顶体反应和精子穿透等更多功能方面的替代检测方法，但精液常规分析仍是评估男性生育潜力的主要方法[8]。研究发现，精液常规分析时，若精子浓度、精子总数、精子前向运动百分率和精子总活力等4项参数均为正常，则发生男性不育的概率较低；若4项参数中有1项或多项异常时，则发生男性不育的概率较高[4]。目前我国男性精液质量正处于下降趋势，但引起男性精液质量下降的可能原因尚不清楚[9-10]。有学者认为，环境和生活方式是引起男性精液参数异常发生率增加的不利影响因素，如暴露于污染物和有毒药物环境、肥胖、不良饮食方式、吸烟、饮酒和压力增加等[10-12]。

有研究发现，随着禁欲天数增加精子前向运动百分率和精子总活力明显降低，禁欲天数在6～7 d时，前向运动的精子总数最多，继续增加禁欲天数并不能获得精子活力更高的精液标本[13-14]。本研究结果显示，6组间两次精液常规检查中精子前向运动百分率、精子总活力差异均有统计学意义(P<0.05)，且禁欲天数之差与精子总数、精子前向运动百分率和精子总活力均呈正相关(r=0.092、0.158、0.157，P<0.05)，说明禁欲天数之差对两次精液常规检查的精子前向运动百分率和精子总活力均具有明显影响。当按照WHO要求在禁欲2～7 d内进行精液常规检查时，随着禁欲天数的增加，可以获得质量较好的精液标本。

当发现男性不育患者精液常规分析精液参数存在异常变化时，男科临床应予以患者针对性的预防治疗，尤其是少精子症和弱精子症患者，至少应再做一次精液常规分析。既往研究认为，弱精子症患者取精前禁欲2～3 d，而少精子症患者取精前禁欲4～5 d，均可获得较好质量的精液标本[15-16]。本研究中，各组患者两次精液常规检查结果比较，精子前向运动百分率、精子总活力差异均有统计学意义(P<0.05)，且精液常规检查次数与精子前向运动精子百分率、精子总活力均呈正相关(r=0.140、0.137，P<0.05)，说明连续两次精液常规检查对精子前向运动百分率和精子总活力均有明显影响，第2次精液常规检查时，精液标本的参数较好。可能原因是第1次精液常规检查结果显示患者为少精子症或弱精子症后，男科医师会对患者使用药物进行治疗，使患者第2次检查时获得的精液标本质量得以改善。本课题组曾报道使用具有抗氧化特性的药物治疗不育男性3个月后，患者的精子浓度、精子总数、精子前向运动百分率、精子总活力和精子正常形态率均有明显改善[17]。另外，在SAID等[18]的研究中，体外受精助孕患者在取卵日前24 h内连续采集3次精液标本，发现前向运动精子总数明显增加，精液量逐渐减少，后两次获得精液标本的精子总数和精子总活力明显高于第1次采集的精液标本，说明第1次精液常规分析时精液参数为少精子症或弱精子症的患者，继续进行第2次精液常规检查时，一方面因临床使用药物干预，导致患者的精液参数得以改善；另一方面因禁欲天数的不同，尤其是随着禁欲天数之差的增加，患者的精液参数也会得以改善。因此，为保证患者两次精液常规检查结果的准确性，需尽量确保少精子症或弱精子症患者两次精液检查禁欲时间相同，便于临床医师对患者的精液情况做出准确诊断。

本研究也存在不足之处：首先，分组后4 d组和≥5 d组的样本量较少，未能将少精子症和弱精子症患者分组进行分析比较，尚需要收集更多的样本量和进一步的前瞻性分析；其次，男性不育患者的精液质量存在波动现象，可能与患者的代谢水平、激素水平和受部分附属性腺功能相关疾病的影响有关[7]。在后续的研究中，应尽可能地排除更多的干扰因素，将使用药物治疗后的和未使用药物治疗的进行分组研究。

综上所述，禁欲天数之差可能对连续两次精液常规检查的精子前向运动百分率和精子总活力产生影响，为减少精液常规检查结果的差异，建议多次精液常规检查前禁欲天数尽量相同，以便为临床诊断提供更加准确的精液常规检查结果。