茯苓砂仁保健食品对胃黏膜损伤保护功能作用的研究
2022-08-09◎徐君
◎ 徐 君
(山东中医药大学附属医院药学部,山东 济南 250014)
胃黏膜损伤是临床上常见的一种消化系统疾病,目前常用的保护胃黏膜方法,除了药物控制,保健食品防未病,寓医于食,药食兼用理念日渐深入人心[1]。我国传统中医药理论中,素有“药食同源,药食同功”的概念,药食两用的资源具有营养功能,同时兼有不同的保健作用。茯苓砂仁保健食品原料为茯苓、砂仁、丹参、白术、木香[2],是从防治胃黏膜损伤文献应用频率较高的50味药食同源中药材中选出,本研究主要探究其对胃黏膜的保护作用。
1 材料与方法
1.1 受试物预处理
茯苓砂仁保健食品是以茯苓、砂仁、丹参、白术和木香为主要原料,以糊精为辅料制成的保健食品,4 g/袋,每日1袋,其基本工艺为茯苓、砂仁、丹参、白术和木香经水煎煮后,浓缩,加入辅料制粒而成,每袋相当于原料8 g(茯苓∶白术∶丹参∶砂仁∶木香为3∶3∶2∶1∶1)。使用前将茯苓砂仁保健食品用蒸馏水配制成相应浓度,设置3个给药剂量组,即0.4 g·kg-1、0.6 g·kg-1、0.8 g·kg-1。
1.2 试验动物
健康成年SD大鼠60只,清洁级,雄性,体重在200 g左右,购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司。
1.3 试剂与仪器
生理盐水(实验室配制),无水乙醇(天津风船化学试剂科技有限公司);PGE2、表皮细胞生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)放免试剂盒(北京华英生物技术研究所);NO、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)试剂盒(南京建成生物工程研究所);RE3000B旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);FSH-2匀浆机(江苏省金坛市环宇科技仪器厂);KDC-2044低速冷冻离心机(武汉华科达实验设备有限公司);微型匀浆器(北京东方大林科技有限公司);722分光光度计(上海分析仪器总厂)。
1.4 试验方法
1.4.1 胃黏膜损伤模型大鼠造模试验及分组
60只SD大鼠适应性饲养5~7 d后,按体重随机分为5组,每组12只,即空白对照造组、模型对照组和茯苓砂仁保健食品低、中、高剂量组(0.4 g·kg-1、 0.6 g·kg-1、0.8 g·kg-1,以总生药量计)。茯苓砂仁保健食品给予不同剂量的受试药液,空白对照组和模型对照组分别给予等体积的蒸馏水,每日1次,连续30 d。末次给药后,所有实验大鼠禁食不禁水24 h后,模型对照组和茯苓砂仁保健食品3个剂量组的大鼠灌胃无水乙醇(1.0 mL/只),2 h后处死所有大鼠,腹主动脉取血,低温保存待测。
1.4.2 大鼠胃黏膜损伤指数和损伤抑制率的测定
结扎大鼠幽门和贲门,取出大鼠整胃,沿胃大弯处剪开,用冰生理盐水小心清洗干净,按Guth法[1]进行计分:损伤≤1 mm(包括糜烂点)记为1分; 1 mm<损伤≤2 mm记为2分;2 mm<损伤≤3 mm记为3分;3 mm<损伤≤4 mm记为4分;损伤>4 mm记为5分;损伤宽度>2 mm时分值翻倍,分数总和即为大鼠胃黏膜损伤指数,按公式(1)计算:
1.4.3 大鼠胃黏膜组织中PGE2和EGF含量的测定
取胃黏膜损伤附近的活组织,称取5 mg放于匀浆器中,加入0.4 mL无水乙醇,轻度研磨,加入1.6 mL生理盐水进行匀浆。匀浆液置于3 000 r·min-1离心机中离心10 min,取上清液放冰箱冷冻保存。PGE2和EGF含量测定按试剂盒说明书步骤进行,均采用放射免疫法。
1.4.4 大鼠血清中MDA和NO含量的测定
将低温保存的血液置于3 500 r·min-1离心机中离心10 min,取上层血清,按试剂盒操作步骤检测血清中MDA和NO含量。
1.5 统计学处理
试验数据均以均数±标准差(±s)表示,采用SPSS 20.0统计分析软件处理,组间数据采用方差分析,P<0.05即为差异具有统计学意义。
2 结果与分析
2.1 茯苓砂仁保健食品对大鼠胃黏膜损伤指数的影响
由表1可知,与空白对照组相比,模型对照组大鼠胃黏膜损伤指数明显增高(P<0.01),说明无水乙醇灌胃能致大鼠急性胃黏膜损伤且损伤严重。与模型对照组比,茯苓砂仁保健食品低、中、高剂量组损伤指数降低,损伤抑制率上升,与模型对照组比有明显差异(P<0.05或P<0.01),表明受试物能降低胃黏膜损伤程度,对胃黏膜有一定的保护作用。
2.2 茯苓砂仁保健食品对大鼠胃黏膜组织中PGE2和EGF含量的影响
由表2可知,与空白对照组比,模型对照组大鼠胃组织中PGE2和EGF含量均明显降低,具有极显著性差异(P<0.01),说明胃黏膜受损大鼠防御作用已被削弱。与模型对照组比,受试物低、中、高剂量组大鼠胃组织中PGE2和EGF含量上升且具有显著差异(P<0.05或P<0.01)。表明受试物能够促进胃组织中保护因子的分泌,强化胃黏膜防御机制。
表1 茯苓砂仁保健食品对大鼠胃黏膜损伤指数的影响表
表2 茯苓砂仁保健食品对大鼠胃黏膜组织中PGE2和EGF的影响表
2.3 茯苓砂仁保健食品对大鼠血清中MDA和NO含量的影响
由表3可知,与空白对照组相比,模型对照组大鼠血清中MDA含量增加,NO含量减少,具有显著性差异(P<0.05或P<0.01),说明胃黏膜损伤大鼠体内脂质过氧化严重,胃黏膜修复能力减弱。与模型对照组相比,受试物低、中、高剂量组MDA含量减少,NO含量上升,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。表明受试物能清除脂质过氧化产物,增加血氧含量供给,促进胃黏膜修复。
表3 茯苓砂仁保健食品对大鼠血清中MDA和NO含量的影响表
3 结论与讨论
茯苓、砂仁、丹参、白术和木香是我国传统中药材,按照《卫生部关于进一步规范保健食品原料管理的通知》(卫法监发〔2002〕51号),茯苓、砂仁为药食同源,丹参、白术、木香为可用于保健食品原料。茯苓在我国已有2 000多年的食用历史,载于《神农本草经》,列为上品[3]。《药品化义》称之“茯苓,主治脾胃不和,泄滞脾胀,胸胁逆气,膈间痰气”。砂仁从古至今,被视为“医林珍品”,具有化湿开胃、温脾止泻、理气安胎之效,主要用于脘痞不饥、脾胃虚寒、湿浊中阻及呕吐泄泻等症,能通过对抗胃黏膜上的攻击因子和增强胃黏膜的防御因子两方面对胃黏膜进行保护[4]。丹参具有活血通络、通经止痛、清心除烦、凉血消痈的功能,在心脑血管疾病及消炎止痛等方面应用广泛。现代研究表明,丹参有清除氧自由基,改善胃部微循环,增加胃黏膜血流量、加快胃黏膜快速愈合等作用[5]。白术具有益气健脾,燥湿利水等功效,主要用于脾虚食少、腹胀泄滞等症。《医学启源》记载“除湿益燥,和中益气,温中,去脾胃中湿,除胃热,强脾胃”;《长沙药解》曰“味甘、微苦,入足阳明胃、足太阴脾经。补中燥湿,止渴生津,最益脾精,大养胃气”[6]。由此看来,白术主要作用集中在胃肠道系统。木香具有行气止痛、健脾消食的功效,能减少胃液分泌量,从而降低胃液总酸度,并降低胃蛋白酶活性,提高NO和生长抑素含量[7]。我国传统医学将胃黏膜损伤归类于“胃脘痛”,最早见于《内经》,病因病机为食积、脾虚、瘀血及脾胃虫邪[8],上述5种原料正对病机。
本实验选择胃黏膜损伤指数,黏膜组织PGE2和EGF及血清MDA和NO作为观察指标,结果表明,茯苓砂仁保健食品的3个剂量组均能降低大鼠胃黏膜损伤指数,增加防御因子含量,及时清除体内自由基,增强胃黏膜修复能力,表明茯苓砂仁保健食品具有预防保护胃黏膜的作用,这为后续开发保护胃黏膜损伤功能食品提供了依据。