56 006例女性人乳头瘤病毒流行特征分析

赵 昕，龚致平，游海波，彭必江，聂 珂，陶 凤

1.重庆大学附属三峡医院检验科，重庆 404000;2.重庆市长寿区中医院院办公室，重庆 401220;3.重庆市长寿区人民医院检验科，重庆 401220;4.重庆市长寿区中医院检验科，重庆 401220

宫颈癌是女性中第四常见的癌症，是世界范围内的主要公共卫生问题之一[1]。据报道2018年全球约有570 000例新发宫颈癌患者，311 000例患者死于该疾病，其中中国有106 000例新发宫颈癌患者，死亡48 000例[2]，并且全球每年有100万例新的生殖器疣患者确诊[3]。目前，已鉴定出的人乳头瘤病毒(HPV)亚型超过200种，其中感染生殖道的HPV根据其与宫颈癌及其癌前病变发展的相关性进一步分为高危型和低危型。HPV不同型别与宫颈癌及癌前病变的相关程度有明显区别，且HPV型别众多，各地区各型别的流行率存在很大的差异。因此，本研究旨在分析万州地区女性中HPV流行特征及其变化趋势，为该地区HPV的预防策略制订及治疗提供理论依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2016年3 月至2020 年11 月在重庆大学附属三峡医院进行HPV检查的门诊就诊、体检、住院女性共56 006例为研究对象，年龄14～89岁，根据其年龄不同分为10组：<21、21～<26、26～<31、31～<36、36～<41、41～<46、46～<51、51～<56、56～<61、≥61岁组。所有研究对象或家属均签署知情同意书。本研究得到重庆大学附属三峡医院医学伦理委员会的批准。

1.2仪器与试剂 PCR扩增仪(型号：ETC811)购自北京东胜创新生物科技有限公司；全自动核酸分子杂交仪(型号：YN-H48)、HPV DNA 基因分型检测试剂盒均由深圳亚能生物技术有限公司提供。试剂盒可检测出23种主要HPV型别，17种高危型(HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、HPV73 和HPV82)和6种低危型(HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV81和HPV83)。

1.3方法 女性宫颈脱落细胞标本在阴道镜下进行采集，保存在细胞保存液中，于-20 ℃冰箱储存。采用PCR-反向点杂交法进行HPV检测。试剂准备、标本处理、DNA提取、PCR扩增、扩增产物的杂交及结果分析均严格按照试剂盒及仪器说明书进行。

1.4统计学处理 采用SPSS25.0统计软件进行数据处理及统计分析。计数资料以例数或百分率表示，组间比较采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1不同年龄组女性HPV感染情况 HPV检出率为27.80%(15 569/56 006)，各年龄组检出率和多重感染率比较，差异有统计学意义(χ2=345.10；P<0.001和χ2=231.55；P<0.001)。检出率和多重感染率较高的有<21岁组(分别为43.78%和22.49%)、≥61岁组(分别为39.33%和16.82%)及56～<61岁组(分别为38.71%和13.29%)。41～<46岁组 HPV阳性构成比最高，为22.48%。不同年龄组女性HPV感染情况见表1。

表1 不同年龄组女性HPV感染情况

2.2HPV感染种数及高低危型HPV感染构成情况 HPV单一感染的患者占72.28%(11 254/15 569)；HPV多重感染的患者占27.72%(4 315/15 569)，其中以两种HPV型感染为主，占19.87%(3 093/15 569)；高危型感染率为23.52%(13 171/56 006)，其中单纯高危型感染占72.55%(11 296/15 569)，高低危型混合感染占12.04%(1 875/15 569)；低危型感染率为4.28%(2 398/56 006)。单一感染以高危型为主(79.88%，8 990/11 254)，多重感染以单纯高危型感染和高低危型混合感染为主(96.89%，4 181/4 315)；HPV感染种数及高低危型感染构成情况见表2。

表2 HPV感染种数及高低危型HPV感染构成情况[n(%)]

续表2 HPV感染种数及高低危型HPV感染构成情况[n(%)]

2.3各型别HPV在不同年龄组女性中的检出情况 各型别HPV在各年龄组的分布，除了HPV83型在56～<61岁组未被检出外，其余22种HPV型别在所有年龄组中均有检出。检出率居前5位的高危型HPV依次为HPV52、HPV16、HPV58、HPV53、HPV51，分别为6.03%、4.78%、3.12%、3.01%、2.14%；检出率居前3位的低危型HPV依次为HPV81、HPV43、HPV6，分别为3.02%、1.61%、1.26%。检出率居前5位的HPV型别依次为HPV52、HPV16、HPV58、HPV81、HPV53，高低危型均有。各型别HPV在不同年龄组女性中的检出情况见表3。

表3 各型别HPV在不同年龄组女性中的检出情况(n)

3 讨 论

HPV是由7 320 bp组成的无包膜双链环状DNA病毒，其感染具有种属和组织特异性，是常见的性传播病毒，而高危型HPV持续感染是引发宫颈癌的主要原因[2]，低危型HPV感染与生殖器疣和低度宫颈上皮内瘤变发生有关，所以HPV分型检测是预防宫颈癌的关键手段之一。本研究首次对万州地区56 006例女性的HPV流行特征进行分析，对万州地区HPV检测、预防策略制订和进化特征的研究有促进作用。

HPV检出率在不同地域和不同人群中差异较大，而本研究显示万州地区门诊就诊、体检、住院的女性HPV检出率为27.80%，与常规筛查女性相比，其HPV检出率与刚果(28.2%)[4]接近，高于西班牙(8.3%)[5]，低于哈萨克斯坦(43.8%～55.8%)[6]；在中国，略高于四川(24.1%)[7]，明显高于河南郑州(12.09%)[8]、上海(18.98%)[9]、贵州遵义(16.95%)[3]等地区HPV检出率，但低于江苏泰州(34.58%)地区[10]；宫颈病变患者的HPV感染率明显高于普通人群，且存在明显的地区差异[11]。与有明显宫颈病变女性相比，本研究中HPV检出率低于河南省宫颈上皮内瘤变1级(CIN1)、CIN2/3、宫颈癌患者的HPV检出率(分别为62.64%、86.91%、89.21%)[12]。总体而言本研究HPV检出率介于国内外HPV检出率范围内，介于普通女性与宫颈有明显病变女性之间，属于正常范围。而本研究的检出率仍然提示了万州地区女性存在较高的HPV感染风险。

全球宫颈癌的平均诊断年龄为53岁，死于宫颈癌的女性平均年龄为59岁[13]，从HPV感染到发展为宫颈癌，需要10～15年时间，同时，HPV是一种性传播病毒，性活跃是HPV感染最重要的因素。国内外多项研究表明，HPV检出率按年龄呈“双峰”分布，且每个地区的双峰年龄有差异[4,14]。本研究HPV检出率显示出两个高峰，分别是<21岁(43.78%)和≥56岁(38.71%+39.33%)两个年龄段；并且多重感染率在<21岁(22.49)和≥56岁(13.29%+16.82%)两个年龄段也呈“双峰”分布。第一个高峰可能与年轻女性性生活相对频繁有关，第二个高峰可能与55岁以上女性绝经后，随着年龄的增长，靠自身清除病毒的能力逐渐减弱，继发HPV持续感染的机会越高有关。此外，本研究还发现HPV阳性构成比最高的年龄在41～<46岁(22.48%)，与中国最近的几项研究类似[15-16]，虽然年龄是HPV自然转归的影响因素，但>45岁女性HPV感染后自然清除率低，持续感染率高，进展率也较高。虽然本研究结果提示HPV的整体防控重点应该放在<21岁和≥56岁女性中，但在患有妇科疾病的女性中，41～<46岁年龄段女性更应加强HPV的检测。与单一感染的女性相比，涉及多种致癌类型HPV的多重感染女性发生CIN2、宫颈高级别鳞状上皮内病变及以上病变(HSIL+)的风险明显增加。虽然本研究中HPV感染以单一感染为主(72.28%)，但却以高危型为主(79.88%)；HPV多重感染患者占27.72%，以两种HPV型感染为主(19.87%)；在多重感染中，以单纯高危型感染和高低危型混合感染为主(96.89%)。该研究表明本地区感染HPV患者中高危型HPV感染的人数比例较大，从而患HSIL+和CIN2/3的风险较大，所以更应该加强本地区HPV的检测及预防工作。

研究显示中国女性约98%的宫颈癌由高危型 HPV导致，其中高危型HPV16、HPV18可以导致约69%的宫颈癌，高危型HPV31、HPV33、HPV45、HPV52、HPV58可以导致约23%的宫颈癌，其他高危型HPV感染则可以导致约6%的宫颈癌，不同HPV型别导致宫颈癌的概率不同；而低危型如HPV6、HPV11则可能造成约90%的生殖器疣[16-17]。本研究显示，除了HPV83型在56～<61岁组未被检出外，其余22种HPV型别在所有年龄组中均有检出，最常见的高危型是HPV52，其次是HPV16、HPV58、HPV53、HPV51，与国内相关研究基本一致[11,18]。 在本研究中HPV18检出率在高危型HPV中仅排名第七，而HPV52、HPV16、HPV58、HPV53、HPV51、HPV68却更常见，与其他地区不同[11]，提示HPV52、HPV16、HPV58、HPV53、HPV51、HPV68在本地区适应能力可能更强，在制订诊断和预防措施时应加以考虑。世界范围内HPV6和HPV11是最常见的低危型HPV，本研究发现最常见的低危型是HPV81，然后是HPV43、HPV6和HPV11。HPV81在HPV预防中并不是重要的型别，但是就本研究结果来看本地区对HPV81的重视程度需要提高。

本研究分析了万州地区门诊就诊、体检、住院女性中HPV的分布状况，总体而言万州地区HPV的分布特征大体上与国内外主流研究结果相似，但也存在一些差异，本地区HPV的检测、预防策略及宫颈癌的筛查策略可能需要根据本地区HPV的流行特征进行制订。