不同砧木对凤梨释迦嫁接愈合及幼苗生长特性的影响

方 仁，安振宇，尧金燕，龙 兴，周双云，张 继，唐文忠，黄伟雄

(广西农业科学院园艺研究所/农业部南宁南亚热带果树科学观测实验站，南宁，530007)

凤梨释迦又称蜜释迦，为番荔枝科(Annonaceae)番荔枝属(Annona)多年生半落叶乔木果树，适合在热带及亚热带地区推广种植[1-2]。因其早结丰产，栽培适应性广，果品优，营养成分丰富，具有较高的经济价值，近年来，我国华南地区的凤梨释迦种植面积得到迅速扩增，仅广西种植面积就已突破2 600 hm2，还有继续扩大的趋势。早在20多年前，种植者就看好凤梨释迦产业的发展前景，相继引入“吉夫纳”等品种种植推广。当时番荔枝良种良法欠缺，种苗砧木普遍以普通番荔枝为主，虽然普通番荔枝砧木与凤梨释迦接穗表现嫁接亲和性高、早花早结等特性，但嫁接种苗存在田间患病率高[3]、幼树冻害严重[4-5]、冬季果品质差等现象，严重限制产业进一步发展。由此可见，砧木对于凤梨释迦的生产显得尤为关键[6]。

全球番荔枝属种质资源较为丰富，研究团队通过多年的资源收集、保存与抗性鉴定，从中发掘出毛叶番荔枝、牛心番荔枝和山刺番荔枝等抗性优良品系，这些品系与普通番荔枝相比，在田间能够表现出生长势强、根系发达、抗寒性强、耐根腐病等优点。为合理利用现有优良砧木资源，探讨番荔枝嫁接砧穗间的愈合情况及作用机制，本试验以牛心番荔枝等3种砧木与凤梨释迦开展嫁接，比较嫁接口解剖结构特征、幼苗生长特性及其生理特性等，以期掌握供试砧穗的嫁接愈合能力与速率，为广西地区凤梨释迦优良砧木选育与丰产优质生产提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

牛心番荔枝AnnonareticulataL.、毛叶番荔枝A.cherimoliaM.和普通番荔枝A.squamosaL.，接穗为当前广西主推品种“吉夫纳”凤梨释迦A.atemoyaH.。

1.2 方法

1.2.1 嫁接成活率及新梢生长量测定 2019年3月，采用芽接法将“吉夫纳”芽体嫁接至生长发育基本一致的1年生供试番荔枝砧木上，嫁接高度距地面20 cm，每种砧木嫁接50株，重复3次；嫁接后150 d，统计各嫁接组合的成活率；从各组合中随机抽取嫁接成活的植株6株，分别测量与统计接穗新梢叶片数、生长长度和粗度(距嫁接口2 cm处)，采用单株区组。

1.2.2 可溶性蛋白及可溶性糖含量测定 嫁接后50、150和300 d，分别选取各砧木嫁接苗接穗上的成熟功能叶片测定可溶性蛋白和可溶性糖含量，每处理重复3次。可溶性蛋白含量采用考马斯亮蓝比色法，可溶性糖含量采用蒽酮比色法测定。

1.2.3 嫁接口解剖结构观察 嫁接后50、150和300 d，分别剪取不同嫁接组合接口，每个处理选取3个。新鲜组织固定于FAA液24 h以上，经软化脱水，浸蜡包埋，石蜡切片机上切片，片厚4～10 μm；依次将切片脱蜡至水，1%番红染液染色1～2 h，固绿染液染色2 min，脱水封片，镜检与拍照，观察嫁接口的愈合情况。

1.2.4 数据统计与分析 采用Microsoft Excel 2007和SPSS 20.0软件进行统计分析，不同处理显著性差异采用邓肯氏新复极差法进行比较(p<0.05)。

2 结果与分析

2.1 对嫁接成活率及接穗新梢生长的影响

由表1可知，“吉夫纳”凤梨释迦与供试砧木嫁接成活率差异不显著，嫁接成活率均达到80.00%以上，嫁接成活率从高到低依次为普通番荔枝砧木>牛心番荔枝砧木>毛叶番荔枝砧木。砧木对“吉夫纳”凤梨释迦的新梢生长有一定的影响，嫁接后150 d，不同砧木嫁接的枝梢叶片数差异不显著，毛叶番荔枝砧木的叶片数最多，普通番荔枝砧木的叶片数最少；不同砧木嫁接的接穗枝梢粗度与长度存在差异，其中牛心番荔枝和毛叶番荔枝砧木的接穗枝梢粗度和长度均显著高于普通番荔枝砧木，牛心番荔枝砧木嫁接的枝梢粗度与长度最高，分别为6.48 cm和88.52 cm。而引起“吉夫纳”凤梨释迦接穗枝梢生长差异的原因可能与供试砧木生长势有关。

2.2 对接穗叶片营养物质含量的影响

植株叶片中可溶性糖和可溶性蛋白等指标含量与嫁接亲和性有关，可作为植株砧穗嫁接亲和性早期鉴定的指标[7]。由表1可知，在嫁接愈合过程中，不同砧穗组合的叶片可溶性蛋白和可溶性糖含量变化趋势接近，总体呈现先升高后降低的趋势。嫁接后50 d，毛叶番荔枝砧木嫁接的叶片可溶性蛋白和可溶性糖含量均显著高于其他处理，分别为4.55%和4.76%，而牛心番荔枝与普通番荔枝砧木嫁接的叶片可溶性蛋白和可溶性糖含量均无显著性差异。嫁接后150 d，各处理的叶片可溶性蛋白和可溶性糖含量无显著性差异，这可能在一定程度上说明嫁接150 d后的砧穗愈合程度已开始趋于稳定。

表1 3种番荔枝砧木嫁接“吉夫纳”凤梨释迦的成活率、接穗生长、叶片可溶性蛋白与可溶性糖含量比较

2.3 砧木嫁接口解剖结构

植物嫁接口的解剖结构可以直观地看出砧穗间的嫁接愈合程度，进一步反映出接穗与不同砧木的嫁接亲和性。从图1可知，各砧木嫁接处理短时间内的愈合情况存在差异，随着嫁接时间延长，接口愈合程度逐渐趋于牢固。嫁接后50 d，3种砧木与“吉夫纳”凤梨释迦嫁接口处均已形成愈伤组织，其中与毛叶番荔枝的接口愈合程度相对较好，砧穗间韧皮部开始融合，且已有少量输导组织形成，砧穗结构的相似性较高；而与牛心番荔枝及普通番荔枝的接口处还存在明显的分离层，嫁接口尚未完全愈合，石蜡切片时砧穗容易裂开。嫁接后150 d，砧穗接口的韧皮部融合处逐渐变小，韧皮部输导组织已呈现连接，木质部与新生部位韧皮部紧密连接；其中与毛叶番荔枝嫁接的愈合情况要优于牛心番荔枝和普通番荔枝，其砧穗间木质部已完全融合，木质部已发现大量输导组织连接。嫁接后300 d，嫁接口完全愈合，砧穗间输导组织已连接通畅，虽然牛心番荔枝和普通番荔枝嫁接的砧穗连接部位尚存在少量染色较深的死细胞，但它们接口的愈合程度已很高。

注：毛叶、牛心、普通分别表示毛叶番荔枝、牛心番荔枝、普通番荔枝。

3 结论与讨论

木本果树砧穗间的亲和性是嫁接成活最基本的条件，可以从嫁接成活率、生长发育、嫁接口解剖结构及植株生理等指标来直接反映；如果能够综合各项指标，则可对砧穗嫁接亲和性给予更客观地评价[8]。本试验中，“吉夫纳”凤梨释迦与3种供试砧木在春季的嫁接成活率均能达到80.00%以上，说明这3种砧木与接穗均具备较好的嫁接亲和性；牛心番荔枝与毛叶番荔枝为砧木的接穗新梢生长粗度和长度均显著高于普通番荔枝处理；这与王晓玥等[9]对不同砧木的葡萄树体生长研究基本一致，嫁接体的发育与砧木生长势有很大关系。可溶性糖和可溶性蛋白含量变化则与嫁接愈合过程的组织细胞学特征密切相关[10-12]，也可作为嫁接砧穗间亲和性的评判标准。本试验中，各砧穗组合的可溶性蛋白和可溶性糖含量变化趋势总体一致，呈先升高后降低的变化趋势；这与冯金玲等[13]在油茶芽苗上的研究结果较为一致，嫁接组合间的差异可能与砧穗嫁接亲和性及其愈合能力不同相关。另外，嫁接解剖结构也可从一定角度反映嫁接砧穗间的亲和性，其嫁接愈合时间与植物种类及品种有较大关系[14-15]。本试验中，嫁接后50 d，嫁接口均初步形成愈伤组织，但接口尚未完全愈合，石蜡切片时砧穗容易裂开；嫁接后150 d，砧穗接口的韧皮部融合处逐渐变小，韧皮部输导组织呈现连接，木质部与新生部位韧皮部紧密连接；嫁接后300 d，嫁接口完全达到愈合，砧穗间输导组织连接通畅；从砧穗的解剖结构可以看出，毛叶番荔枝为砧木的嫁接愈合速度要快于牛心番荔枝和普通番荔枝处理。

凤梨释迦生产上，除了患病造成植株死亡，风害引起嫁接口松动而造成植株后续生长衰弱、死亡的现象也较为普遍。当前国内凤梨释迦生产一直存在大量补苗的情况，导致生产总成本提高，并且植株种植时间不一致会加大田间管理难度，这些问题在很大程度上制约了凤梨释迦产业的健康发展。因此，筛选适合凤梨释迦优良砧木的前提下，熟悉与掌握砧穗间的愈合程度即能避免植株移栽后的诸多不利因素。赵登超等[16]研究发现，不同砧穗嫁接口的愈合时间存在一定差异，嫁接组合体的类型决定了愈合的能力和速度。本试验发现，供试砧木与凤梨释迦均有较好的嫁接亲和性，但是它们愈合时间存在差异，毛叶番荔枝为砧木的愈合时间短于牛心番荔枝和普通番荔枝，嫁接150 d后完全愈合，而牛心番荔枝和普通番荔枝为砧木的完全愈合时间需要300 d；且牛心番荔枝和毛叶番荔枝为砧木的接穗新梢生长量最大。因此，凤梨释迦在苗期移栽时，需根据种苗砧木选用或嫁接时间等因素开展必要的田间防护工作，生产上一般建议种植嫁接后150 d或嫁接后300 d的嫁接苗，嫁接未满300 d的种苗在移栽时应加强防风措施处理。