日照市种猪场伪狂犬净化监测情况分析

文│韩永平（山东省日照市五莲县畜牧兽医管理服务中心于里畜牧兽医站）

韩勇*（山东省日照市动物疫病预防控制中心）

为了解山东省日照市猪伪狂犬病的流行状况，更好地开展猪伪狂犬病净化工作，在2017—2021年选择4个种猪场连续5年采集1000份血清进行猪伪狂犬病检测。结果显示，2017—2021年4个种猪场伪狂犬群体阳性率和个体阳性率总体呈下降趋势，但个别原种和父母代猪场阳性率依然较高，需进一步加大净化力度。

猪伪狂犬病毒可引起猪多种急性传染病，以发热和脑脊髓炎为主要特征，新生仔猪出现神经症状，妊娠母猪表现为流产、死胎、木乃伊胎等症状。可采用猪伪狂犬gE抗体ELISA试验检测猪伪狂犬感染情况。

目前猪伪狂犬病已成为危害全球养猪业最大的传染病之一，既可水平传播，也可垂直传播，给养猪业带来严重的危害和经济损失。自非洲猪瘟在我国发生以来，种猪已成为当前养猪业的稀缺资源，做好猪病防控，对主要猪病开展净化，提高猪群健康水平是种猪场亟需解决的问题。

日照市种猪品种较多，既有国外引进的大白、长白等瘦肉型品种，又有地方优良品种五莲黑猪。大白、长白等品种引入国内由于饲养环境、净化技术等原因，PRV感染不容乐观。五莲黑猪是日照市的优良地方猪种，因原产于日照市五莲县而得名，1975年命名为五莲黑猪，属肉脂兼用型。五莲黑猪具有耐粗饲、繁殖力高、抗病力强、肉质好、杂交优势明显等特点。五莲黑猪作为地方猪种先后被列入1999年10月出版的《山东省畜禽品种志》，2010年5月入选山东省畜牧兽医局公布的《山东省畜禽遗传资源保护名录》。二十世纪八、九十年代，由于外来品种的引进和杂交改良，五莲黑猪感染PRV的病例逐渐增多，净化工作刻不容缓。为了解日照市种猪场伪狂犬的流行状况，2017—2021年选择4个种猪场连续开展流行病学调查工作。

一、材料与方法

1.抽检方法。群内采用流行病学抽样方式，实验室检测考虑检测方法的敏感性，即检测到阳性动物，按照中国动物卫生与流行病学中心设计Epi Sampling Calculator软件，以估计流行率的抽样方法进行抽样监测，抽样样本量计算公式为：

其中n为抽样个数，CL为置信水平，D为群中的阳性动物数（等于群内个体数与预定流行率的乘积），N为群内个体数，Se为检测方法的敏感性。

原种场按照置信水平95%，预期流行率2%，每次采样不少于100份。父母代场按照置信水平95%，预期流行率5%，每次采样不少于50份。样品来源于每个种猪场不少于4栋猪舍的猪，种公猪、育成猪和后备猪要兼顾一定比例。其中大白、长白、五莲黑猪原种场各1个，大白、长白父母代场2个。每次采集血清200份，采集情况详见表1。

表1 日照市种猪场采样情况

2.样品采样和处理方法。用促凝血管采集全血2毫升，室温静置30分钟以上，待析出血清后，3000转/分，离心3～5分钟，将0.5毫升血清放置于1.5毫升离心管内，做好编号。

3.检测试剂与仪器。猪伪狂犬病毒gE抗体ELISA试剂盒购自武汉科前公司，生物安全柜购自新西兰公司，超纯水纯化系统（Cascada）购自美国PALL公司，移液器购自Eppendorf公司，酶标仪购自美国MD公司，离心机购自Sigma公司。

4.实验室检测方法。采集的血清进行猪伪狂犬抗体病毒ELISA试验，检测PRV-gE抗体阳性率，操作方法按照试剂盒说明书进行。

二、结果与分析

1.监测总体情况。2017—2021年，对4个种猪场开展连续监测，共检测血清样品1000份。结果显示，经过多年的监测净化，猪伪狂犬总体感染率呈明显下降趋势，但个别原种和父母代猪场阳性率仍较高，需继续净化。

2.不同年份猪伪狂犬检测情况。对2017—2021年监测数据进行分析，2017—2021年全市检测场点20个次，检测样品1000份次，猪伪狂犬个体阳性率和群体阳性率总体呈下降趋势（见表2，表3，图1）。

表2 2017—2021年猪伪狂犬群体阳性情况

表3 2017—2021年猪伪狂犬样品阳性情况

3.五莲黑猪和长白大白猪感染情况。对全市4个场多年连续检测显示，五莲黑猪伪狂犬的群体阳性率和个体样品率均较高，净化任务依然艰巨。

三、讨论

1.猪伪狂犬病呈现典型的潜伏感染。任何年龄段的猪感染PRV后均能形成潜伏感染，感染PRV的猪终身带毒。在一定条件下，PRV病毒可以被激活，引起隐性猪的复发性感染和散毒。袁淑萍等在2017—2019年对河南省1384个场次的41755份猪血清进行gE抗体检测，gE抗体平均个体阳性率和场群阳性率分别为26.99%和52.53%。其中，种猪场gE抗体平均个体阳性率和场群阳性率分别21.81%、0.92%。

猪伪狂犬病除可水平传播外还可垂直传播，其中垂直传播方式随着种群繁育会造成病原扩散、危害扩大的继代效应。因此，从种猪场开展净化显得尤为重要。2017—2021年44个种猪场检测显示，伪狂犬总体感染率呈明显下降趋势，但个别原种和父母代猪场阳性率仍较高，仍需继续坚持净化。

养猪场要从《种畜禽生产经营许可证》的种猪场引种，国外引进种猪应符合相关规定，优先从获得农业部净化评估认证的种猪场引种。对引进猪做好抽检，由具备资质的第三方实验室出具检测报告。

2.为了解猪场猪伪狂犬感染情况，科学抽样很关键。本研究采用流行病学方式进行群内抽样，采样科学，在一定程度上能反应支原体的感染状况。但由于时间物力等原因，仅选取4个种猪场进行监测，数量相对较少，因此，阳性感染率需扩大抽样群体。另外，由于原种场阳性率较低，仅采样100份，数量相对较少，不能最大限度的反映感染情况。

四、总结

从本次持续监测看,五莲黑猪这一优良地方品种在日照市虽然进行了很好地保种，但防控措施不到位，导致五莲黑猪伪狂犬的感染率仍较高。另外，检测结果显示，日照市大白、长白等引进种猪伪狂犬感染率也较高。因此，下一步要把猪伪狂犬病作为猪场净化的主要病种加以重视。

自2014年以来，日照市在全市大力开展种猪场主要垂直传播疫病净化工作，制定适合的净化方案，开展猪伪狂犬、猪瘟等垂直传播疫病净化关键技术研究。经过多年的监测净化，猪伪狂犬等疫病的群体阳性率和个体阳性率不断下降，净化成效明显。下一步要继续加大净化力度，推动猪伪狂犬病从源头上得到净化。