贵州某地绿茶理化品质分析

杨 丹，徐家法

（六盘水师范学院，贵州六盘水 553000）

茶叶是山茶科、山茶属灌木，嫩枝无毛。叶革质，椭圆形，茶叶指茶树的叶子或芽，能够用开水直接泡饮，茶叶饮品被誉为“世界三大饮料之一”。茶叶含儿茶素、咖啡碱、肌醇和叶酸等成分，有利于人体健康。贵州属于亚热带高原季风湿润气候，冬无严寒、四季分明、雨热同季，得天独厚的地理环境以及适宜的气候，使得贵州省成为国内绿茶主要产区。

茶叶中对人体有益的物质较多，其中茶多酚，氨基酸最为重要。茶多酚是茶叶中一类羟基酚类化合物的总称，茶多酚类化合物又称为类黄酮化合物，是茶叶中一类主要的化学成分[1]。茶多酚中又属儿茶素最重要，其具有多种生物作用。根据李宁[2]的研究，儿茶素对化学致癌物为诱因的各种器官肿瘤均有防治作用。根据吴琼洁[3]、刘波静等[4]的研究显示，茶多酚有调整血脂及抗脂质氧化作用；阎金海等[5]研究发现茶多酚有抗癌，抑癌作用。而茶氨酸具有加强脑波中α波强度，使人产生轻松感和提高记忆力等作用[6]；YOKOGOSHI等[7]研究显示，茶氨酸具有降血压的作用。故探索茶叶理化性质对研究茶叶的药用功效具有非常高的价值和实际意义。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

实验所用样品与试剂如表1和表2所示。

表1 实验样品

表2 实验试剂

1.2 仪器与设备

实验所用仪器设备如表3所示。

表3 实验主要仪器与设备

1.3 实验方法

1.3.1 样品处理、样液的制备

（1）样品处理。分别取某地明前茶、明后茶和水城春3种样品100 g，用磨碎机磨碎，并使用60目筛子筛选，收集筛选好的样品粉末，使用磨口锥形瓶加盖保存。

（2）样液制备。分别在电子分析天平上称取3种处理好的样品1.5 g（准确至0.001 g），放置于3个标号且干燥好的圆底烧瓶中，加入沸腾蒸馏水100 mL，立即移入沸水浴，浸提40 min（每10 min摇晃一次，使得茶叶充分浸提），再将浸提液及茶渣减压过滤（滤纸干燥并称取质量），用沸蒸馏水洗涤茶渣数次，滤液冷却后用蒸馏水定容于250 mL容量瓶，得到3瓶250 mL的样液备用。

1.3.2 氨基酸总量的测定

（1）测定方法。本文采用国标GB/T 8314—2013[8]方法，氨基酸在pH 8.0的环境下与茚三酮共热形成紫色络合物，在570 nm处有特定吸收峰。

（2）标准曲线制作。称取质量250 mg的谷氨酸，溶解，定容至25 mL容量瓶中，作为标准储备液，浓度为10 mg/mL，再从储备液中分别取0 mL、0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL和3.0 mL于50 mL容量瓶中并定容，配成浓度分别为0 mg/mL、0.1 mg/mL、0.2 mg/mL、0.3 mg/mL、0.4 mg/mL、0.5 mg/mL和0.6 mg/mL的标准工作液。吸取谷氨酸标准工作液各1 mL于一组7只25 mL的比色管中，加入0.5 mL pH为8.0的磷酸缓冲溶液和0.5 mL 2%的茚三酮溶液，沸水浴15 min，待冷却后定容至25 mL，放置10 min，在570 nm处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标制作标准曲线。

（3）样品测定。各取1.0 mL制备好的3种样液，加入0.5 mL pH为8.0的磷酸缓冲溶液和0.5 mL 2%的茚三酮溶液，沸水浴15 min，待冷却后定容至25 mL，放置10 min，在570 nm处测定吸光度，每组样品取3个平行样，取平均值。按照公式计算游离氨基酸总量：

游离氨基酸总量（以茶氨酸或谷氨酸计）=

式中：C为根据测定的吸光度从标准曲线上查到的茶氨酸或谷氨酸的毫克数，mg；V1为试液总量，mL；V2为测定用试液量，mL；m为试样用量，g；ω为试样干物质含量，%。

1.3.3 茶多酚的测定

（1）测定方法。本文采用GB/T 8313—2018中方法[9]，多酚物质溶于70%乙醇，福林酚试剂氧化茶多酚中的-OH，形成蓝色络合物，在675 nm处有独特吸收峰。

（2）标准曲线制作。称取0.110 g（准确至0.001 g）没食子酸，定容于100 mL容量瓶，再分别取0 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL和5.0 mL于100 mL容量瓶中，得到浓度为0 μg/mL、10.0 μg/mL、20.0 μg/mL、30.0 μg/mL、40.0 μg/mL 和 50.0 μg/mL 的标液，各取以上浓度标液1.0 mL于10 mL容量瓶中，加入5.0 mL 10%福林酚，4.0 mL 7.5% Na2CO3，定容至10 mL，室温放置60 min，675 nm处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标制作标准曲线。

（3）样液制作与测定。分别取磨碎试样0.2 g（准确到0.000 1 g）于圆底烧瓶中，加入70 ℃的70%甲醇，并且70 ℃水浴，回流提取4 h，过滤定容于10 mL容量瓶，取提取液1.0 mL于100 mL容量瓶中，定容。取此样液1.0 mL于10 mL容量瓶中，加入5.0 mL 10%福林酚，4.0 mL 7.5% Na2CO3，定容至10 mL，室温放置60 min，675 nm处测定吸光度。每个样液3组平行样，取平均值。按照公式计算茶多酚含量：

式中：C为根据试样测得吸光度，从标准曲线上查出茶多酚相应含量，μg/mL；K为没食子酸标准曲线的斜率；m为样品干物质含量，%；m1为样品质量，g。

2 结果与分析

2.1 氨基酸总量的测定

根据上述实验方法，以谷氨酸吸光度为纵坐标，浓度（mg/mL）为横坐标制作标准曲线，氨基酸标准曲线如图1所示。

图1 谷氨酸标准曲线

根据标准曲线得到线性回归方程y=0.014x+0.009 4，相关系数R2为0.999 2，以国标方法测定样品吸光度，代入方程计算含量，得到表1样品氨基酸含量。

由表4可知，清明前的样品氨基酸含量明显比清明后的高，说明季节不同明显影响茶叶的氨基酸含量，而与水城春比较可知，待测样品氨基酸含量明显低于水城春。

表4 3种样品氨基酸含量

2.2 茶多酚含量的测定

根据上述实验方法测得茶多酚含量相关数据，以没食子酸吸光度为纵坐标，浓度（μg/mL）为横坐标制作标准曲线，制作没食子酸标准曲线，如图2所示。

图2 没食子酸标准曲线

根据标准曲线得到线性回归方程y=85.047x+0.138 0，相关系数R2为0.999 2，以国标方法测定样品吸光度，代入方程计算含量，得到表2样品茶多酚含量。

根据表5可知，清明前的茶多酚含量高于清明后的，证明季节对样品茶多酚含量有影响，与水城春比，样品茶叶茶多酚含量明显低于水城春。

表5 茶多酚含量

3 结论

所测样品明前茶、明后茶和水城春氨基酸含量分别为65.89%、46.19%和82.85%；明前茶、明后茶和水城春样品茶多酚含量分别为13.83%、10.76%和26.02%。总体上，农户自制茶叶与市场售卖水城春相比，氨基酸和茶多酚含量均较少，但农户自制茶叶明前茶的氨基酸和茶多酚含量均高于明后茶。