血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平变化与胃癌临床病理特征及预后的相关性研究

余丽丽，王艳波，王 毅

海南省第二人民医院肿瘤内科，海南五指山 572299

胃癌是起源于胃黏膜上皮的恶性肿瘤，患者早期症状不明显，就诊时往往已处于肿瘤中晚期，治疗较为困难，术后复发风险较高，严重威胁着患者的生存预后。根治性切除术是目前胃癌的主要治疗方法之一，但部分患者手术疗效欠佳，患者术后复发率及转移率较高、5年生存率较低[1]。富含脯氨酸小蛋白2A(SPRR2A)可促进细胞迁移及组织修复，与多种恶性肿瘤(如胆管细胞癌[2]、舌鳞状细胞癌[3])的浸润转移密切相关。血小板内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)是血管内皮细胞标志物，其表达升高可促进癌细胞的黏附和浸润，导致癌细胞转移风险的上升，继而影响患者预后[4]。白细胞介素-35(IL-35)是固有免疫反应中的天然抑制因子，其可促进细胞增殖和肿瘤血管生成，并与肿瘤发生进展有关。陈飞儿等[5]报道，结直肠癌患者血清IL-35水平明显升高，其与结直肠癌的发生、发展和预后密切相关。本研究旨在分析血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平在胃癌患者中的变化，并分析其与患者临床病理特征及预后的关系，以期为患者临床治疗提供参考。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2015年6月至2018年1月在本院行胃癌根治术的胃癌患者130例作为胃癌组。纳入标准：(1)经病理学检测确诊为原发性胃癌；(2)为首次确诊和治疗；(3)术前未接受放疗、新辅助化疗等抗肿瘤治疗；(4)年龄>18岁；(5)签署知情同意书。排除标准：(1)合并其他脏器恶性肿瘤者；(2)有严重心、肝、肾、肺等功能不全；(3)有严重传染性疾病或感染性疾病；(4)有自身免疫性疾病及血液系统疾病；(5)临床随访资料不全；(6)妊娠及哺乳期女性；(7)无法配合本次研究。胃癌组男性80例，女性50例；年龄32～78岁，平均年龄(61.94±8.22)岁；体质量指数(BMI)为20～26 kg/m2，平均BMI(23.75±1.61)kg/m2。同期，另选取本院体检健康志愿者80例作为对照组：男性40例，女性40例；年龄35～75岁，平均年龄(60.28±7.16)岁；BMI为20～26 kg/m2，平均BMI(23.49±1.58)kg/m2。两组间性别、年龄、BMI比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究方案经本院医学伦理委员会审批通过。

1.2方法

1.2.1血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35检测 胃癌组和对照组分别于入院后12 h内及体检时空腹抽取静脉血5 mL，以4 ℃ 3 500 r/min离心10 min，离心半径15 cm，离心后留取上层血清，置于-80 ℃冰箱保存待检。采用酶联免疫吸附法检测血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平，SPRR2A检测试剂盒由上海科敏生物科技有限公司提供，PECAM-1检测试剂盒由上海酶研生物科技有限公司提供，IL-35检测试剂盒由杭州联科生物技术股份有限公司提供，均按照试剂盒的说明书进行操作。

1.2.2随访及分组比较 采用门诊复诊或电话等方式对胃癌术后患者进行随访。随访时间为3年，前2年每3个月随访1次，以后每6个月随访1次，随访截至2021年1月或患者死亡。根据患者随访期间的生存或死亡，将其分为预后良好组(n=101)及预后不良组(n=29)。对两组患者年龄、性别、BMI、肿瘤最大径、TNM分期、分化程度、淋巴结转移等情况进行比较。

2 结 果

2.1胃癌组与对照组血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平比较 胃癌组血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平高于对照组血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 胃癌组与对照组血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35比较

2.2胃癌患者血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平与临床病理特征的关系 胃癌患者的血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平与TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)；血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平与患者年龄、性别、肿瘤最大径无关(P>0.05)，见表2。

表2 胃癌患者血清中SPRR2A、PECAM-1、IL-35表达与临床病理特征的关系

2.3不同预后组血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35比较 胃癌患者预后不良组血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平与预后良好组血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 不同预后组血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35比较

2.4血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35对胃癌患者不良预后的预测价值 ROC曲线分析显示，血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35单独及3项联合检测用于预测胃癌患者不良预后的曲线下面积(AUC)分别为0.783、0.811、0.819和0.900，见表4、图1。

图1 血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35预测胃癌患者不良预后的ROC曲线

表4 血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35对胃癌患者不良预后的预测价值

2.5影响胃癌患者临床预后的多因素分析 以TNM分期、分化程度、淋巴结转移、血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35作为自变量进行胃癌预后影响因素的多因素Logistic回归分析，结果显示TNM分期Ⅲ+Ⅳ期、低分化、合并淋巴结转移及血清SPRR2A、PECAM-1、IL-3升高是胃癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)，见表5。

表5 影响胃癌患者临床预后的多因素分析

3 讨 论

胃癌是消化道常见的恶性肿瘤之一，其具有恶性程度高、易复发、病死率高及预后差等特点。随着人们饮食结构改变及人口老龄化，胃癌发病率逐渐升高，且呈现出年轻化趋势，若不能及时诊断与治疗，将严重影响患者的生命安全及生存质量。近年来，胃癌的治疗方法取得了很大进展，胃癌患者的总体生存率明显改善，但患者预后仍不佳，5年生存率仅为20%[6]。因此，寻找准确评估胃癌患者临床预后生物标志物，对改善患者预后尤为重要。

SPRR2A是SPRR基因家族中的成员之一，其可通过信号传导与转录激活因子3(STAT3)激活酪氨酸激酶受体家族成员-表皮生长因子受体(EGFR)和酪氨酸激酶受体2(ErbB2)以及上调糖蛋白130(gp130)，促进上皮间质转化(EMT)，从而促进肿瘤细胞迁移与侵袭，影响着患者生存预后[7]。周静等[8]报道，肺鳞癌组织中SPRR2A基因的表达水平明显上调，高表达SPRR2A与肺鳞癌患者的预后不良有关。研究发现，与对照组相比，胃癌患者血清SPRR2A水平明显升高，其水平升高与患者淋巴结转移和TNM分期Ⅲ+Ⅳ期有关[9]。PECAM-1又称CD31，属于免疫球蛋白超家族，其在免疫炎症反应、血管生成、细胞迁移和凋亡等过程中起重要作用。同时，PECAM-1还可调节与肿瘤生长和侵袭相关的肿瘤微环境，并通过ITGB1-FAK-Akt信号通路来诱导癌细胞EMT，并调节肿瘤细胞增殖和转移。研究表明，PECAM-1水平变化与肿瘤信号通路的激活有关，其能够交错式激活患者体内的癌细胞转录调控因子，提高癌细胞DNA的扩增速度[4]。有研究证实，结直肠癌患者血清PECAM-1水平明显升高，PECAM-1升高与结直肠癌的发病及病情进展密切相关[10]。CAO等[11]报道，PECAM-1在非小细胞肺癌的病情进展过程中发挥重要作用，PECAM-1是影响非小细胞肺癌患者生存预后的重要危险因素，也是非小细胞肺癌患者潜在的预后生物标志物。IL-35属于IL-12家族，是由Treg细胞分泌的细胞因子，可抑制T细胞增殖和分化。在肿瘤微环境中IL-35的存在可导致淋巴细胞浸润减少和免疫活性荷瘤宿主的存活率降低，并促进肿瘤生长和转移[12]。研究发现，高水平的IL-35可显著促进前列腺癌细胞的迁移、侵袭和增殖，其与前列腺癌小鼠的肿瘤生长、转移及不良预后密切相关[13-14]。ZHANG等[15]报道，IL-35表达与肿瘤分化、淋巴结转移及TNM分期有关，IL-35高表达与肺癌患者预后相关。

本研究显示，胃癌组血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，提示血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平升高与胃癌发生密切相关。有研究表明，与癌旁正常胃黏膜组织相比，SPRR2A在胃癌组织中的表达明显增加，SPRR2A表达上调可促进胃癌细胞的增殖和迁移[7]。LI等[16]报道，胃癌患者血清PECAM-1水平高于对照组，抑制PECAM-1表达可降低肿瘤的活性和侵袭性细胞分裂和生长，抑制肿瘤的发展。随着患者TNM分期进展、病理分化程度降低和淋巴结转移，血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平逐渐升高，提示血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平可能与胃癌患者病情进展有关，血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平越低可能预示肿瘤较高的TNM分期、组织低分化和有淋巴结转移。分析原因：SPRR2A过表达促进癌细胞的增殖及癌组织周围EMT形成，进而促进癌细胞的浸润与转移；PECAM-1的激活也可降解细胞外及血管基膜，产生大量生长因子及基质水介酶，促进肿瘤微血管形成，导致癌细胞增殖与转移的风险增加；IL-35高表达可进一步影响肿瘤免疫微环境免疫应答，抑制CD8+T细胞功能，导致癌细胞逃避免疫监视，促使肿瘤微血管形成及EMT[13]，从而加重患者病情。而肿瘤来源的IL-35可增加肿瘤微环境中CD11b+Gr1+在骨髓细胞的积累并促进肿瘤血管生成，参与肿瘤进展和转移，导致患者预后不良。研究表明，血清IL-35是胃癌患者预后的独立危险因素，高血清IL-35水平与胃癌患者的预后不良有关[17]。本研究还发现，胃癌患者预后不良组血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平明显高于预后良好组，差异有统计学意义(P<0.05)，提示血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平与胃癌患者预后状况有一定联系，与既往报道[16-17]相似。研究发现，淋巴结转移、较高的TNM分期是影响胃癌患者预后的危险因素[18]，与本文报道一致。多因素Logisitc回归分析显示，血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35升高是胃癌患者预后不良的独立危险因素，提示血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35高水平与胃癌患者的不良预后密切相关。ROC曲线分析显示，血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35单独及3项联合检测用于预测胃癌患者不良预后的AUC均大于0.7，其中3项联合检测的预测效能最好，说明联合检测血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35对胃癌患者的不良预后有较高的预测价值，进而有助于临床尽早采取有效干预措施，以提高患者生存率。

综上所述，胃癌患者血清SPRR2A、PECAM-1、IL-35水平明显升高，并与患者肿瘤的TNM分期、分化程度、淋巴结转移等病理特征及预后有关，3项联合检测对判断胃癌患者的预后情况有较高价值。