CYP3A5、CYP2C9、AGTR1基因多态性对单药治疗原发性高血压疗效的影响研究

易天骄，赵友云

1.湖北中医药大学，湖北武汉 430065；2.湖北中医药大学附属医院/湖北省中医院检验科，湖北武汉 430074

口服降压药物是原发性高血压患者稳定血压以及预防心脑血管疾病的重要治疗手段。降压药的选择与使用主要依靠诊疗指南和临床经验，但存在服用相同抗压药物而产生不同疗效的原发性高血压患者[1]。药物基因组学研究也发现，遗传多态性能够影响药物作用的程度，从而产生药物疗效的个体差异[2]。因此，确定个性化的降压治疗方法是改善血压管理的关键[3]。基于此，本研究旨在探讨CYP3A5、AGTR1和CYP2C9基因多态性是否与钙离子拮抗剂(CCB)类和血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)类药物的临床降压疗效有关。

1 资料与方法

1.1一般资料 将2020年9月至2021年6月在湖北省中医院门诊就诊的首发且未经治疗的原发性高血压患者共106例纳入研究。纳入标准：年龄18～65岁；原发性高血压1级或2级的新发患者；血常规、尿常规及肝肾功能指标均正常；每晚睡眠时间6～<9 h；从不吸烟者或已戒烟者；根据《中国高血压防治指南2018年修订版》[4]推荐的方法进行降压药物的选择，使用CCB或ARB类降压药单药治疗。排除标准：继发性高血压或高血压3级的患者；心力衰竭、冠状动脉粥样硬化性心脏病、心脏瓣膜病、肺源性心脏病、甲状腺功能亢进(甲亢)性心脏病、心肌疾病、先天性心脏病、严重肝肾功能不全、心包疾病、严重贫血、感染、发热性疾病患者；每晚睡眠时间<6或≥9 h；有抑郁症状、意识障碍、严重沟通障碍的患者；拒绝基因检测者；依从性欠佳者。纳入研究的患者中72例口服CCB类降压药，46例口服ARB类降压药治疗。所有研究参与者均已签署知情同意书，本研究经湖北省中医院伦理委员会批准。

1.2方法

1.2.1基本资料的获取 依病例报告表进行标准化流程访谈，获取患者性别、年龄、体重、身高、血压、心率、体质量指数(BMI)等基本资料。

1.2.2疗效观察 记录患者原始血压以及用药情况，然后每周随访，共随访4次，根据血压状况判定显效(收缩压下降≥20 mm Hg或舒张压下降≥10 mm Hg)、有效(收缩压下降<20 mm Hg或舒张压下降<10 mm Hg)和无效(收缩压、舒张压均无明显变化)。

1.2.3基因型检测 基因型检测采用PCR熔解曲线法。采集患者2 mL静脉血，EDTA抗凝。DNA提取和扩增试剂使用TIANLONG EX-DNA试剂盒(购自西安天隆生物技术公司)，严格按照试剂说明书操作。GeneRotex 96型全自动核酸提取仪和QuantStudio Dx型全自动荧光定量PCR仪分别为西安天隆生物技术公司和美国ABI公司产品。每次实验设置阴性和阳性对照，保证检测质量。

2 结 果

2.1CCB、ARB类药物的疗效与原发性高血压患者基本资料的关系 72例口服CCB类单药的原发性高血压患者中，显效34例、有效17例、无效21例。46例口服ARB类单药的原发性高血压患者中，显效22例、有效13例、无效11例。单用CCB或ARB类药物的疗效与患者性别、年龄、身高、体重、BMI等基本资料无关(P>0.05)，见表1。

表1 CCB、ARB单药治疗的原发性高血压患者基本资料比较

续表1 CCB、ARB类用药原发性高血压患者基本资料比较

2.2原发性高血压患者CYP3A5、CYP2C9和AGTR1基因多态性对疗效的影响 对于单用CCB或ARB类降压药的患者而言，CYP3A5的基因多态性为疗效的影响因素(P<0.05)，而CYP2C9和AGTR1的基因多态性不是疗效的影响因素(P>0.05)，见表2。

表2 原发性高血压患者CYP3A5、CYP2C9和AGTR1基因多态性对单用CCB或ARB疗效的影响

2.3原发性高血压患者CYP3A5基因型对单用CCB或ARB类药物疗效的影响 经有序多分类Logistic回归分析发现：对于单用CCB类药物的原发性高血压患者，CYP3A5 *3/*3基因型的临床疗效是*1/*1基因型的1.379倍，但差异无统计学意义(P>0.05)，*1/*3基因型比*1/*1基因型疗效提高8.973倍，差异有统计学意义(P<0.05)；对于单用ARB类药物的原发性高血压患者，CYP3A5 *3/*3基因型的临床疗效是*1/*1基因型的6.09倍，差异有统计学意义(P<0.05)，*1/*3基因型比*1/*1基因型提高疗效7.025倍，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 原发性高血压患者CYP3A5基因型对单用CCB或ARB类药物疗效的影响

3 讨 论

细胞色素酶(CYP450)负责大多数临床使用的药物的代谢。CYP活性的个体差异是导致药物治疗失败的一个重要因素。CYP3A5、CYP2C9基因与CYP450酶有关且具有和临床相关的遗传多态性。

CYP3A5基因多态性可能是高血压的遗传易感因素。CCB作为CYP3A5底物，CYP3A5基因多态性可能对CCB代谢产生影响。唐杨玲等[5]报道，原发性高血压患者CYP3A5的基因多态性对氨氯地平的药物代谢产生影响。KIM等[6]发现，CYP3A5*3/*3携带者CCB血药浓度低于*1/*1基因型，XIANG等[7]也证实了该结论。但有日本学者认为CYP3A5并非是影响CCB代谢的主要因素[8]，而且与LANGAEE等[9]的研究结论相同。我国的一项临床治疗研究报道，CYP3A5*3/*3基因型患者舒张压下降幅度显著高于*1/*3和*1/*1基因型的患者[10]，文娟等[11]的研究也得到了相似的结果。相反，周君等[12]认为，CYP3A5基因多态性与CCB降压药疗效之间的关联可能不大。

本研究中，CYP3A5*1/*3基因型患者的CCB疗效优于*1/*1基因型。分析原因：CYP3A5*1为野生型，而位于第三号内含子的6986密码子A>G(CYP3A5*3)是决定人群CYP3A5表达与活性的最主要因素，CYP3A5*3突变会引起mRNA剪接发生改变，终止密码子提前，蛋白质截短，不能表达正确表达CYP3A5蛋白，从而使CYP3A5酶活性消失。ARB类药物对CYP3A5*3/*3和*1/*3基因型的受试者疗效较好。ARB的代表性药物为厄贝沙坦，主要由肝酶代谢。CYP3A5多态性会影响药物的肝内代谢，CYP3A5*3的变异会导致代谢酶活性的改变，而影响了厄贝沙坦等ARB类药物的降压疗效。另外，有研究报道CYP3A5基因多态性对使用缬沙坦治疗患者的降压效果无影响，原因可能在于缬沙坦大约70%以原型经胆汁排泄，30%经肾脏排泄，不经肝脏进行生物转化[13]。

CYP2C9基因发生突变可能引起CYP2C9酶的空间结构与功能发生根本改变，最终会致使CYP2C9酶活性出现下降甚至丧失，所以就会造成对其底物的代谢清除能力发生根本变化，但CYP2C9基因多态性与CCB降压疗效相关的文章罕见。有研究报道，CYP2C9基因多态性与CCB类降压药物疗效无关，因为多数CCB类药物能显著抑制CYP2C9的活性[14]。对于ARB类药物，一些研究认为CYP2C9*3基因突变可能会影响ARB类药物的代谢，CHEN等[15]发现CYP2C9*1/*3型携带者的氯沙坦生物等效性要高于CYP2C9*1/*1型携带者。韩国一项研究发现CYP2C9*3携带者中厄贝沙坦代谢率下降[16]。疗效方面，陈露露等[17]及王鲁雁等[18]的研究显示CYP2C9基因型与ARB降压效果无关，相同的结论也在其他研究中被证明[19]。相反，HALLBERG等[20]发现CYP2C9*3基因变异与厄贝沙坦的疗效有关联。

作为细胞色素P450代谢酶系中的重要成员，CYP2C9是ARB类降压药物的重要肝脏代谢酶，CYP2C9在CYP450基因多样性和药物代谢中起着非常重要的作用。本次研究中，CYP2C9基因多态性与ARB疗效之间无关的主要原因可能在于选择的样本来源人群、地区及样本量的差异,因此尚需加大样本量进一步深入研究。

AGTR1为血管紧张素Ⅱ受体，是ARB类药物的作用靶点，而CCB的降压机制为阻断细胞膜上钙离子通道及扩张血管，与AGTR1相关性不大。因而本次只考虑了AGTR1 A1166C基因多态性与ARB类药物降压疗效的关系。人类AGTR1基因有5种多态性，其中与临床关系最密切的是1166A/C。有学者研究认为AGTR1基因A1166C多态性可能是我国原发性高血压的风险因子之一。由于地区、种族等差异，不同学者看法不一。左彦方等[21]认为AGTR1(1166A>C)是影响原发性高血压的一个重要因素，但董辉等[22]、张欣然等[23]看法相反。疗效方面，龚洪涛等[24]及王鲁雁等[18]研究显示AGTR1基因多态性与ARB类降压药物疗效无关。不同的是，董辉等[22]发现男性中具有AGTR1 1166C等位基因的个体敏感性较高，降压疗效更好，DE DENUS等[25]发现AGTR1 1166C携带者在坎地沙坦治疗后反应更佳。

本次研究中，AGTR1基因多态性对ARB类降压药物疗效亦无影响。分析原因：ARB类药物作用于AGTR1而发挥降压疗效，而AA和AC基因型的血清AGTR1表达一致导致降压疗效无明显差别。其次，1166A/C多态性与血管壁对AngⅡ反应之间不存在相关性。HILGERS等[26]予以不同浓度的外源Ang Ⅱ输注(0.5～3.0 ng/kg)，结果未发现不同基因型之间血压、醛固酮和肾血流动力学的差异。SPIERING等[27]研究证实此观点。

综上所述，本研究显示CYP3A5基因多态性可能是影响CCB、ARB类药物疗效的关键因素，但暂未发现CYP2C9、AGTR1的基因多态性与CCB、ARB类药物疗效相关。未来还需进行多中心、大样量的前瞻性研究，以进一步探讨CYP3A5、CYP2C9和AGTR1基因多态性对CCB、ARB类药物疗效的影响。