离子色谱-抑制电导检测法测定羧甲淀粉钠中氯化钠的含量
2022-07-12王雪云亓恒芹赵新静
王雪云 亓恒芹 薛 雯 韩 勇* 赵新静 王 冉
羧甲淀粉钠又名羧甲基淀粉和羧甲基淀粉醚，是淀粉羧甲基醚的钠盐，是一种重要的药用辅料。它是由玉米淀粉或马铃薯淀粉与氯乙酸在乙醇溶液中发生交联反应，再用氯乙酸钠对交联淀粉进行羧甲基化处理，最后用柠檬酸进行中和而制得[1]。
氯化钠是合成羧甲淀粉钠的主要副产物，《中华人民共和国药典》2020版（四部）[2]采用银量法测定氯化钠含量，由于容量法专属性不强，其他离子可能消耗Ag+，例如NO2-等离子。笔者利用离子色谱法分析羧甲淀粉钠中的氯化钠含量，消除其他阴离子的干扰，目前尚未见文献报道。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试药与试剂 氯化钠对照品（中国食品药品检定研究院，批号100376-202104，100.0%），18批羧甲淀粉钠药用辅料（分别产自安徽山河药用辅料股份有限公司、曲阜市药用辅料有限公司、山东六佳药用辅料股份有限公司、湖南尔康制药股份有限公司、湖州展望药业有限公司、湖南九典制药股份有限公司），氢氧化钾（国药集团化学试剂有限公司，色谱纯），蒸馏水（默克公司，质谱级）。
1.1.2 仪器 ICS-2100型离子色谱仪（赛默飞世尔科技有限公司），ICS-2100型电导检测器（赛默飞世尔科技有限公司），A120S型电子天平（德国沙多利斯有限公司）。
1.2 方法
1.2.1 色谱条件与系统适用性[3-10]Dionex IonPax AS19阴离子交换色谱柱（250 mm×4 mm）；以淋洗液发生器产生的20 mmol/L氢氧化钾溶液作为流动相；流速1.0 ml/min；进样体积25 μl；检测方式为抑制电导检测；Chromeleon色谱工作站；理论塔板数按氯离子计算大于4 000，与相邻色谱峰分离度大于2.0。
1.2.2 溶液的配制
1.2.2.1 对照品溶液 精密称定氯化钠对照品0.101 0 g，置100 ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备溶液。精密量取对照品贮备溶液1、2、3、5、10、15和20 ml，分别置100 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。
1.2.2.2 供试品溶液 精密称定羧甲淀粉钠辅料0.2 g，置100 ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。
1.2.3 专属性试验 分别取“1.2.2”项下对照品溶液、供试品溶液和溶剂，按照“1.2.1”项下色谱条件测定，记录色谱图。
1.2.4 检出限与定量限 用水逐级稀释“1.2.2.1”项下氯化钠对照品贮备溶液，按照“1.2.1”项下色谱条件测定，记录色谱图。当信噪比约为3∶1时的浓度即为检出限，当信噪比约为10∶1时的浓度即为定量限。
1.2.5 线性关系考察 分别取“1.2.2.1”项下对照品溶液，按照“1.2.1”项下色谱条件测定，记录色谱图。
1.2.6 精密度试验 取同一批号供试品溶液，按照“1.2.1”项下色谱条件连续进样6次，记录色谱图。
1.2.7 重复性试验 取羧甲淀粉钠辅料（批号210207）约0.2 g，共6份，分别置100 ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。按照“1.2.1”项下色谱条件连续进样6次，记录色谱图。
1.2.8 稳定性试验 取同一供试品溶液，按照“1.2.1”项下条件分别在0、2、4、6、8、20、24 h进样，记录色谱图。
1.2.9 回收率试验 取已知含量的样品（批号210207）约0.1 g，共9份，置100 ml量瓶中，分别精密加入对照品溶液（浓度为4.020 mg/ml）0.8、1.0、1.2 ml，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液，每个浓度配制3份，按照“1.2.1”项下条件分别进样，记录色谱图。
2 结果
2.1 专属性试验结果
结果表明：对照品溶液中氯离子峰的保留时间为6.6 min，供试品溶液中氯离子峰与相邻的杂质峰的分离度符合要求，溶剂无干扰。见图1。
图1 专属性试验离子色谱
2.2 检出限与定量限结果
试验表明：氯化钠检出限为0.014 μg/ml，信噪比约为3.8。氯化钠定量限为0.037 μg/ml，信噪比为10.9（相对标准偏差（RSD）=1.74%，n=6）。
2.3 线性关系考察结果
以浓度C（μg/ml）为横坐标，以峰面积A为纵坐标，得回归方程为：Y=5.177 0X+0.173 5，r=0.999 9（n=7），结果表明氯化钠在10.10～202.00 μg/ml浓度范围内，峰面积与浓度成良好线性关系。
2.4 精密度试验结果
主成分峰面积的RSD为0.3%（n=6），表明精密度良好。
2.5 稳定性试验结果
主成分峰面积的RSD为1.5%（n=7），表明供试品溶液室温放置24 h内稳定。
2.6 回收率试验结果
回收率在98.01%～100.25%，平均回收率为99.54%，RSD为0.73%（n=9）。见表1。
表1 回收率试验结果(n=9)
2.7 含量测定结果
按外标法计算氯化钠百分含量，离子色谱法检测结果比银量法的检测结果低2.4%～4.9%。见表2。
表2 羧甲淀粉钠中氯化钠含量结果(%,n=2)
3 讨论
采用银量法测定羧甲淀粉钠中氯化钠含量时，羧甲淀粉钠中的其他阴离子也会消耗Ag+，例如等离子，导致方法准确度低，测定结果偏高。而本文建立的离子色谱法测定羧甲淀粉钠中氯化钠含量，通过对18批不同厂家的羧甲淀粉钠进行测定表明该方法准确、灵敏、简便，专属性好，经过实验比对，离子色谱法检测结果比银量法的检测结果低2.4%～4.9%。该方法适用于精确控制药用辅料羧甲淀粉钠中氯化钠杂质，从而更好地监控羧甲淀粉钠合成中副反应比例。
