卵巢癌组织中CD44、Sirt6 的表达与其预后的相关性

覃彩凤 杨进琼 李媛媛

1 高州市人民医院妇科二区 广东高州 525200

2 南方医科大学第一临床医学院 广东广州 510080

卵巢癌是指生长在卵巢上的恶性肿瘤，是女性中常见的恶性肿瘤，近年来发病趋势逐渐年轻化，但随着医疗技术的进步，可通过细胞学检查的应用，尽早诊断并进行治疗。卵巢癌的发病原因被认为具有遗传因素、内分泌因素、外源性化学因素等，患病前期症状不明显，在确诊时大多患者已处于终末期，此病预后较差[1，2]。CD44 可在人体多个器官组织中表达，如肝脏、肺脏、中枢神经系统等，是一种在细胞膜上表达的跨膜蛋白，有文献指出，CD44 在上皮性卵巢癌中起到重要作用，参与肿瘤的转移过程，呈现高度表达状态，CD44 阳性表达率较高的恶性肿瘤中，可以看出其肿瘤的转移性明显强于其他恶性肿瘤[3，4]。CD44 还参与肿瘤的耐药过程，据报道，对药物耐药的患者经检测CD44 表达率较高，对药物较敏感的患者CD44 表达率较低，恶性肿瘤治疗过程中，患者对药物的敏感程度非常重要，可以直接决定患者治疗情况及预后水平，因此研究CD44 与肿瘤治疗的关系具有临床意义[5]。沉默信息调节因子6（Sirt6）是沉默信息调节因子中的一种，作用主要是抑制肿瘤生长，在人体内通过与透明质酸结合发挥作用，以往的研究中显示，Sirt1 同时为原癌基因与抑癌基因，Sirt6 作为其同源物，在癌细胞中也存在广泛表达[6]。本研究旨在探讨卵巢癌组织中CD44、Sirt6 的表达与其预后的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2018 年1 月～2021 年7 月于我院通过妇科手术切除的卵巢癌卵巢组织标本40 例为观察组。同时选取正常卵巢组织标本40 例为对照组。两组患者在年龄、体质量、初潮年龄在内的一般资料（P ＞0.05），具有可比性由于卵巢癌呈现出一定遗传倾向，两组组家族肿瘤史中的数据具有差异。详见表1。研究方案经医院伦理委员会批准执行。

表1 两组患者一般资料比较【（），n（%）】

表1 两组患者一般资料比较【（），n（%）】

1.2 纳入及排除标准

纳入标准：（1）观察组患者符合国际妇产科协会中对卵巢癌的诊断标准[7]。（2）研究对象在进行卵巢切除术前无合并其他重要脏器如肝、肾等功能衰竭或受损。（3）研究对象在进行卵巢切除术前无精神疾病史。

排除标准：（1）研究对象在院期间检查出存在免疫系统疾病、人类免疫缺陷病毒感染等。（2）临床资料不完整者。（3）此次手术前6 月内进行过外科手术者。（4）标本不完整，对研究结果造成影响者。

1.3 方法

应用免疫组织化学法检测CD44、Sirt6 阳性表达率：（1）制作石蜡切片：研究所有标本均经10%福尔马林固定，用温箱进行脱水处理，后用石蜡包埋，采用深圳市瑞沃德生命科技有限公司提供的病理切片机，连续切为4 μm 厚度切片，贴附在洁净载玻片上，后再经60°烤箱中放置至少8 h。（2）免疫组化：烘干后进行脱蜡处理，使用二甲苯进行两次，每次30 min；再将其水化，100%浓度乙醇进行两次，每次5 min，95%乙醇进行两次，每次5 min，80%乙醇进行一次，每次5 min，75%乙醇一次，每次5 min，最后用蒸馏水进行一次，每次5 min。灭活标本中的酶类物质，在室温下进行，3%H2O2孵育，共10～15 min。（3）再将组织标本染色，需配置好DAB显色剂，（准备1 mL 蒸馏水，先加入DAB 底物，后加入DAB缓冲液，和DAB显色剂各一滴，充分摇匀后，放置一旁备用，应注意需放在避光处，避免显色效果丧失，此显色剂在5 min 内有效）。后再利用苏木精复染色，需将组织切片浸泡于苏木精溶液当中，需浸泡3 min 左右，此步骤为碱性细胞核染色；拿出后需在清水中充分清洗，需洗2 min；再将切片浸泡于氨水当中，浸泡时间为2 min 左右，再将其放入清水中充分清洗，要将切片表面的氨水清洗干净，清洗时间大约持续2 min。后需进行脱水处理，75%乙醇溶液、80%乙醇溶液、95%乙醇溶液、100%乙醇溶液各一次，每次均为5 min。最后将标本进行透明封片，应用二甲苯进行3 此，每次需进行5 min，采用中性树胶封片。（4）高倍显微镜查看标本：在高倍显微镜下查看检测结果，每例标本至少需要观察10 个高倍视野1000个肿瘤细胞，当看到视野中出现特异性着色时，如浅黄色、棕褐色的颗粒状物时，则判断该标本出现阳性表达，阳性细胞数在10%以上则判定为阳性表达。

1.4 统计学分析

使用SPSS24.0软件分析处理数据，此试验规定[例（%）]的计数资料用检验表示，计量资料用（）表示，比较采用t 值。P ＜0.05，有统计学意义。

2 结果

2.1 两组CD44、Sirt6 的阳性表达率见表2

表2 两组CD44、Sirt6 的阳性表达率【n（%）】

2.2 两组预后情况比较见表3

表3 两组预后情况比较【n（%）】

3 讨论

卵巢癌在女性生殖道恶性肿瘤中，常见程度排在第三位，仅次于宫颈癌和在宫内膜癌，死亡率排在第一位[8]。多个文献中有报道，机体感染高危HPV 病毒是引起卵巢癌的原因之一，卵巢癌在前期特异性症状不明显，导致患者在就诊时大多数已处于肿瘤中晚期，且经过治疗后，70%左右的患者会发生复发，因此此病预后情况较差[9]。现代医学常用手术和化疗的方式来治疗卵巢癌，但由于卵巢组织本身成分复杂，解剖位置较隐蔽，治疗后5 年生存率仍较低，严重影响患者生存质量。

卵巢癌组织中CD44、Sirt6 的表达情况对于临床判定卵巢癌有重要意义。CD44 阳性表达率较高的卵巢癌中可显示出极强的转移和侵袭能力，且耐药性较强，此类患者在用药后效果相比其他患者，药效明显降低，因此研究CD44 在卵巢癌组织中的作用机制或得出其对卵巢癌的影响及作用在临床有较强的意义。CD44 位于人类第11 号染色体上，在机体内分布十分广泛，是细胞表面的跨膜糖蛋白，发生恶性肿瘤的患者体内CD44 普遍存在，如胃癌、宫颈癌、肺癌等，但在不同肿瘤患者体内阳性表达率不同，但阳性表达的患者肿瘤易转移。造成此结果的原理是CD44 可与细胞外基质的胶原蛋白等物质结合，作用于异质性黏附，使肿瘤细胞黏附于机体细胞，CD44 还可与细胞骨架蛋白结合，参与细胞的迁移运动[10]。Sirt6 是一种依赖于烟酰胺腺苷二核苷酸（NAD+）的去乙酰化酶，属于酵母沉默信息调节因子中的一种，不论是细菌还是哺乳动物内都含有此因子，与酵母细胞中与物质代谢和长寿相关的SIR2 同源，Sirt6 可以通过自身功能，起到调控DNA 功能，维护端粒基本功能，参与葡萄糖和脂肪代谢，控制机体内炎性反应和癌症发生等作用，CD44、Sirt6 在机体中都有重要作用，因此研究CD44、Sirt6 的表达对卵巢癌的控制有积极意义。卵巢癌若在早期被发现并采取措施治疗，预后情况将明显好转，而中、晚期患者在治疗后1～2 年之内，就会再次复发[12]。在术后对患者进行随访，查看患者预后情况，有助于帮助患者尽早恢复。本研究结果显示，观察组CD44 的阳性表达率高于对照组，Sirt6 的阳性表达率低于对照组；观察组的恢复率显著低于对照组；转移和死亡率高于对照组。可得知CD44 在癌症卵巢组织中表达率高于健康卵巢组织，Sirt6 则为阳性表达率低于健康卵巢组织，可以得出CD44、Sirt6 的表达与卵巢癌组织发展和预后情况有明显相关性，值得在临床推广检测。

综上所述，卵巢癌组织中CD44、Sirt6 的表达可显著反应卵巢癌情况，CD44 及Sirt6 的阳性表达率与卵巢癌预后情况显著相关，可为卵巢癌患者的预后情况提供判断依据。