三峡大老岭地区几种野生重楼属植物驯化栽培研究
2022-07-02田风雷李道新谭家林杜宵余长蓉彭洪林曾百林王功芳张永翠
田风雷，李道新，谭家林，杜宵，余长蓉，彭洪林，曾百林，王功芳，张永翠
(宜昌三峡大老岭自然保护区管理局，湖北 宜昌 443000)
0 引言
重楼属Paris植物,是百合科重楼属植物的统称.根状茎可入药，为我国珍贵中药材植物，其药用功效早在《神农本草经》与《本草纲目》上就有记载,具有悠久的历史[1].近年来，随着中药市场对重楼资源需求量的增加，药材价格大幅攀升，乱采滥挖现象严重，而野生七叶一枝花生长周期长，更新慢，且人工种植七叶一枝花起步晚，规模小，导致野生资源采挖量超过了生长量，野生资源几近枯竭[2].据报道，现在七叶一枝花国内市场需求量达到3 000 t左右，市场价格已达800元/kg以上，而现有供应量仅为1 500多吨，供需矛盾突出[3].
宜昌地处湖北西南部，中高山区为以七叶一枝花为代表的重楼属植物的集中分布区域，据不完全统计，大老岭野生重楼及其变种资源共7种[4].由于重楼属药用需求量较大, 且野生资源占绝大多数, 受利益驱动,药农灭绝性乱采滥挖导致野生资源破坏严重，几近枯竭,急需开展资源保护和人工驯化种植工作. 在前期资源调查的基础上,本研究通过对本地野生重楼进行选优和驯化研究，以期解决宜昌野生重楼引种和驯化栽培技术难点，为更好地保护和利用宜昌野生珍贵中药材资源服务，推进宜昌林下中药材种植产业发展.
1 研究方法与材料
1.1 试验材料来源结合前期调查[4]，我们选择七叶一枝花、华重楼、球药隔重楼3种重楼开展驯化栽培试验.参试种蔸来源于野生种源,苗龄3年以上.栽植前，分种类、地点、重复调查测量地下茎长、粗、称重，用电子天平分别称量各小区每个种蔸重量，单位为g，保留2位小数.地下茎长、粗采取游标卡尺量取，单位为cm，保留2位小数.
1.2 试验设计试验设两个影响因素，分别是种类和地点；其中种类分别是七叶一枝花、华重楼、球药隔重楼,地点为千斤园(海拔1 000 m)、鸡公垭(海拔1 350 m)、新宫(海拔1 200 m),每个条件下分别设置3次重复[5].定植时间2016年1月.
1.2.1 选择试验基地 试验基地要求地势平坦或沟谷，灌溉方便同时排水良好；土壤要求土层深厚、肥沃疏松、腐殖质或有机质含量丰富，保水保肥良好，具偏酸性的砂质壤土或壤土.利用人工荫棚或常绿阔叶林、针阔混交林自然遮阴，遮阴程度达到70%～80%.
1.2.2 整地 栽植地提前一个月左右将土壤深翻30 cm以上，并暴晒以利消灭虫卵、病菌，结合整地每1 m2施入3～4.5 kg农家肥作为基肥.在块茎移栽之前，认真清除基地里的杂灌、杂草、杂质和残渣.
1.2.3 作畦 将栽植地的土壤反复耙碎、整平，根据地块的坡向进行作畦，达到畦面不能积水的标准即可.畦面要求宽100 cm，高25～30 cm，畦沟和围沟宽30 cm，四周排水沟相通并有出水口.
1.2.4 移栽 将收集到的野生重楼种质资源事先进行分类，每一品种分别按株行距20 cm × 20 cm分块栽植，并对每一个块状种植区域做好相应标签以及数据记录.在畦面上纵向开沟，沟深4～6 cm，将块茎的长边顺着开沟的方向放置，使得根系在沟内舒展开，用开第二沟的土覆盖在前一沟，栽植完成后可在畦面上覆盖松针或腐殖土，厚度以不露土为宜.最后浇透定根水，以后随时保持土壤湿润.另外，移栽应尽量选择在阴天或午后阳光弱时进行.
1.2.5 后期管理 移栽完成后，首先要注意植株病虫害的防治，尤其是地老鼠的防治；其次是要依据基地的植株生长情况，定期做好除草与培土、灌溉与排水、追肥等措施，必要时对生长明显瘦弱、病虫害严重以及死亡的植株进行更换，同时更换相关数据[6].
1.3 数据调查与观测
1.3.1 形态学特征观测 形态学特征观察指标：根状茎粗、株高、茎粗、叶片数量、叶长、叶宽、叶型、叶着生方式、花序类型、花梗长、萼片数、花药长、花药数及种子颜色等[7].生物学特征观察方法：于七叶一枝花的根、茎、叶、花、果等器官基本稳定时进行.每一品种随机抽取5个样点，每样点抽取20株，编号后固定连续观测各性状特征并记录试验数据.根据相关经验及查阅资料，地上茎、叶、花的观测于4月底左右进行，果实观测于10月左右进行，根状茎观测于12月底左右进行.
1.3.2 物候期观察 物候期观察指标：按照时间先后顺序，从植株出苗后开始到下一季植株出苗为止，主要观测植株发芽出苗期(出苗期)、茎杆快速伸长期(伸长期)、展叶期、开花期、结果期、茎杆倒伏枯死期(枯死期)、地上茎叶枯死同时地下块茎长出新芽期(萌芽期)、越冬期等[8].观测频率出苗期-茎杆倒伏枯死期7天一次，枯死期-越冬期15天一次，持续观测一个生长周期.
1.3.3 生长数据调查 2017年3月20日，分种类、地点、重复调查测量地下茎长、粗、称重，用电子天平分别称量各小区每个种蔸重量，单位为g，保留2位小数.地下茎长、粗采取游标卡尺量取单位为 cm，保留2位小数.
1.3.4 数据整理 分种类、地点、重复测量计算得到的地下茎长、粗、称重等净生长量，运用Spss 22.0软件统计分析[9-10].
2 结果与分析
2.1 生长节律对比分析观测表明，3种重楼生长期(出苗期-枯死期)长短排序为华重楼>球药隔重楼>七叶一枝花.
表1 大老岭地区不同海拔重楼属植物生长节律比较
根据上述数据，绘制不同地点不同种类的物候期条形图(图1).尽管从整个生长周期来看华重楼生长期最长，但是从开花-结实期来看,七叶一枝花开花结实期最长，球药隔重楼次之，华重楼最短.
图1 不同海拔重楼属植物生长节律条形图
2.2 主要形态学特性经观察对比统计，3种重楼植物主要形态学特性如下(表2).
表2 不同种类重楼主要生物学特性
2.3 主要生长指标对比分析根据小区面积,对比各小区地下茎,长、粗原始量,分别计算单位面积种蔸茎,长、粗净生长量.开展3种重楼多变量统计分析,如表3.
表3 不同种类重楼驯化栽培试验多元方差检验表a
表3显示了分别用Pillai、Wilks’ Lambda、Hotelling的轨迹和、Roy’s 最大根4种方法进行检验，且这4种检验方法的结果其截距项的检验统计量的显著性均为0.000，即P<0.01，表示各组变量间的数据存在显著性差异，需进一步检验由哪一个因素造成的影响(表4).
表4 不同种类重楼驯化栽培试验主体间效应的方差分析表
表4显示了方差分析中各要素样本的差异程度及显著性.由表可知，不同种类重楼根茎增长数的统计量F为2 433.568，显著性为0.000，即P<0.01，差异极显著；根茎增粗数的统计量F为808.763，显著性为0.000，即P<0.01，差异极显著；根茎增粗数的统计量F为446.581，显著性为0.000，即P<0.01，差异极显著.不同地点重楼根茎增长数的统计量F为1 080.386，显著性为0.000，即P<0.01，差异极显著；根茎增粗数的统计量F为2 566.132，显著性为0.000，即P<0.01，差异极显著；根茎增粗数的统计量F为132.935，显著性为0.001，即P<0.01，差异极显著.在种类和地点交互作用下,重楼根茎增长数的统计量F为131.648，显著性为0.114，即P>0.01，差异不显著；根茎增粗数的统计量F为100.724，显著性为0.126，即P>0.01，差异不显著；根茎增粗数的统计量F为63.909，显著性为0.174，即P>0.01，差异不显著.
采用LDS多重比較法对不同种类、不同地点各变量样本均数间的多重比较结果表明，不同种类影响因子条件下，地下茎增长在各种类中的显著性P均小于0.05，差异显著；地下茎增粗在华重楼与七叶一枝花中显著性0.028，即0.01
表5 不同种类重楼驯化栽培试验不同影响因子各变量的多重比较
从种类上看，七叶一枝花地下茎年增长均值、年增重均值最大，分别达到4.584 cm、9.271 g，球药隔重楼花地下茎年增粗均值最大，达到0.518 cm.说明，七叶一枝花栽培表现型最优，球药隔重楼次之，可作为重点栽培繁殖品种.从地点上看，千斤园(海拔1 000 m)地下茎年增长均值、年增重均、增粗均值均优于其他两个地点，可作为重点推广区域(表6).
表6 不同种类重楼驯化栽培试验不同种类各变量的均值
3 讨论
本试验基于大老岭区域收集的野生华重楼、七叶一枝花、球药隔重楼种源，苗龄3年以上，对以种子为来源的实生苗表现还需要进一步研究.同时,在生长节律观测方面,还需要对比观测从种子到发育成心形单叶幼苗的数据,为今后本区域有针对性开展丰产栽培技术研究打好基础.
4 结语
重楼的主要药用成分为多种甾体皂苷，已成为多种中成药和新药的主要原料药[11]，巨大的需求缺口和经济利益刺激驱动，导致野生重楼资源严重枯竭，发展人工种植产业依靠野生种源杯水车薪.大老岭野生重楼资源丰富，应该加强资源保护措施和宣传工作,增强人们对重楼保护重要性的认识.同时,开展重楼的科学规范的人工繁育试验，针对种子繁育、田间管理、病虫害防治等进行研究，借鉴已有研究基础，争取早日总结出一套完整的重楼高效丰产栽培技术规程，为促进宜昌市重楼的产业化栽培创造条件.
