ELISA法在诊断梅毒螺旋体感染中的临床检验价值

孙 枫

(山东省莱州市慢性病防治院 山东 烟台 261400)

梅毒主要由苍白(梅毒)螺旋体感染引起，是一种系统性的慢性的性传播疾病，具有较高的传染性，主要通过性行为、母婴传播和血液传播[1]。该病具有全身蔓延的发展趋势，会在病情发展的时候侵犯患者的皮肤、黏膜和许多组织器官。有相关的研究报道结果显示，梅毒能够对患者的中枢神经系统造成侵犯，危害到患者的心脑血管系统功能、骨骼功能等，最终患者会因为全身多个器官出现衰竭而死亡。WHO的报告结果也显示[2]，全世界范围内每年均会新增加超过1060万例感染梅毒的患者，其中有超过200万感染梅毒的孕产妇，且有超过120万的孕产妇会将梅毒传染给下一代，且随着社会的发展，梅毒的传播率呈现出逐年上升的趋势。当梅毒螺旋体侵袭患者机体之后，会进一步生成一种具有非特异性的抗体，但是该抗体因为具有非特异性，大大增加了检测的困难程度，不利于早期检验，而且晚期梅毒的病毒量会逐渐减少，仍然无法进行有效的检验，因此，临床应寻找有效的方法提高诊断的准确率。为了分析不同检验方式对于梅毒螺旋体感染的检出准确率，本文对此进行分析，如下：

1 资料与方法

1.1 一般性资料

选择2019年1月到2021年1月期间到本院间到本院就诊的疑似梅毒螺旋体感染患者共计50例纳入研究对象，男26例，女24例；年龄20～58岁，平均年龄(29.17±3.46)岁；体质量51～76kg，平均体重量(60.24±11.78)kg。所有患者均知晓研究内容并自愿参与两种检验方式；本次研究经过了院内领导的批准和院委会的审核。排除标准：合并恶性肿瘤患者；合并严重HPV感染的患者；合并内分泌疾病患者；肝肾功能障碍患者。

1.2 检测方法

所有梅毒螺旋体感染患者均在采血前三天保持良好的作息和饮食，保证血液情况的稳定，采血前常规禁食禁水，清晨采血2-5ml静脉血液，震荡后静置送入检验科，以3000r/min的速率离心5min，并分离出上层血清分别利用ELISA法和TRUST法进行检验。TRUST法使用上海荣盛生物技术有限公司生产的试剂盒检验，ELISA法利用珠海丽珠生物公司生产的ELISA试剂盒进行检验，为了消除误差，所有患者均测量三次，采取平均检测结果，且试剂盒、试纸等器械均使用同一批次，保障数据的客观性。

1.3 观察指标

以TPPA结果作为金标准，对ELISA法、TRUST法检验梅毒螺旋体感染的诊断准确率、特异度、敏感度进行对比、分析，其中诊断准确率=(真阴+真阳)÷总数×100%、特异度=真阴÷(真阴+假阳)×100%、敏感度=真阳÷(真阳+假阴)×100%。真阳性：所有结果阳性；假阳性：ELISA法、TRUST法检验结果阳性，金标准结果阴性；假阴性：ELISA法、TRUST法检验结果阴性，金标准结果阳性；真阴性：所有结果阴性。阳性为梅毒螺旋体感染，阴性为正常。

以TPPA结果作为金标准，对比ELISA法、TRUST法对不同时期梅毒螺旋体感染的检出情况。

1.4 统计学方法

本研究所有统计学数据均录入SPSS21.00进行数据处理、计算和分析，计量资料若服从正态分布则采用均数±标准差描述，组间比较采用独立样本t检验；计数资料用频数或者百分比表示，组间比较采用χ2检验，所有检验均采用双侧检验，以P<0.05则表示差异存在统计学意义。

2 结果

2.1 ELISA法、TRUST法对梅毒螺旋体感染的诊断准确率、特异度、敏感度

ELISA法对梅毒螺旋体感染的诊断准确率、敏感度高于TRUST法，差异有统计学意义(P<0.05)；ELISA法对梅毒螺旋体感染的特异度稍高于TRUST法，差异无统计学意义(P>0.05)。如表1-2：

表1 ELISA法、TRUST法对梅毒螺旋体感染的诊断准确率、特异度、敏感度[n]

表2 对比ELISA法、TRUST法对梅毒螺旋体感染的诊断准确率、特异度、敏感度[%]

2.2 两种检验方法对不同时期的梅毒螺旋体感染的检出情况的比较

ELISA法对Ⅰ期、Ⅱ期梅毒螺旋体感染检出率高于TRUST法，差异有统计学意义(P<0.05)；两种检验方法对Ⅲ期梅毒螺旋体感染检出率差异无统计学意义(P>0.05)。如表3：

表3 对比两种检验方法对不同时期的梅毒螺旋体感染的检出情况[n(%)]

3 讨论

梅毒是临床十分多见的性传播疾病，主要由苍白密螺旋体感染而全身发病，Ⅰ期、Ⅱ期的传染性比较强，容易传染给他人，Ⅲ期的破坏性比较大，如果损伤到中枢神经系统、心血管，还可能危及患者的生命，危害性极大，仅仅次于艾滋病[3]。梅毒已经成为了全球关注的重点、难点公共卫生安全问题。妊娠期女性合并梅毒更是威胁到孕妇、胎儿的严重传染性疾病，可以通过性接触的方式进行水平传播[4]，该传播方式被称为隐性梅毒，也可以通过胎盘的血液循环进行垂直传播，该传播方式被称为胎传梅毒。近年来，随着世界范围内的流行传染病的发生率提高和人们性观念的逐渐开放，梅毒螺旋体感染的发病率也出现了逐年增长的趋势，严重威胁了人们的身心健康。由于梅毒螺旋体感染的早期发病没有明显的疾病特征和表现，仅仅依靠对患者的病历资料、临床表现和常规检查无法确诊，容易被患者忽视，可能会因为漏诊而威胁到疾病预后，因此梅毒的检验主要依靠血清学进行诊断，因此针对患者进行准确的梅毒血清筛查十分重要。早重视、早筛查、早诊断、早治疗是预防梅毒不良结局的关键环节[5]。临床诊断梅毒螺旋体感染的检验方法较多，主要有血清学检验、TPPA等，其中TPPA是诊断该病的金标准，但由于该检验的操作步骤较为繁琐，检验的效率比较低，不利于大批样本的检验，因此，临床常考虑使用血清学检验方式进行诊断。

本次研究显示，ELISA法对梅毒螺旋体感染的诊断准确率为80.00%、敏感度为80.00%，均高于TRUST法，差异有统计学意义(P<0.05)；ELISA法对梅毒螺旋体感染的特异度为为80.00%，稍高于TRUST法，差异无统计学意义(P>0.05)。ELISA法对Ⅰ期、Ⅱ期梅毒螺旋体感染检出率高于TRUST法，差异有统计学意义(P<0.05)；两种检验方法对Ⅲ期梅毒螺旋体感染检出率差异无统计学意义(P>0.05)。提示ELISA法对梅毒螺旋体感染的诊断准确率比TRUST法更高，这一结果与高亚春[6]等人的研究具有一致性。ELISA法、TRUST法是临床常用的血清学检验方法，传统的TRUST法主要使用活化的心磷脂卵磷脂胆固醇进行检验，将VDRL抗原悬浮于含有甲苯胺红的溶液中，和梅毒螺旋体感染患者血清中的反应素反应，导致粉红色的凝集。有研究[7]显示，TRUST法检验的准确率、敏感性均比较低，而且在系统性红斑狼疮、类分湿性关节炎和疟疾患者中可能会引起假阳性，使梅毒检测结果出现误检。ELISA法是通过将梅毒特异性抗体固定在微孔板上，采取双抗原夹心法进行测定，具有操作简单、成本低廉、试剂稳定等特点，比较容易实现自动化结果判读和实验操作，有利于大批量样本的结果追溯以及检测，被广泛应用于临床梅毒螺旋体感染检测中。ELISA法可以把抗原抗体反应的特异性以及酶化学反应的敏感性进行有效的结合，因此该种方法不但敏感，而且具有比较高的特异性[8]。ELISA法具有较高的催化反应转化率以及较高的酶纯度，并且性质比较稳定，专一性较强，对梅毒的灵敏度明显高于凝集反应。ELISA法能同时测量研究对象血清内梅毒抗体IgM和IgG，对于梅毒抗体弱阳性的标本也可以检测出。ELISA检测方法的准确率、敏感度相对更高，能够显著提高诊断的准确率，但仍然不是百分百准确的检验方法，因此临床对于梅毒螺旋体感染的检查仍然需要充分结合症状表现，进一步进行综合的分析和确诊。由于本次研究的样本量不足，研究的结果具有一定的局限性，尤其是针对不同时期梅毒螺旋体感染的检出情况的对比中，希望今后能有更大量样本的研究，提供更为全面的结果。

综上所述，ELISA法在诊断梅毒螺旋体感染中的准确率、特异度、敏感度均比较高，且显著高于TRUST法，值得进一步使用推广，但该方法仍然不是百分百准确的检验方式，随着现代医疗事业的不断进步和创新，临床需要进一步加强对于梅毒螺旋体感染的研究，寻找更加准确的检验方法、为广大患者的治愈提供希望。