CIP2A mRNA、miR-802与前列腺癌临床病理特征的关系及对患者预后的预测价值*

吴挺明，车宪平，徐 磊，胡鑫明，符仕宝

海南医学院第二附属医院泌尿外科，海南海口 570311

前列腺癌是中老年男性常见的泌尿系统恶性肿瘤，相关统计显示，我国2015年前列腺癌预期发病率和病死率分别为6.03/100 000、2.66/100 000[1-2]。前列腺癌早期常无特异性症状，多数患者确诊时已处于中晚期，预后差[3]。目前，前列腺癌发生的确切分子机制尚不清楚。因此，深入研究与前列腺癌发生、发展、预后相关的分子机制，对前列腺癌早期诊断和靶向治疗具有重要意义。蛋白磷酸酶2A(PP2A)的癌性抑制因子(CIP2A)是一种癌蛋白，可抑制PP2A对癌蛋白c-Myc的水解，上调c-Myc水平，促进癌细胞增殖[4]。另外，恶性肿瘤发生时常伴有大量微小RNA(miRNA)异常表达[5]。既往临床及基础研究已证实，前列腺癌患者组织中CIP2A mRNA、miR-802均异常表达[6-7]，但相关生物学影响机制尚不明确。基于此，本研究探讨CIP2A mRNA、miR-802与前列腺癌患者临床病理特征的关系及对患者预后的预测价值，旨在为该疾病靶向治疗研究提供参考依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2015年2月至2017年12月本院收治的前列腺癌患者84例作为观察组，另选取同期收治的46例良性前列腺增生患者作为对照组。纳入标准：前列腺癌患者均行前列腺癌根治手术，经病理组织活检确诊为前列腺癌；前列腺增生患者符合文献[8]中良性前列腺增生诊断标准，行电切手术；患者临床资料完整。排除标准：合并冠心病、高血压或(和)糖尿病等疾病；合并其他恶性肿瘤；合并呼吸系统、泌尿生殖系统等感染性疾病；严重心、肝、肺、肾等重要脏器功能不全。观察组：年龄52～77岁，平均(64.82±4.76)岁；体质量指数(BMI)18～27 kg/m2，平均(22.51±1.76)kg/m2；临床分期T1～T2期43例，T3～T4期41例；Gleason评分2～7分53例，8～10分31例；有淋巴结转移38例；病理分级G1级25例，G2级32例，G3级27例。对照组：年龄55～79岁，平均(66.03±6.31)岁；BMI 18～28 kg/m2，平均(22.74±1.91)kg/m2。两组年龄、BMI比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究已告知患者及家属，均知情同意，本研究经医院伦理委员会审批通过。

1.2方法 (1)治疗：前列腺癌患者术后均根据病情采用抗雄激素药物治疗。(2)标本采集：观察组取前列腺癌组织，对照组取前列腺增生组织，送常规病理检查。(3)CIP2A mRNA、miR-802检测：Trizol试剂盒(美国Invitrogen)提取组织总RNA，反转录，得到cDNA，利用实时荧光定量聚合酶链反应检测组织中CIP2A mRNA、miR-802表达水平，相对表达量根据2-ΔΔCt计算，引物由上海生工生物工程公司合成。

1.3观察指标 (1)两组CIP2A mRNA、miR-802水平。(2)癌组织CIP2A mRNA、miR-802水平与前列腺癌患者临床病理特征的关系。(3)术后随访3年，统计生存、死亡病例数，分析预后相关因素及癌组织CIP2A mRNA、miR-802水平对前列腺癌患者预后的预测价值。

2 结 果

2.1两组CIP2A mRNA、miR-802水平 观察组CIP2A mRNA水平高于对照组(P<0.05)，miR-802水平低于对照组(P<0.05)，见表1。

表1 两组CIP2A mRNA、miR-802水平对比

2.2癌组织CIP2A mRNA、miR-802水平与前列腺癌患者临床病理特征的关系 ≤60岁患者与>60岁患者癌组织CIP2A mRNA、miR-802水平对比，差异均无统计学意义(P>0.05)；不同临床分期、Gleason评分、淋巴结转移情况、病理分级、PSA水平的患者间癌组织CIP2A mRNA、miR-802水平对比，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 癌组织CIP2A mRNA、miR-802水平与前列腺癌患者临床病理特征的关系

2.3预后的单因素分析 术后随访3年，失访病例5例，有效随访79例，其中生存56例，死亡23例，总生存率为70.89%。CIP2A mRNA、miR-802以均值为界，≤均值为低水平，>均值为高水平。临床分期、Gleason评分、淋巴结转移、病理分级、PSA、CIP2A mRNA、miR-802水平为影响前列腺癌患者术后3年生存的因素(P<0.05)。见表3。

表3 预后的单因素分析[ n(%)]

2.4Cox回归模型分析 以前列腺癌患者术后3年生存情况为因变量，死亡赋值为1，生存为0，将表3中差异有统计学意义的指标作为自变量，应用Cox回归模型分析，结果显示，将临床分期、Gleason评分、淋巴结转移、病理分级、PSA水平控制后，CIP2A mRNA高水平、miR-802低水平仍是术后3年生存的影响因素(P<0.05)。见表4。

2.5癌组织CIP2A mRNA、miR-802水平对前列腺癌患者预后的预测价值 绘制CIP2A mRNA、miR-802水平预测前列腺癌患者预后的ROC曲线，结果显示，CIP2A mRNA、miR-802单项检测预测预后的曲线下面积(AUC)分别为0.905、0.912；应用SPSS软件的联合应用ROC理论模式，构建各指标联合预测预后的ROC模型，结果显示，联合预测的AUC最大，为0.948。见图1、表5。

图1 CIP2A mRNA、miR-802检测预测前列腺癌患者预后的ROC曲线

表4 Cox回归模型分析

表5 癌组织CIP2A mRNA、miR-802水平对前列腺癌患者预后的预测价值

3 讨 论

前列腺癌是来源于上皮细胞的一种恶性肿瘤[9]。目前根治性手术是早期前列腺癌主要的治疗手段，但晚期转移性前列腺癌或去势抵抗前列腺癌尚无有效治疗手段，故深入探索前列腺癌发生、发展、预后的相关分子机制对指导完善治疗方案具有重要价值。

CIP2A是肿瘤抑制因子，可调节肿瘤细胞增殖、凋亡，且在肿瘤细胞侵袭、迁移及上皮-间充质转化过程中发挥重要作用[10-11]。既往研究证实，CIP2A在前列腺癌、膀胱癌、肺癌均有异常表达，与癌症的发生、发展有关[12]。但前列腺癌中CIP2A生物学影响机制尚不明确。本研究数据显示，前列腺癌患者CIP2A mRNA水平高于良性前列腺增生患者，且不同临床分期、Gleason评分、淋巴结转移、病理分级、PSA水平的患者间癌组织CIP2A mRNA水平差异均有统计学意义(P<0.05)。分析其机制可能为：(1)癌蛋白c-Myc过表达会导致正常细胞无限增殖，诱导肿瘤发生。PP2A可破坏c-Myc稳定性，并经泛素化途径降解c-Myc，以调节细胞增殖、凋亡。而CIP2A能通过结合PP2A，抑制PP2A对c-Myc的去磷酸化作用，上调c-Myc表达，这可能是CIP2A促进前列腺癌发生、发展的重要机制[13]。(2)CIP2A结合PP2A形成的复合物可增强雷帕霉素靶蛋白复合物Ⅰ活性，抑制细胞自噬[14]。张延辉等[15]研究显示，小干扰RNA(siRNA)干扰CIP2A表达后前列腺癌 DU-145细胞G1期到S期转换受阻，且DU-145细胞侵袭、转移能力降低。孙超等[16]研究表明，经siRNA转染的前列腺癌细胞CIP2A蛋白、mRNA表达及穿膜细胞数、增殖力均降低。这些研究均提示CIP2A可促进前列腺癌细胞增殖，增强其侵袭力，支持本研究结论。

miR-802属miRNA家族，定位于人染色体21q22.12，其可参与构成RNA诱导的沉默复合物(RISC)，而RISC通过不完全碱基配对识别靶mRNA，使其翻译抑制或去稳定化。有研究报道，肝癌、舌鳞癌等恶性肿瘤中miR-802表达下调，可引起其靶基因MAP2K4高表达，导致肿瘤进展[17-18]。本研究数据显示，前列腺癌患者miR-802低表达，且参与前列腺癌恶性进展，与高永亮等[19]研究相似。其机制可能为miR-802抑制靶基因Flotillin-2的作用降低，引起Flotillin-2表达增加，促进肿瘤细胞上皮-间质转化。RAB23是miR-802的生物学靶点，其表达增加可诱导肿瘤细胞G1期阻滞，抑制肿瘤细胞凋亡，并可促进Gli1、Gli2表达，诱导肿瘤细胞增殖，还可直接促进Rac1表达，促进肿瘤转移[20]。有研究发现，miR-802在转录后抑制RAB23表达，参与胃癌进展[21]。这也可能是miR-802促进前列腺癌发生及恶性进展的机制之一，但具体通路仍有待进一步验证。

本研究进一步分析了癌组织CIP2A mRNA、miR-802水平与前列腺癌预后的关系，Cox回归模型分析显示，将临床分期、Gleason评分、淋巴结转移、病理分级、PSA水平控制后，CIP2A mRNA高水平、miR-802低水平仍是术后3年生存的影响因素(P<0.05)，提示CIP2A mRNA、miR-802表达可作为预测前列腺癌的预后分子标志物。基于Logistic回归的ROC曲线可用于联合指标诊断效能评价。本研究结果显示，CIP2A mRNA、miR-802联合检测预测前列腺癌预后的AUC为0.948，灵敏度为78.26%，特异度为94.64%。这结果提示同时检测癌组织中CIP2A mRNA、miR-802的表达可为预测前列腺癌患者的预后提供有效参考。

综上所述，CIP2A mRNA高表达、miR-802低表达与前列腺癌发生、发展及患者预后有关，有望成为前列腺癌治疗的新靶点，指导个体化治疗，改善患者预后。