三种梅毒血清学检测方法的比较

瞿莉

【摘要】目的：比较三种不一样的梅毒螺旋体检测方法在临床中的价值运用。方法：选取2021年6月—2021年12月在南京市妇幼保健院进行梅毒检测的人群 190例为研究对象，分别使用电化学发光法（ECLIA）和甲苯胺红不加热试验（TRUST）及梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）对梅毒螺旋体抗体进行检测，评估其临床价值。结果：ECLIA检测的准确率93.68%，灵敏度100%，特异度29.41%，阳性预测值93.51%，阴性预测值100%；TRUST检测的准确率42.11%，灵敏度36.42%，特异度100%，阳性预测值100%，阴性预测值13.39%。结论：TRUST检测梅毒有较高的假阴性率；ECLIA检测可适用于梅毒大批量初筛；TPPA检测梅毒有较高的可靠性，可作为其他血清学方法检测阳性的确证试验。

【关键词】电化学发光法（ECLIA）；甲苯胺红不加热试验（TRUST）；梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）；梅毒

Comparison of three serological detection methods for syphilis

QU Li

Maternity Hospital affiliated to Nanjing Medical University （Nanjing Maternal and Child Health Care Hospital）， Nanjing， Jiangsu 210004， China

【Abstract】Objective：To compare the clinical application value of three different detection methods for treponema pallidum.Methods：From June 2021 to December 2021， 190 cases of syphilis in Nanjing Maternal and Child Health Care Hospital were selected as the research subjects. To evaluate the clinical value of treponema pallidum antibody， ECLIA， Toluidine red unheated test （TRUST） and Treponema pallidum gelatin agglutination test （TPPA） were used.Results：ECLIA detection accuracy of 93.68% and 100% sensitivity and 29.41%， positive predictive value 93.51%， negative predictive value of 100%.The TRUST test the accuracy of 42.11%， 36.42% sensitivity and 100%， positive predictive value 100%， negative predictive value of 13.39%.Conclusions：There was a high false negative rate in TRUST detection of syphilis. ECLIA can be used to screen syphilis in large quantities.TPPA has high reliably in syphilis detection and can be used as a confirmatory test for other methods.

【Key Words】 Electrochemiluminescence （ECLIA）； Toluidine red unheated test （TRUST）； Treponema pallidum gelatin agglutination test （TPPA）； Syphilis

梅毒是由蒼白（梅毒）螺旋体感染的以性传播为主的传染性疾病。全国近几年梅毒发病率呈现逐年增长趋势，梅毒发病比较隐晦，非常容易造成大面积性传播。《中国预防与控制梅毒规划 （2010—2020年）》将梅毒诊断管理网络系统归列为实施筹划发展计划的大前提[1]。梅毒感染具有一定的潜伏期，在被梅毒感染后大约需要2～4周的时间来在人体内产生梅毒特异性抗体，而类脂质抗体需要大概4～6周的时间。如果太早检查容易出现假阴性的情况，因此建议在发生高危性行为后，满六周再去正规的医院检查梅毒血清学，这样出来的检查结果才真实可靠。一方面，可以通过在皮损部位来检测梅毒螺旋体，不过这仅限于检测一期梅毒和部分二期梅毒患者的皮损；另一方面，可以通过患者的血液来做梅毒抗体检测。临床上电化学发光法（ECLIA），甲苯胺红不加热试验（TRUST）及梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）是梅毒螺旋体抗体检查的常用方法，虽然三者之间的优点和缺点已经有很多研究证明，但至今仍未达到理想共识。本次研究实验用于比对三种不同梅毒血清学检查方法的应用特征，现如下表述。

1 资料与方法

1.1 一般资料

初筛2021年6月—2021年12月在我院进行梅毒检查的确诊梅毒患者173例，非梅毒患者17例的血清标本为研究对象，梅毒患者173例符合《梅毒诊断标准》 （WS273-2007） 中诊断指标及各期梅毒临床表现[2]。其中女性181例，男性9例，年龄18～75岁，平均年龄（36.59±12.39）岁.

1.2 仪器和试剂

仪器：Cobas e601 电化学发光分析仪（德国罗氏公司生产）；恒温箱为新苗三用恒温水箱，其型号为H.SWX-600BS；梅毒旋转振荡器由江苏新康医疗器械有限公司生产的XK96-9型；生物安全柜型号为ESCO-A2型。所用仪器设备的检测性能均能满足实验要求。

试剂：ECLIA是由德国罗氏公司原装进口的配套试剂；TRUST是英科新创（厦门）科技有限公司生产的梅毒甲苯胺红不加热血清试验诊断试剂盒；TPPA是由日本富士瑞必欧株式会社体外诊断用医药品梅毒螺旋体抗体诊断试剂。上述试剂盒均在有效期内。

1.3 方法

患者均于清晨采集静脉血至少2mL，采血前避免剧烈运动，采集完成进行离心后取上清液进行检测，分别利用电化学发光法（ECLIA）、甲苯胺红不加热试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）进行检测，所有检测遵循试剂盒说明书进行。

1.4 观察指标

诊断标准：参照《性病诊断标准》中有关梅毒的临床诊断指标，比较其上限值（S/CO），如超过上限值（>1.0），则表明梅毒呈阳性结果，并确诊为梅毒患者。分别记录其特异度，灵敏度，阴性预测值，阳性预测值的比较结果[3]。以TPPA结果作为金标准，计算ECLIA和TRUST的准确率、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值的结果比对。

1.5 统计学方法

采用SPSS 25.0统计学软件进行数据分析。计数资料采用（%）表示，进行χ2检验，计量资料采用（χ±s） 表示，进行t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

ECLIA检测的灵敏度100% ，特异度29.41% ，阳性预测值93.51% ，阴性预测值100% ；TRUST检测的灵敏度36.42%，特异度100% ，阳性预测值100%，阴性预测值13.39% 。结果见表1、表2、表3。

3 讨论

我院自2011年以来，梅毒的确诊量与日俱增，病情的迅猛增长严重影响了患者的身心健康及家庭和谐。常规的妇科手术、婚检、孕检和产检等均需要进行梅毒检测，检测患者人群较多，对检测结果的准确性要求較高，并且对于检测结果的时间要求也比较严格[4-5]。现当今实验室检测梅毒螺旋体主要有血清学和病原学两种方法，暗视野显微镜是常用的病原体检测技术，但暗视野显微镜检查的成本较高，镜检技术难度高、环境要求较严苛，限制了其临床推广。同时，PCR技术也是常用检查梅毒螺旋体抗体的DNA方法，但大多数实验室并没有获批的核酸试剂可用，所以实验室普遍采用血清学检测方案检查梅毒螺旋体。目前各大医院比较常用的是甲苯胺红不加热试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）。TRUST是非特异性梅毒血清学试验，常用于梅毒早期诊断，但对潜伏早期梅毒不敏感，假阴性率较高，常因假阴性而漏检，临床上容易造成医患及家庭纠纷。TPPA是检测血清中特异性梅毒螺旋体抗体，敏感度较高，特异度也较高。TPPA检测呈现阳性图像，一般终身维持TP阳性无法改变，与梅毒是否治愈或者疾病是否活动无关，与梅毒滴度变化无关，故不能成为梅毒进程变化和评价效果的指征，只能够作为梅毒确认试验的金标准.但是因为TPPA检测人工操作复杂，反应时间过长，检测成本较高，无法应用于基层大规模初筛。ECLIA是一项近几年来发展很好的新型检测技术，不仅灵敏度非常高，准确度也非常高，检测界限广，重复性能较好，稳定性能较佳，检测速度较快，可避免交叉污染，是血清免疫分析技术发展的风向标。全程的自动化操作流程更可以大大降低人为前后操作差异，使得结果具有更高的一致性，有助于人群普及筛查工作的开展[6]。但是由于ECLIA法存在一定的假阳性率，血清学方法检查的特异度具有一定的局限。临床应根据实验室客观需要，对于 （S/CO） 处于低值（如0.9～2.0）的标本尽可能多选择几种血清学方法进行比较复查，并有比较合理的复检流程. 以提高梅毒螺旋体抗体诊断的灵敏度和特异度，尽可能地降低漏诊和误诊。一般来说，初筛试验是允许有假阳性结果发生的，但是应尽可能避免出现假阴性的结果。

综上所述，从试剂成本， 操作流程，结果判读，数据保存，以及检测结果的准确性，灵敏度等方面综合考虑，ECLIA可作为大批量梅毒标本筛查的理想检测手段。TPPA可以作为血清学检测初筛阳性患者进一步的复查方法，进行确证试验。临床上可根据患者的实际情况选择TRUST进行检测，因为其成本低及操作简便，可避免梅毒确诊患者治疗期间重复检测，也可通过梅毒抗体的滴度来达到治疗目的。

参考文献

[1] 史灵恩，陈沄渟，刘晓燕，等.2016年江苏省梅毒筛查情况及感染状况[J].江苏预防医学，2019，30（3）：288-2 9 0 .

[2] WS 273-2007，梅毒诊断标准[S].

[3] 初慧，王永华，王依彩.多种梅毒检测方法的临床效果对比分析[J].医学食疗与健康，2020，18（15）：171，173.

[4] 薛华，张姗姗.3种梅毒检测方法在特殊人群检测中的应用[J].江苏预防医学，2018，29（5）：537-538.

[5] 郑松岩.梅毒标本的批量检测方法探讨[J].中国现代药物应用，2016，10（7）：28-29.

[6] 吴斯玮，常欧，王黎阳，等.ECLIA与TP-ELISA在梅毒检测中的一致性比较[J].大医生，2017，2（Z2）：71-72.