什么是布氏菌一般采用哪种检验方法更加准确

李朝国　张丽娜

革兰氏阴性菌是目前我国生活饮用水、食品等样品中最常检出的致病菌，在与人体接触后可导致感染发生，引起多种疾病，对身体健康造成严重影响。其中，布氏菌较为常见，可在被病畜污染的生活饮用水及肉、奶等食品中检出。而加强对布氏菌的检验则能够有效控制多种急慢性疾病的发生，包括睾丸炎、骨髓炎、脊柱炎等疾病。那么，什么是布氏菌呢？又如何提高布氏菌的检验准确率呢？本文就针对这一话题进行分析。

什么是布氏菌？

布氏菌是一类革兰氏阴性的短小杆菌，多容易感染牛、猪、羊等动物，引起母畜感染性流产等。那么，人类接触带菌动物、食用病畜及其乳制品是否会发生感染呢？那当然是肯定的，人类一旦接触到上述物品均可被感染。实际上，我国部分地区曾经发生过流行，但目前已经得到控制。

布氏菌是帝国主义者列为失能性生物战剂之一，其中布氏菌属可分为羊、牛、猪、鼠、绵阳以及犬布氏菌六个种类，具备20个生物型，而在我国主要流行的是羊、牛以及猪三种布氏菌，其中以羊布氏菌最为常见。

布氏菌多数情况下主要是感染家畜，而家畜的临床症状并不会十分明显，而在人类接触到污染的家畜、奶、肉等物质时，则可直接被感染，大多数患者以青壮年为主。该种细菌能够在进入人体后被吞噬细胞吞噬，术后进入淋巴结，有时可在体内存活并形成感染灶，在感染后的2～3周会直接进入到血液循环中产生菌血症，并持续对人体的骨髓、肝、脾等造成感染，形成新的感染病灶。

那么，在感染布氏菌后可能发生那些改变呢？临床经验发现，急性感染病变大多数患者在发生布氏菌感染后通常可出现急性感染表现，主要以波浪状发烧为主要特征，发烧时间大约可在2～3周左右，随即1～2周无发烧症状，随后再次出现发烧。感染后多数患者可见多汗、头痛、乏力、游走性关节痛等症状。但部分患者在全身症状消退后才可能出现局部症状。同时，受到布氏菌的感染影响，可累及患者腰椎位置，出现持续性腰背痛症状，伴有肌肉痉挛、活动受限等。更有患者常发生坐骨神经痛等症状，检查可见局部压痛或叩痛，少数患者于髂窝处可观察到脓肿包块，产生硬膜外脓肿压迫脊髓及神经根，出现感觉、运动障碍等，伴有肝、脾肿大，区域性淋巴结肿大表现。

慢性感染患者主要以多处关节病变为常见表现，大多数发生在腰椎位置，小部分患者在胸椎位置，同时在胸腰段、骶椎或骶髂关节位置。男性患者可伴有睾丸肿大、睾丸炎症等疾病，慢性布氏菌感染者具备自愈的特征，但自愈的时间较长。

为了保障人民群众的身体健康则需要加强布氏菌的监测，防治被布氏菌感染的家畜的肉、奶等食品流入市场。那么，布氏菌的检验方式有哪些呢？

布氏菌的检验方式

布氏菌目前能够选择准确的检验方式为病原学检查，而病原学检查又可分为抹片检查以及离培养鉴定。

抹片检查

抹片检查是指取需检查的畜胚胎绒毛叶组织、流产胎儿胃液、分泌物等作为抹片，并使用改良的齐尔-尼尔森石碳酸复红原液（碱性复红1 g，溶于10 ml纯乙醇中，加入90 ml5%的石炭酸水溶液，混匀即成）的110稀释液染色10 min，用0.5%醋酸溶液脱色20 s，冲洗后，用1%美蓝复染20 s，镜检。布氏杆菌染成红色，背景为蓝色。布氏杆菌大部分在细胞内，集结成团，少数在细胞外。衣原體和胎儿弧菌也引起流产，在抹片中也染成红色，但形态与布氏杆菌不同，可用作区别鉴定。

分离培养鉴定

目前检验中认为，分离培养鉴定是诊断布氏菌最可靠的方式之一，只需要从病羊体内或排出物中发现病原体即可确诊。但由于患病动物身体状态、感染时期和发病过程等原因，往往不易检查出病原。因此，在进行分离培养时，应选择适宜时机（如产后），采取适宜病料（如胎儿和产后排出物及病羊的网状内皮细胞等），用适宜培养基分离培养才能成功。一般是将被检材料接种于两个同样的选择培养基（每100 ml基础培养基，如血清葡萄糖琼脂、血清马铃薯浸液琼脂、胰酶消化蛋白胨琼脂、血清马丁汤琼脂中加入抑菌药物，放线菌酮10 mg，杆菌肽25单位，多黏菌素（B6单位）平板，1个置10%二氧化碳（CO2）环境37℃培养，1个置普通温箱37℃培养，逐日观察，通常在3～10天可出现生长，然后移植于血清葡萄糖琼脂纯化。

如符合下述全部条件，可认为是布氏杆菌属的细菌：细小的革兰氏阴性球杆菌，无芽胞、荚膜和鞭毛，不运动，需氧，接触酶阳性，糖发酵，甲基红试验（MR），维培试验（VP），吲哚、柠檬酸盐利用等反应均为阴性，光滑型菌落能与布氏杆菌阳性血清凝集，粗糙型菌落能与布氏杆菌R血清凝集。

为什么分离培养鉴定是最准确的检验方式呢？这主要是由于布氏菌属于需氧菌，因此在初次分离时需要在5%～10%的CO2环境中才能生长，并选择最适合的温度37℃、最适宜的pH值为6.6～7.1，其对营养的要求较高，同时在生长是需要硫胺素、生物素、烟草酸、泛酸钙等，而试验中常使用的肝浸液培养基以及改良厚氏培养基均符合布氏菌的生长需求，明显提高了布氏菌的检出准确率。

另外，需要注意的是，人体患病后可产生免疫力，在不同菌种与生物型之间又存在交叉免疫，布氏菌多以细胞内寄生为主，抗体不易直接发挥作用，因此多选择诊断细胞免疫以提高诊断准确率。

结语

布氏菌是一种可引起急性、慢性疾病的革兰氏阴性杆菌。布氏菌病是人畜共患疾病，对人体健康危害较大，通过分离培养鉴定可以明显提高检出率，做到早发现、早诊断、早治疗，及早清除病畜，以免引发感染流行，造成更大财产损失，对保护人类生命财产安全具有重大的意义。