降糖药物DPP-4i抑制鼻咽癌细胞侵袭的机制研究

徐欢

摘要： 目的 研究降糖药物二肽基肽酶4抑制剂（DPP-4i）抑制鼻咽癌细胞侵袭的机制。方法 选择不同分化鼻咽癌细胞株，予以DPP-4i处理，检查肿瘤细胞的运动情况，选择Transwell/Transwell+基质胶实验，观察细胞侵袭的能力。结果 CNE-2细胞株上，DPP-4i可显著抑制DPP-4酶的活性。DPP-4i对鼻咽癌细胞的增殖影响并无统计差异（P>0.05）。DPP-4i可抑制鼻咽癌细胞CNE-2的侵袭。结论 DPP-4i能够抑制鼻咽癌细胞侵袭现象，为临床治疗提供指导意义，并为靶向治疗提供新靶点。

关键词：鼻咽癌;二肽基肽酶4抑制剂;细胞侵袭;降糖药物

【中图分类号】  R766.3【文献标识码】A 【文章编号】1673-9026（2022）14--01

数据显示[1]，预计至2030年全球患糖尿病的人数达到3.5亿人左右，并成为致死性疾病的第七位。另外有研究发现[2]，糖尿病患者成为各类肿瘤发生的危险因素，同时成为肿瘤患者死亡的主要原因。对此，临床建议糖尿病患者均应接受肿瘤标志物筛查，且针对糖尿病合并肿瘤或者具备肿瘤风险患者应慎重选择降糖药物。而鼻咽癌作为耳鼻喉科最为多见的恶性肿瘤，一旦合并糖尿病后，不仅增加患者痛苦，同时提升临床治疗的困难程度。针对此，临床应尽早选择合适的降糖药物，在控制血糖的基础上，抑制鼻咽癌细胞侵袭，从而为后续治疗提供新思路[3]。本文展开试验，结果如下：

1 资料与方法

1.1 实验材料

选择人低分化非角化性鼻咽癌细胞株（HONE-1、CNE-2）、人高分化角化性鳞状鼻咽癌细胞株（CNE-1）、携带EB病毒基因的人类低分化鼻咽癌细胞株（C666-1）。

1.2 方法

细胞培养：将分化程度不同的人NPC细胞株（HONE-1、CNE-2、CNE-1、C666-1），利用包含10%的小牛血清RPMI-1640培养基，37摄氏度，5%CO2培养。

DPP-4i处理：当DPP-4i剂量≤1000nM后，对鼻咽癌细胞的增殖并无影响。对数生长期细胞使用胰蛋白酶消化制备成单细胞悬液，计数的同时逐级稀释，接种在6cm直径的培养皿上。同时在标准状态下，持续培养12h，直至细胞贴壁，分别采取500nM、1000nM浓度DPP-4i处理。选择Transwell/Transwell+基质胶实验，观察细胞侵袭的能力。

1.3 观察指标

分析DPP-4i对鼻咽癌细胞株二肽基肽酶IV（DPP-4）酶的影响，并观察DPP-4i对鼻咽癌细胞株增殖的影响，最后探讨DPP-4i对鼻咽癌细胞株侵袭的影响。

1.4 统计学处理

全文数据选择SPSS 20.0系统计算，x±s为计量数据，选择t检验;百分比为计数数据，选择χ2检验，P<0.05为数据存在统计学差异。

2 结果

2.1 DPP-4i对鼻咽癌细胞株DPP-4酶的影响

鼻咽癌细胞株CNE-2通过1μM Saxagliptin（Sax）、0.6μM Saxagliptin（Sit）处理72h，利用荧光检测试剂盒测定肿瘤细胞的DPP-4酶活性，结果显示：CNE-2细胞株上DPP-4i可显著抑制DPP-4酶的活性，其余三种鼻咽癌细胞株上（HONE-1、CNE-1、C666-1）DPP-4i对DPP-4酶的活性均无明显影响。见表1。

2.2 分析DPP-4i对鼻咽癌细胞株CNE-2增殖的影响

对鼻咽癌细胞株CNE-2进行50nM、100nM、500nM、1000nM的DPP-4i处理0h、24h、48h、72h、96h，选择MTT法测定细胞相对数与活力，发现DPP-4i对鼻咽癌细胞的增殖影响并无统计差异（P>0.05）。见表2。

2.3 DPP-4i对鼻咽癌细胞株CNE-2侵袭的影响

对于对数生长的鼻咽癌细胞CNE-2以0.1μM Sax以及0.6μM Sit处理，24h后经Transwell/Transwell+基质胶实验检查细胞侵袭能力，结果显示DPP-4i可抑制鼻咽癌细胞CNE-2侵袭。见表3。

3 讨论

当糖尿病与肿瘤共存后，两者可相互作用，进一步加重病情，导致患者预后较差。曾有报道显示[4]，糖尿病与肿瘤存在密切关系，两种疾病存在较多共同的风险因素，例如表观遗传变化、高胰岛素血症、肥胖等，另外糖尿病在肿瘤发生发展上具有重要意义，可显著提升肿瘤出现的几率。

鼻咽癌属于临床较常见的恶性肿瘤，随着精确放射治疗技术的进步发展，加上放化疗综合治疗模式的推广使用，使得我国鼻咽癌患者的生存率获得明显改善，但研究发现肿瘤的迁移、侵袭成为疾病治疗失败的主要因素[5]。对此，尽早了解鼻咽癌的分子机制，寻找促进鼻咽癌细胞侵袭的相关因素，以此提升治疗鼻咽癌的疗效。研究指出[8]，糖尿病作为鼻咽癌上风险因素之一，与鼻咽癌患者的预后存在一定关联。目前，临床已发现降糖药物可对肿瘤的生物学行为造成潜在影响，例如二甲双胍能够控制乳腺癌以及子宫内膜癌，不仅能够控制血糖，同时有助于肿瘤的防治。近些年，临床发现该药在临床应用上存在一定局限性，还需作进一步的探究[9]。上述结果中：四类细胞株上，仅CNE-2细胞株上DPP-4i可抑制DPP-4酶的活性，其余三种鼻咽癌细胞株上（HONE-1、CNE-1、C666-1）DPP-4i对DPP-4酶的活性均无明显影响。DPP-4i对鼻咽癌细胞的增殖影响并无统计差异。DPP-4i可抑制鼻咽癌细胞侵袭，证实DPP-4i在抑制鼻咽癌细胞CNE-2侵袭上效果更好，可为患者后续治疗提供新思路。其中DPP-4i能够抑制DPP-4活性，并预防胰高血糖素产生，同时增强胰岛B细胞数量，对胰腺功能发挥保护作用，并引起降糖效应，成为新型降糖药物。除此之外，DPP-4作为跨膜糖蛋白，可广泛分布在多种细胞上，同时可在生命期间上发挥重要的调节功效，并促进肿瘤细胞侵袭。由此可见，DPP-4i可抑制鼻咽癌细胞侵袭，值得推广。

综上所述，DPP-4i能够抑制鼻咽癌细胞侵袭现象，为临床治疗提供指导意义，并为靶向治疗提供新靶点，进一步增强临床效果。

参考文献：

[1]周洋，石秀锦，彭文星，等.2014–2018年我国七城市DPP-4抑制劑使用现状调查[J].中国药物应用与监测，2019，16（6）：369-372，382.

[2]马慧梅，公丕云，董建军.二肽基肽酶4抑制剂对2型糖尿病患者心血管疾病的影响[J].中国糖尿病杂志，2020，28（3）：237-240.

[3]钱丹，谭湘萍，梅峥嵘，等.2型糖尿病患者在磺酰脲类药物治疗基础上加用DPP4抑制剂的疗效和安全性Meta分析[J].重庆医学，2019，48（16）：2814-2821.

[4]冯德翔，杨潇，吕建成，等.二肽基肽酶-4基因表达促进膀胱癌进展并抑制顺铂化疗敏感性[J].中华实验外科杂志，2021，38（10）：1967-1970.

[5]武仅，张莹，吴文迅.Graves病合并2型糖尿病患者二肽基肽酶-4水平的变化及使用抑制剂治疗的效果[J].中国实用医刊，2019，46（18）：12-15.

项目：广西壮族自治区卫生和计划生育委员会自筹经费科研课题（合同号：Z20170207）

课题名称：降糖药物DPP-4i 促进鼻咽癌细胞迁移/侵袭的机制研究