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4种中药复方对长江鲟幼鱼抗氧化和抗应激指标的影响

2022-05-26张建明张德志舒德斌田甜饶军苏巍

南方农业学报 2022年2期
关键词:抗氧化免疫力

张建明 张德志 舒德斌 田甜 饶军 苏巍

摘要:【目的】探討不同中药复方对长江鲟幼鱼抗氧化和抗应激指标的影响,筛选能有效提高长江鲟幼鱼免疫力及抗病力的中药复方,为中药在长江鲟养殖生产中的推广应用提供参考依据。【方法】将17味中药按照中药配伍理论设计4种中药复方,分别是复方I(鱼腥草∶金银花∶大黄∶茯苓∶甘草︰黄芪=3∶3∶1∶2∶1∶2)、复方II(板蓝根∶大黄∶五加皮∶党参=3∶3∶4∶3)、复方III(金银花∶杏仁∶贯众∶大青叶∶山豆根∶桔梗=3∶2∶2∶2∶3∶2)、复方IV(黄芪∶黄柏∶甘草∶山楂∶五味子∶大黄∶党参=3∶3∶1∶2∶2∶2∶2),以不添加中药为对照组,按0.5 g/kg的添加量进行长江鲟幼鱼饲喂试验,并于第7和第14 d采集血样测定各项血清生理指标。【结果】与对照组相比,复方I组和复方II组可不同程度地提高长江鲟血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化物酶(POD)、碱性磷酸酶(AKP)活性及总抗氧化能力(T-AOC)、热休克蛋白70(HSP70)含量,降低丙二醛(MDA)含量,但仅部分指标差异达显著水平(P<0.05,下同);复方III组和复方IV组可明显提高长江鲟血清SOD、CAT、GSH-Px、POD、AKP活性及T-AOC,降低MDA和皮质醇(COR)含量,且大部分指标与对照组的差异达显著水平。相关分析结果表明,SOD活性与GSH-Px活性及T-AOC、POD活性与GSH-Px活性呈极显著正相关(P<0.01,下同),POD活性与SOD活性、CAT活性及T-AOC呈显著正相关,SOD活性与COR含量、T-AOC与COR含量呈极显著负相关,GSH-Px活性与COR含量、T-AOC与MDA含量呈显著负相关。【结论】在基础饲料中添加适宜的中药复方对长江鲟幼鱼抗氧化和抗应激能力有显著促进作用,尤其以复方III(金银花、杏仁、贯众、大青叶、山豆根、桔梗)和复方IV(黄芪、黄柏、甘草、山楂、五味子、大黄、党参)的效果最佳,可有效缓解长江鲟幼鱼机体面临的应激反应,达到保护效果。

关键词: 长江鲟;中药复方;抗氧化;抗应激;免疫力

中图分类号: S965.215                           文献标志码: A 文章编号:2095-1191(2022)02-0568-09

Effects of four Chinese herbal medicine compound on antio-xidation and anti-stress indexes of Acipenser dabryanus juveniles

ZHANG Jian-ming, ZHANG De-zhi, SHU De-bin, TIAN Tian, RAO Jun, SU Wei

(Institute of Chinese Sturgeon Research, China Three Gorges Project Corporation/Hubei Key Laboratory of Three

Gorges Project for Conservation of Fishes, Yichang, Hubei  443100, China)

Abstract:【Objective】To test the effects of four different Chinese herbal medicine compound on the anti-oxidation and anti-stress physiological indexes of Acipenser dabryanus juveniles, so as to provide reference for the promotion and application of traditional Chinese medicine in the breeding and production of A. dabryanus juveniles. 【Method】Four medicin componnds were formulated from 17 sources used in traditional Chinese herbal medicines according to the theory of Chinese medicine compatibility. The formulations were∶compound I (Houttuynia cordata Thunb∶Lonicera japonica Thunb∶Rheum palmatum L.∶Poria∶Glycyrrhiza uralensis Fisch∶Astragalus mongholicus Bunge=3∶3∶1∶2∶1∶2); compound II(Isatis tinctoria∶R. palmatum L.∶Acanthopanar gracilistμlus W. W. Smith∶Codonopsis pilosula=3∶3∶4∶3); compound III(L. japonica Thunb∶Prunus armeniaca L.∶Cyrtomium fortunei J. Sm∶Clerodendrum cyrtophyllum Turcz∶Radix sophorae Tonkinensis:Platycodon grandiflorus=3∶2∶2∶2∶3∶2) and compound IV(A. mongholicus Bunge∶Phellodendron∶G. uralensis Fisch∶Crataegus pinnatifida Bunge∶Schisandra chinensis: R. palmatum L.∶C. pilosula=3∶3∶1∶2∶2∶2∶2). The basic feed without any Chinese herbal medicine was used as the control group. The compound Chinese herbal medicines were fed at a dosage of 0.5 g/kg body weight during 14 days of the breeding period. Different physiological indexes of juvenile serum were detected on the 7th and 14th days. 【Result】Compared with the control group, compounds I and II enhanced the activities of superoxide dismutase(SOD), catalase(CAT), glutathione peroxidase(GSH-Px), peroxidase(POD), alkaline phosphatase(AKP), the total antioxidant capacity(T-AOC) and content of heat shock protein 70(HSP70). The contents of malondialdehyde (MDA) and cortisal(COR) of the juvenile serum was reduced to varying degree, but only some differences were significant (P<0.05, the same below). Compounds III and IV clearly enhanced the activities of SOD, CAT, GSH-Px, POD and AKP, the contents of T-AOC and reduced the contents of MDA and COR. Most altered indexes were significant compared with the control. The results of correlation analysis showed that,the remarkably significant posi-tive correlation was found between SOD and GSH-Px, SOD and T-AOC, POD and GSH-Px (P<0.01, the same below). A significant positive correlation was also found between POD and SOD, CAT and T-AOC. Furthermore, both SOD and T-AOC showed a remarkably significant negative correlation with COR. Further significant and negative correlations were observed between GSH-Px and COR, T-AOC and MDA. 【Conclusion】Adding suitable Chinese herbal medicine compounds into the basic diet can significantly promote the antioxidant and anti-stress capabilities in A. dabryanus juveniles. In particular, compound III (L. japonica Thunb, P. armeniaca L., C. fortunei J.Sm, C. cyrtophyllum Turcz, R. sophorae Tonkinensis) and compound IV (A. mongholicus Bunge, Phellodendron, G. uralensis Fisch, C. pinnatifida Bunge, S. chinensis, R. palmatum L., C. pilosula) have the best effect. These formulations can effectively relieve and protect A. dabryanus juveniles against stress.

Key words:Acipenser dabryanus; Chinese herbal medicine; anti-stress; anti-oxidation; immunity

Foundation items:National Key Research and Development Program(2016YFC0502210);Science and Technology Planning Project of China Three Gorges Group Co., Ltd(WWKY-2021-0003,JG/18001B)

0 引言

【研究意义】长江鲟(Acipenser dabryanus)又称达氏鲟,是我国特有的淡水定居性鲟鱼,主要分布在长江上游水域(胡伟等,2020;武梦斌等,2020),目前关于长江鲟的研究主要集中在人工繁殖(龚全等,2013)、营养需求(张磊,2016)、早期发育(何斌等,2017;刘亚等,2017)及分子生物学(李薇等,2017)等方面。近年来,由于过度捕捞、水体污染及栖息地被破坏等原因,长江鲟野生资源量急剧下降,已被列为国家I级重点保护鱼类和极濒危物种(Zhang et al.,2011),为保护好长江鲟这一珍稀特有鱼种,我国实施包括禁捕、设立保护区、开展人工增殖放流在内的一系列保护措施。传统的抗生素治疗在水产动物疾病防治方面发挥了重要作用,但同时导致病原菌耐药性、鱼类抗生素依赖性及免疫力下降、药物残留及环境污染等问题,严重制约着我国水产业的健康发展(冒树泉等,2019)。我国农业农村部第194号公告明确规定,从2020年1月1日开始退出除中药外的所有促生长类药物饲料添加剂品种,兽药生产企业停止生产、进口兽药代理商停止进口相应兽药产品,同时注销相应的兽药产品批准文号和进口兽药注册证书。鉴于此,寻找能替代抗生素并有效提高鱼体抗氧化和抗病能力及鱼病防治效果的中药已成为当今水产养殖领域的重要研究方向之一。【前人研究进展】中药因其资源丰富易得、效果持久、不易产生耐药性的优点,在水产病害防治、提高机体抗氧化和抗应激能力等方面得到广泛关注。中药是目前鱼类等水产养殖动物免疫增强剂的主要来源,具有毒副作用小、高效性、性能多样化等优点(李鹏飞等,2021);富含多种营养成分,能促进机体新陈代谢和肝胰脏中消化酶分泌,同时含有多糖、有机酸及生物碱等免疫活性成分,可提高机体免疫力和抗病力;此外,作为饲料添加剂或免疫增强剂使用的中药,在调控水质、促进生长、提高免疫力和调节肠道菌群等方面也发挥了积极作用(苏永腾,2007;曾本和等,2019)。中药在渔业生产实践中的应用表明,作为混饲剂或饲料添加剂尤其适用于当前水产养殖业集约化、规模化生产的需要,不仅能解决化学药物、抗生素等引发的耐药性及环境污染问题,还完全符合发展绿色、无公害水产业的病害防治准则(赵明军等,2009)。朱莉等(2014)研究表明,中药复方(首乌、黄芪、甘草)和穿心莲可显著促进罗非鱼生长,并增强其抗氧化能力。齐茜等(2016)研究发现,饲料中添加中药复方对闪光鲟机体内部分血液生理生化指标具有积极的改善作用,并初步筛选出对闪光鲟生长和生化指标有促进作用的中药复方。路晶晶等(2018)研究表明,中药复方可显著提高大菱鲆幼鱼增重率、降低饲料系数,且对血脂具有调节作用,同时能显著提高大菱鲆血清中的过氧化物酶活性。李赫等(2018)研究证实,茯苓和丁香可分别作为嗜水气单胞菌和类志贺邻单胞菌引起的水产动物疾病防治药物,其次是小茴香、昆布、姜黄、肉桂、蛇床子、丁香、猪苓、黄柏及黄芪、牡丹皮、陈皮、肉桂、高良姜,以中药防治鱼病时可根据药物的性质,适当配伍,有效发挥药物的协同作用而提高疗效。任海等(2018)研究表明,黄柏、丁香及艾叶等 9 味中药对鲤鱼源嗜水气单胞菌有抑菌作用;赤芍、大青叶及茵陈等 12 味中药对青鱼源嗜水气单胞菌有抑菌作用;赤芍、丁香及黄柏等 12 味中藥对草鱼源嗜水气单胞菌有抑菌作用。冒树泉等(2019)研究指出,中药复方可促进大鳞副泥鳅生长、消化,提高机体抗氧化能力,其中又以复方I(板蓝根、大黄)和复方III(黄芪、黄柏)的效果最佳。方珍珍等(2019)研究发现,饲料中添加金银花和黄芪能在一定程度上提高锦鲤过氧化氢酶(CAT)活性、总抗氧化能力(T-AOC)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,增强机体的抗氧化和免疫能力。孙学亮等(2020)研究表明,摄食含中药复方的饲料对白点鲑和亚东鲑血液的抗氧化性、非特异性及消化酶指标均有促进作用。王凡等(2021)研究证实,在饲料中添加中药复方可提高虹鳟非抗氧化和特异性免疫功能。【本研究切入点】探究中药复方对长江鲟幼鱼机体抗氧化系统和抗应激系统的影响效果,可为鱼类病害防治及绿色环保渔药的开发与应用开辟新途径,但目前关于中药对鲟鱼类免疫、抗氧化和抗应激能力的影响鲜见研究报道。【拟解决的关键问题】以长江鲟幼鱼为研究对象,通过中药配伍探究4种复方对长江鲟幼鱼抗氧化和抗应激指标的影响,旨在筛选能有效提高长江鲟幼鱼免疫力及抗病力的中药复方,为中药在长江鲟养殖生产中的推广应用提供参考依据。

1 材料与方法

1. 1 试验材料

2020年4月在中国长江三峡集团有限公司中华鲟研究所对人工驯养的长江鲟亲鱼进行催产,通过挤压腹部获得成熟卵子和精子,干法授精获得受精卵,流水孵化获得长江鲟仔鱼,经人工饲养获得摄食配合饲料的10月龄长江鲟幼鱼。2021年2月选取鱼体完整、健康无伤,以及体质量1000±53 g的长江鲟幼鱼作为试验用鱼。长江鲟基础饲料营养成分:粗蛋白≥43%、粗脂肪≥5.0%、粗纤维≤5%、粗灰分≤18%、钙2.0%~5.0%、磷1.0%~3.0%、赖氨酸≥2.0%,基础饲料为粉料。中药购自湖北省宜昌市益丰大药房,药材烘干粉碎备用。

1. 2 试验设计

参考齐茜等(2016)、路晶晶等(2018)、王凡等(2021)的研究结果设计中药添加剂量,按照中药配伍理论设计4种中药复方,具体中药配方及添加量见表1。将中药按组方配比混匀,添加至长江鲟基础饲料中。试验共设5个处理组,其中A组投喂复方I;B组投喂复方II;C组投喂复方III;D组投喂复方IV;E组为对照组(CK),基础饲料不添加中药成分。养殖试验在玻纤缸(直径2.0 m,水深0.6 m)内进行,每处理组10尾鱼,每组2个重复。在暂养阶段,各处理组的长江鲟幼鱼均通过灌服方式投喂基础饲料(日投喂量0.5%),暂养7 d后开始进行正式试验。按照试验设计投喂量配制饲料,以水稀释成糊状,每天投喂1次,连续投喂14 d。

1. 3 饲养管理

采用流水单养模式,试验用水为经曝气和静止沉淀后的井水,养殖水温16~18 ℃。每天监测养殖水体溶氧量、氨氮及亚硝酸盐等水质指标,通过换水、排污,及时清除残饵和粪便等,保持良好的养殖水环境(溶氧量>6.0 mg/L、氨氮<0.2 mg/L、亚硝酸氮<0.05 mg/L)。养殖期间每天8:00、12:00、18:00分别监测并记录养殖池水温和溶氧量。

1. 4 血清生理指标检测分析

分别在第7 d和第14 d进行采样,从各处理组(包括重复组)中随机取5尾长江鲟幼鱼,利用非抗凝采血管尾静脉采血,2500 r/min离心15 min制备血清,-80 ℃保存备用。采用上海酶联生物科技有限公司的检测试剂盒,按说明进行各项血清生理指标检测,包括丙二醛(MDA)、SOD、CAT、过氧化物酶(POD)、皮质醇(COR)、GSH-Px、碱性磷酸酶(AKP)、T-AOC、热休克蛋白70(HSP70)及褪黑素(MT)。

1. 5 统计分析

采用SPASS 25.0和Excel 2020统计分析试验数据,利用单因素方差分析(One-way ANOVA)和Duncan’s多重比较进行显著性分析,并通过Pearson相关分析探究各项指标的相关性。

2 结果与分析

2. 1 中药复方对长江鲟血清SOD活性的影响

由表2可知,与对照组相比,至试验第7 d复方I组长江鲟血清SOD活性高于对照组,但与对照组无显著差异(P>0.05,下同);复方II组、复方III组和复方IV组的长江鲟血清SOD活性显著升高(P<0.05,下同)。至试验第14 d,复方I组和复方II组的长江鲟血清SOD活性高于对照组,但与对照组无显著差异;复方III组和复方IV组血清长江鲟血清SOD活性显著升高。可见,以复方IV组长江鲟血清SOD活性最强。

2. 2 中药复方对长江鲟血清CAT活性的影响

由表3可知,与对照组相比,至试验第7 d和第14 d各中药复方处理组长江鲟血清CAT活性均有不同程度的升高,其中以复方III组长江鲟血清CAT活性最高,显著高于对照组。

2. 3 中药复方对长江鲟血清GSH-Px活性的影响

由表4可知,与对照组相比,至试验第7 d所有中药复方处理组长江鲟血清GSH-Px活性均呈不同程度的升高趋势,其中复方III组和复方IV组长江鲟血清GSH-Px活性显著高于对照组。至试验第14 d,复方I组、复方II组和复方IV组长江鲟血清GSH-Px活性虽然有所升高,但与对照组无显著差异,仅复方III组血清GSH-Px活性显著高于对照组。

2. 4 中药复方对长江鲟血清POD活性的影响

由表5可知,与对照组相比,至试验第7 d复方I组、复方II组、复方IV组长江鲟血清POD活性均有不同程度的升高,但未达显著水平,仅复方III组长江鲟血清POD活性显著升高。至试验第14 d,复方I组和复方II组长江鲟血清POD活性与对照组无显著差异,而复方III组和复方IV组长江鲟血清POD活性较对照组显著升高。

2. 5 中药复方对长江鲟血清AKP活性的影响

由表6可知,与对照组相比,至试验第7 d各中药复方处理组长江鲟血清AKP活性均有不同程度的升高,但未达显著水平。至试验第14 d,复方I组、复方III组和复方IV组长江鲟AKP活性较对照组均显著升高。

2. 6 中药复方对长江鲟血清MDA含量的影响

由表7可知,至试验第7 d,除复方I组长江鲟血清MDA含量较对照组略有上升外,复方II组、复方III组和复方IV组长江鲟血清MDA含量均呈下降趋势,但未达显著水平。至试验第14 d,复方III组和复方IV组长江鲟血清MDA含量显著降低,复方I组和复方II组长江鲟血清MDA含量虽然有所下降但未达显著水平。

2. 7 中药复方对长江鲟血清T-AOC的影响

由表8可知,至试验第7 d复方I组和复方II组长江鲟血清T-AOC与对照组无显著差异,复方III组和复方IV组长江鲟血清T-AOC则显著升高;至試验第14 d,除复方I组外,其他中药复方处理组的长江鲟血清T-AOC均显著升高。

2. 8 复方中药对长江鲟血清COR含量的影响

由表9可知,至试验第7 d复方IV组长江鲟血清COR含量较对照组显著降低,复方I组、复方II组和复方III组长江鲟血清COR含量也呈不同程度的下降趋势,但与对照组无显著差异。至试验第14 d,除复方II组长江鲟血清COR含量略有升高外,其他3个中药复方处理组长江鲟血清COR含量均有不同程度的降低,其中复方III组和复方IV组呈显著降低趋势。

2. 9 中药复方对长江鲟血清HSP70含量的影响

由表10可知,至试验第7 d,除复方IV组外,其他3个中药复方处理组长江鲟血清HSP70含量较对照组均呈不同程度的上升趋势,但未达显著差异水平。至试验第14 d,除复方I组外,复方II组、复方III组复方IV组长江鲟血清HSP70含量则呈不同程度的上升趋势,其差异也未达显著水平。

2. 10 中药复方对长江鲟血清MT含量的影响

由表11可知,与对照组相比,至试验第7 d复方I组和复方II组长江鲟血清MT含量有所上升,而复方III组和复方IV组长江鲟血清MT含量呈下降趋势,均未达显著差异水平。至试验第14 d,各中药复方处理组长江鲟血清MT含量均呈不同程度上升趋势,但其差异未达显著水平。

2. 11 各指标间的相关分析结果

对各指标间的相关性进行分析,结果(表12)显示,SOD活性与POD活性呈显著正相关,与GSH-Px活性及T-AOC呈极显著正相关(P<0.01,下同),与COR含量则呈极显著负相关;CAT活性与POD活性呈显著正相关;POD活性与GSH-Px活性呈极显著正相关、与T-AOC呈显著正相关;GSH-Px活性与COR含量呈显著负相关;T-AOC与MDA含量呈显著负相关、与COR含量呈极显著负相关。

3 讨论

3. 1 中药复方对长江鲟幼鱼抗氧化能力的影响

为了防止自由基对生物体产生损害作用,在需氧生物体内已进化形成酶促反应抗氧化防御机制,即具有特异性的抗氧化酶系统(亢玉静等,2013)。SOD、POD、CAT及GSH-Px是机体抗氧化酶系统的重要组成部分,具有清除活性氧的能力,在维持机体氧化与抗氧化动态平衡的过程中发挥重要作用(Klaunig et al.,2011;Jia et al.,2019)。SOD是一类含有金属元素的氧化还原酶类,能催化超氧阴离子自由基转化为过氧化氢和氧气,清除体内的超氧阴离子自由基(Yu et al.,2018);而CAT、POD和GSH-Px可催化过氧化氢生产水和氧气(吴金明等,2016;虞为等,2021)。MDA是自由基氧化后产生的最终产物,可反映组织细胞的受损程度(Mansour,2000;何勤等,2021)。T-AOC是反映机体抗氧化系统清除自由基的关键指标(崔惟东,2009)。AKP参与鱼类的免疫应答及多种生理代谢过程,在营养物质吸收利用及非特异性免疫中发挥重要作用(万金娟等,2014)。

中药能提高鱼类机体的抗氧化能力,对其健康生长具有促进作用。齐茜等(2016)研究表明摄食中药复方的闪光鲟血液AKP含量显著升高;王煜恒等(2018)研究发现采用添加黄芪多糖的饲料投喂杂交鳢能显著提高其SOD和CAT活性、抑制MDA合成;冒树泉等(2019)研究证实添加中药复方可提高大鳞副泥鳅机体抗氧化能力;孙学亮等(2020)研究表明在饲料中添加大黄、黄芪、连翘、黄苓及丹皮可显著提高白点鲑和亚东鲑的血液抗氧化能力,且以投喂14 d的效果最佳;何勤等(2021)研究发现在鲤鱼日粮中添加银杏叶提取物可提高SOD、CAT、GSH-Px活性及其T-AOC。本研究结果表明,在整个试验期间,复方III组长江鲟血清SOD、CAT、GSH-Px、POD、AKP活性呈持续上升趋势,复方IV组在试验第7 d长江鲟血清SOD、GSH-Px活性显著增强,至试验第14 d长江鲟血清SOD、POD、AKP活性显著增强;复方III组和复方IV组长江鲟血清MDA含量在试验第14 d显著降低,说明复方III组和复方IV组可显著提高长江鲟机体的T-AOC,而复方I组和复方II组对长江鲟幼鱼抗氧化相关指标影响不明显。可见,复方III组和复方IV组的中药配伍能增强长江鲟幼鱼机体抗氧化防御能力,降低组织损伤作用,对其健康生长具有积极的促进作用。

3. 2 中药复方对长江鲟幼鱼抗应激能力的影响

应激是动物机体对外界不良因子刺激而产生的一种特异性或非特异性反应,是动物机体用以维持内环境平衡的适应性生理反应(Gwak,2003;Hoffnagle et al.,2006;韦海明,2014)。在养殖过程中,鱼类常面临着各种有害应激,当应激过于强烈时鱼体生理生化指标发生明显变化、机体免疫能力下降,极易受到病原体的侵袭,严重时可导致大批量死亡。COR是评价鱼类应激反应的重要指标(赵建华,2014);HSP70在机体内作为一种分子伴侣而对机体起保护作用,可调节细胞的生理功能,提高细胞对应激反应的耐受性(罗胜玉等,2017)。本研究结果显示,复方III组和复方IV组可有效降低长江鲟幼鱼血清COR含量,且未对血清HSP70含量产生影响,表明这2个中药复方的中药配伍对提高长江鲟幼鱼机体的抗应激能力具有促进作用。硬骨鱼类松果体产生的MT对机体具有保护作用,将MT注射到硬骨鱼体内可有效缓解机体受到的捕捞胁迫、缺氧胁迫及密度胁迫等(Dziegiel et al.,2003;Hardeland,2005;López-Patiño et al.,2013,2014)。在本研究中,各中药复方处理组长江鲟幼鱼的MT含量无显著变化,说明设计的中药复方对诱发长江鲟松果体分泌MT无显著影响,具体原因有待进一步探究。

本研究按照中药配伍理论设计4个复方。,复方I以黄芪为君药,补中益气,升阳固表,提高机体抗逆性;鱼腥草、金银花为清热解毒药,二者联用祛除邪毒;茯苓配大黄利于排毒,甘草为国老调和诸药。复方II以党参补中益气,五加皮祛湿补肝肾,二者联用培元固本;板蓝根清热解毒,大黄凉血解毒、泻热通肠、破积行瘀。复方III以金银花、大青叶、山豆根清热解毒,强力祛邪为君药,杏仁止咳平喘、润肠通便,桔梗宣肺利咽排脓,贯众治湿热毒疮;此方设计理论可治疗烂鳃病、鳃肿病、溃烂病及败血病等鱼类病征。组方IV以党参补中、黄芪实表、五味子生津固肾,三者联用使机体抗逆性增强;山楂健脾消食降脂,黄柏泻三焦之火,大黄泻热通肠、破积行瘀,甘草调和诸药;此方有补有泻,补而不腻,泻而不虚,阴阳平衡。可见,本研究设计的4个复方均以提高长江鲟幼鱼抗氧化、抗应激及免疫力为目的,用药以温补祛邪、清热解毒为主,配伍遵循“相须相使”的原则,但各中药复方对提高长江鲟幼鱼抗氧化和抗应激能力的效果存在一定差异,其中复方I和复方II仅对个别血清生理指标有促进作用,而复方III和复方IV对大部分抗氧化和抗应激指标具有显著提升作用,说明这2个中药复方对提高长江鲟幼鱼的抗氧化和抗应激能力具有良好的促进作用,与路晶晶等(2018)、冒树泉等(2019)、胡斌等(2019)的研究结果相似,即不同中药配伍组方对鱼类生长、消化、抗应激、抗氧化及免疫等指标产生的效果也存在明显差异,可能与中药组方配伍、中药产地及试验鱼种类等因素有关,因此今后应针对不同鱼类的适宜中药组方及使用方法进行深入分析,以获得最佳效果。

3. 3 不同中药复方处理组各指标的相關性

需氧生物体内进化形成的抗氧化防御机制及抗应激机制包括一系列复杂的酶促反应和指标变化反应(亢玉静等,2013;韦海明,2014),其中SOD、POD、CAT、GSH-Px等酶类是机体抗氧化酶系统的重要组成部分(Klaunig et al.,2011;Jia et al.,2019)。本研究通过对长江鲟不同抗氧化指标及抗应激指标进行相关分析,结果表明各指标间存在较复杂的相关性,其中,SOD活性与POD活性呈显著正相关,与GSH-Px活性及T-AOC呈极显著正相关(P<0.01,下同),与COR含量则呈极显著负相关;CAT活性与POD活性呈显著正相关;POD活性与GSH-Px活性呈极显著正相关、与T-AOC呈显著正相关;GSH-Px活性与COR含量呈显著负相关;T-AOC与MDA含量呈显著负相关、与COR含量呈极显著负相关。抗氧化指标与抗应激指标间存在一定关联性,共同为调控长江鲟幼鱼的抗氧化和抗应激系统发挥作用。

4 结论

在基础饲料中添加适宜的中药复方对长江鲟幼鱼抗氧化和抗应激能力有显著促进作用,尤其以复方III(金银花、杏仁、贯众、大青叶、山豆根、桔梗)和复方IV(黄芪、黄柏、甘草、山楂、五味子、大黄、党参)的效果最佳,可有效缓解长江鲟幼鱼机体面临的应激反应,达到保护效果。

参考文献:

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(責任编辑 兰宗宝)

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