2 种中药免疫增强剂对肉仔鸡新城疫疫苗免疫效果的影响

李秀富

（铜仁职业技术学院，贵州 铜仁 554300）

饲用抗生素添加是禽类养殖中公认的、 具有促生长和疫病防治作用的重要手段， 然而滥用抗生素带来的细菌耐药性问题、兽药残留问题，不仅对禽类疫病防控带来严峻挑战， 而且对公共卫生安全和食品安全造成威胁， 严重制约着禽类养殖的健康可持续发展。 随着农业农村部第194 号公告的颁布，中草药免疫增强剂成为研究焦点。免疫增强剂是一类通过非特异性方式增强机体抗原特异性反应的物质。 鸡新城疫 （Newcastle disease，ND）是制约养禽业健康发展的急性、烈性传染病之一，当前以免疫预防为主，但因环境应激、免疫抑制或生物制品保护力限制等影响， 免疫接种鸡群时常发病，给养禽业带来巨大经济损失。开发绿色、无污染、低成本、易推广、安全性高、无残留的中药免疫增强剂越来越被重视。 该试验通过探讨日粮中添加黄芪（Astragalus membranaceus，AM）和枸杞（Lycium barbarum，LB）对肉仔鸡新城疫疫苗免疫效果的影响， 以期为中药免疫增强剂在禽类生产中的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验动物1 日龄AA 白羽肉仔公鸡150 只，由铜仁职业技术学院畜牧兽医高水平专业群实验室提供。

1.1.2 药品及试剂

AM 和LB 购自铜仁中药材公司，新城疫疫苗购自和元生物公司，血清免疫球蛋白G（IgG）、血清免疫球蛋白M（IgM）含量检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所， 新城疫病毒抗原购自国生生物公司。

1.1.3 主要仪器设备

电子天平为HZ 电子公司产品， 艾本德移液器和配套耗材购自江苏科学器材公司。

1.2 试验方法

1.2.1 试验设计与试验日粮

将150 只1 日龄肉仔鸡随机分为对照组（CG）组、AM 组、LB 组。 CG 组饲喂基础日粮，AM组和LB 组在基础日粮中分别添加1%的AM 粉和1%的LB 粉。 将试验鸡3 层笼养于铜仁职业技术学院专业实训基地，自由饮水、自由采食，饲养环境相同。 7 日龄时滴鼻点眼免疫ND 疫苗，试验期为35 d。 试验日粮由铜仁职业技术学院畜牧兽医专业实验室配制。 试验基础日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平

1.2.2 免疫性能指标测定

1.2.2.1 免疫器官指数

于肉仔鸡14 和35 日龄时， 每组随机取6 只空腹称重，颈部放血致死后，解剖摘取胸腺、脾脏和法氏囊，剔除筋膜与杂质，滤纸吸干水分后称鲜重，测定免疫器官指数，包括胸腺指数（ThI）、脾脏指数（SpI）和法氏囊指数（BFI）。 免疫器官指数（g/kg）=鲜器官重（g）/活体重（kg）。

1.2.2.2 新城疫病毒抗体（Newcastle disease virus antibody，NDV-Ab）效价

于肉仔鸡14、21、28、35 日龄时， 每组随机取6 只，心脏采血制备血清，按《新城疫诊断技术》（GB/T 16550—2008）标准测定NDV-Ab 效价。

1.2.2.3 血清免疫球蛋白含量

于肉仔鸡14 和28 日龄时，每组随机取6 只，心脏采血制取血清， 按照IgG 和IgM 测定试剂盒说明书测定血清IgG 和IgM 含量。

1.3 数据统计与分析

试验数据用Microsoft Excel 2017 初步整理，SPSS 19.0 统计学软件进行单因素方差分析，Duncan′s 方法进行多重显著性检验， 试验数据用“平均值±标准差”的形式表示。

2 结果与分析

2.1 2 种中药免疫增强剂对肉仔鸡免疫器官指数的影响

由表2 可知，14 日龄时，AM 组SpI 较CG 组提高31.17%（P＜0.01）， 较LB 组提高14.12%（P＜0.05），AM 组BFI 较CG 组提高34.86%（P＜0.05）。35 日 龄 时，LB、AM 组ThI 较CG 组 分 别 提 高14.29%（P＜0.05）、18.37%（P＜0.05），AM 组SpI 较CG 组提高35.84%（P＜0.05），较LB 组提高19.92%（P＜0.05）；LB 组、AM 组BFI 分 别 较CG 组 提 高9.76%（P＜0.05）、15.85%（P＜0.05）。

表2 2 种中药免疫增强剂的肉仔鸡免疫器官指数（n=6） 单位：g/kg

2.2 2 种中药免疫增强剂对肉仔鸡NDV-Ab 效价的影响

由表3 可知，LB 组NDV-Ab 效价较CG 组在28 日龄时显著（P＜0.05）提高34.78%，其余时段提高不显著（P＞0.05）；AM 组NDV-Ab 效价较CG 组在14、21、28 日龄时分别提高118.18%（P＜0.05）、75.00%（P＜0.05） 和56.52%（P＜0.05）；35 日龄时，LB 组和AM 组较CG 组均无显著（P＞0.05）升高。

表3 2 种中药免疫增强剂的肉仔鸡NDV-Ab 效价（n=6） 单位：log2

2.3 2 种中药免疫增强剂对肉仔鸡血清免疫球蛋白含量的影响

由表4 可知，14 日龄时，LB 组和AM 组血清IgM 含量较CG 组分别提高12.12%（P＜0.05）和15.15%（P＜0.05），AM 组血清IgG 含量较CG 组提高7.50%（P＜0.05）；28 日龄时，AM 组血清IgM 含量较CG 组提高11.76%（P＜0.05），LB 组和AM 组血清IgG 含量较CG 组分别提高11.32%（P＜0.05）和14.15%（P＜0.05）。

表4 2 种中药免疫增强剂的肉仔鸡血清免疫球蛋白含量（n=6） 单位：mg/mL

3 讨论

3.1 中药免疫增强剂对雏鸡免疫器官指数的影响

免疫器官是机体免疫细胞分化、 增殖和发育的场所， 免疫器官质量增加和指数增大反映了免疫器官中T、B 淋巴细胞增殖［1］和动物机体的免疫功能增强［2］。该研究结果显示，AM 和LB 均能显著提高肉仔鸡SpI、BFI 和ThI，AM 组SpI 和BFI 的增幅最为明显， 肉仔鸡14 和35 日龄时，AM 组SpI 较LB 组分别提高14.12%（P＜0.05）和19.92%（P＜0.05）。 中枢免疫器官胸腺与法氏囊分别主导禽类的细胞免疫与体液免疫，脾脏是机体最大的外周免疫器官， 含有丰富的巨噬细胞和B 细胞，发挥机体重要的体液免疫功能［3］。 该试验中AM和LB 中药免疫增强剂在不同时段能不同程度提高肉仔鸡免疫器官指数， 说明日粮添加LB 粉和AM 粉对促进肉鸡早期免疫器官发育和增强机体抗病能力有效，但AM 组免疫器官指数明显优于LB 组， 表明在日粮中添加1%AM 粉对促进雏鸡免疫器官发育作用更明显，与段俊英［4］和郑志新［5］报道较为一致。

3.2 中药免疫增强剂对雏鸡NDV-Ab 效价的影响

体液免疫是机体抵抗病原微生物入侵的重要特异性免疫反应之一［6］，而NDV-Ab 效价的高低是直接反映雏鸡机体体液免疫状态的指标之一［7］。 该试验结果显示，LB 组和AM 组ND-Ab 效价随雏鸡日龄增加而增加， 但提高的比例随日龄增加而降低，28 日龄处于高水平状态，在35 日龄时试验组NDV-Ab 效价较CG 组无显著差异（P>0.05）， 说明在日粮中添加LB 和AM 对促进肉仔鸡早期体液免疫功效和提高NDV-Ab 效价水平有重要作用，但当机体抗体水平达到一定高度或免疫器官逐渐发育成熟后，其对抗体生成无显著提高作用，且该试验中AM 组NDV-Ab 效价水平一直高于LB 组， 说明AM 在早期促进肉仔鸡抗体生成效果更好，这对指导肉鸡生产具有一定参考价值。

3.3 中药免疫增强剂对雏鸡血清免疫指标的影响

机体对抗原物质免疫应答主要是通过T、B 淋巴细胞分别介导的细胞和体液免疫完成［8］。 血清中IgG 和IgM 是动物机体体液免疫检测的主要指标［9］，也是疫苗免疫后监测的主要抗体，两者均具有抗菌抗病毒和中和毒素作用。 由该试验结果可见，在免疫前期（14 日龄时），IgM 在机体免疫中起主要作用，LB 和AM 组IgM 较CG 组分别提高12.12%（P＜0.05）和15.15%（P＜0.05），而在免疫后期（28 日龄时），IgG 起主要作用。 LB 和AM 组较CG 组分别提高11.32%（P＜0.05） 和14.15%（P＜0.05）， 提示日粮添加LB 和AM 对增强B 细胞功效，提高雏鸡机体免疫球蛋白含量具有重要作用。

4 结论

日粮添加1%LB 粉或1%AM 粉可有效促进AA 肉仔鸡主要免疫器官发育，提高主要免疫器官指数、NDV-Ab 效价、血清IgG 和IgM 含量，提升雏鸡体液免疫功效，添加1%AM 粉效果更佳。