五倍子单宁酸对1～21 日龄黄羽肉鸡生长性能、免疫及抗氧化功能的影响

2022-05-16童玉鑫吴淑琴李顺路曾兴有郭思言郭娉婷王长康

中国畜牧杂志 2022年5期

童玉鑫，吴淑琴，李顺路，曾兴有，郭思言，郭娉婷*，王长康*

（1.福建农林大学动物科学学院（蜂学学院），福建福州 350002；2.福建省华龙集团饲料有限公司，福建福州 350003）

自2020 年7 月1 日起，我国已全面禁止在畜禽生产中添加促生长类药物饲料添加剂。因此，如何通过其他途径来有效提高动物生产性能、增强畜禽免疫力、抵御病原入侵，进而增加养殖效益并促进我国畜牧业的可持续发展，已成为畜禽养殖业共同面临的难题。五倍子为倍蚜类昆虫在漆树科植物盐肤木、青麸杨或红麸木上形成的虫瘿，是我国特有的传统中药。水解单宁酸为五倍子的主要功能成分，具有显著的收敛效果以及抗氧化、抗炎症和改善肠道微生态环境的作用。近年来，国内外诸多研究发现，在家禽不同生长阶段饲粮中添加一定剂量的水解单宁酸，可有效提高家禽的生产性能，改善其健康状况。但HGT 在家禽饲粮中添加的最适剂量及其对家禽免疫功能和抗氧化功能的促进作用机制还有待探明。因此，本试验旨在研究日粮中添加HGT对黄羽肉鸡生长前期的生长性能、免疫以及抗氧化功能的影响，为单宁酸作为家禽饲料添加剂提供理论参考和技术支持。

1 材料与方法

1.1 试验材料 HGT 由福建丰久生物科技有限公司提供（水解单宁酸含量为50%）。

1.2 试验动物和试验设计采用单因子完全随机试验设计，选用288 只1 日龄健康、体重（34.10±0.08 ）g 的黄羽肉鸡，随机分成4 个组，每组6 个重复，每个重复12 只。对照组饲喂基础饲粮，试验组饲粮在基础饲粮中分别添加150、300、450 mg/kg HGT，现配现用，试验周期为21 d。

1.3 试验饲粮玉米-豆粕型基础饲粮根据《中国鸡饲养标准》（NY/T 33-2004）配制，试验周期为21 d。基础饲粮组成及营养成分见表1。

表1 基础饲粮组成和营养成分（风干基础）

1.4 饲养管理于福建农林大学家禽试验站进行动物饲养试验，采用笼养方式。雏鸡送进鸡舍的前一天将鸡舍温度控制在35℃左右，此后每周温度下降 2～3℃，降至22℃后温度保持恒定。每天光照23 h，自然通风，自由采食以及饮水。按照黄羽肉鸡常规免疫程序免疫，同时每日观察鸡群健康与精神状况。

1.5 测定指标和方法

1.5.1 生长性能在试验第1 天和第21 天，各组以重复为单位称重并记录体重，每天记录采食量，计算平均日增重、平均日采食量和耗料增重比。

1.5.2 免疫器官指数试验第21 天，各组以重复为单位随机选取2 只体质健康、接近该重复平均体重的黄羽肉鸡进行屠宰，宰前禁食12 h，屠宰时称取活鸡重量，并取下胸腺、脾脏和法氏囊，称取重量，计算免疫器官指数：

脾脏指数=脾脏重（g）÷活体重（g）×100%

法氏囊指数=法氏囊重（g）÷活体重（g）×100%

胸腺指数=胸腺重（g）÷活体重（g）×100%

1.5.3 血清免疫球蛋白与细胞因子肉鸡宰前进行翅静脉采血，血样充分静置后，3 000 r/min 离心10 min，收集上层血清并保存于-20℃待测。通过酶联免疫吸附试验测定血清中干扰素（IFN-）、白细胞介素1（IL-1）、白细胞介素10（IL-10）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素4（IL-4）、免疫球蛋白A（IgA）和血清免疫球蛋白M（IgM）含量，按照试剂盒（上海酶联生物科技有限公司）说明书的步骤进行测定。

1.5.4 肝脏抗氧化指标肉鸡宰后迅速将其肝脏分离，取适量肝脏样品到离心管中，保存于-80℃待测。通过酶联免疫吸附试验测定肝脏总抗氧化能力（T-AOC）活性以及谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和丙二醛（MDA)含量。按照试剂盒（上海酶联生物科技有限公司）说明书的步骤进行测定。

1.6 统计分析数据采用SPSS 25.0 进行单因素方差分析，并采用Duncan's 进行多重比较，同时进行线性和二次曲线分析，＜0.05 为差异显著，0.05 ≤＜0.10 为有差异显著趋势。

2 结果

2.1 HGT 对1～21 日龄黄羽肉鸡生长性能的影响由表2 可知，饲粮中添加150 mg/kg HGT 对黄羽肉鸡的平均日采食和平均日增重无显著影响，但可显著降低耗料增重比；添加300、450 mg/kg HGT 对21 日龄黄羽肉鸡生长性能无显著影响（＜0.05）。

表2 HGT 对1～21 日龄黄羽肉鸡生长性能的影响

2.2 HGT 对21 日龄黄羽肉鸡免疫器官指数的影响由表3 可知，饲粮中添加不同剂量的HGT 对21 日龄黄羽肉鸡的脾脏指数、胸腺指数及法氏囊指数均无显著影响。

表3 HGT 对21 日龄黄羽肉鸡免疫器官指数的影响 %

2.3 HGT 对21 日龄黄羽肉鸡血清免疫球蛋白及细胞因子的影响由表4 可知，添加HGT 可提高血清中IgM含量，且其含量随HGT 添加水平的增加呈线性和二次曲线升高（＜0.05），肉鸡血清中IFN-含量随饲粮HGT 添加水平的增加呈二次曲线降低趋势（=0.078），但饲粮中添加HGT 对血清中IL-1、IL-10、IL-4、IL-6 和IgA 含量均无显著影响。

表4 HGT 对21 日龄黄羽肉鸡免疫相关因子的影响

2.4 HGT 对21 日龄黄羽肉鸡抗氧化指标的影响由表5 可知，肝脏中GSH-Px 含量随饲粮HGT 添加水平的增加呈线性降低趋势（=0.096），但饲粮中添加HGT对肝脏SOD、T-AOC、GSH、CAT 和MDA 含量均无显著影响。

表5 HGT 对21 日龄黄羽肉鸡肝脏抗氧化功能的影响

3 讨论

3.1 饲粮中添加HGT 对21 日龄黄羽肉鸡生长性能的影响传统上，单宁被认为是单胃动物的“抗营养因子”，对采食量、营养物质的消化和生长性能都有负面作用。但近期研究表明，饲粮中添加适量的HGT 可提高饲粮适口性并增强肠道健康，从而提高家禽生产性能。Cengiz等研究发现，在日粮中添加2 000 mg/kg HGT 可显著降低肉鸡饲养前期0～21 d 的耗料增重比，对0～42 d的平均日增重、日采食量以及耗料增重比均无显著影响。Schiavone 等研究发现，在肉鸡日粮中加入栗木单宁可显著提高其平均日增重和平均日采食量，且添加2 000 mg/kg 效果最优。另有报道指出，饲粮中添加400 mg/kg HGT 可显著降低肉鸡耗料增重比，从而起到提高饲料利用效率的作用。本试验结果也表明，饲粮中添加150 mg/kg HGT（含50 %水解单宁酸）可显著降低黄羽肉鸡生长前期的耗料增重比。而HGT 可提高饲粮利用率可能是由于其收敛作用可降低肠道蠕动，增加食糜在肠道内的停留时间，从而促进肠道对营养物质的消化吸收作用，但上述可能的作用机制仍需更多试验来对其进行验证。

3.2 饲粮中添加HGT 对21 日龄黄羽肉鸡免疫器官发育的影响胸腺、脾脏和法氏囊是禽类重要的免疫器官，其脏器指数可在一定程度上反映机体生长发育状况和免疫功能强弱。胸腺和法氏囊是重要的中枢免疫器官，胸腺主要对T 淋巴细胞的发育和成熟起重要作用，其随日龄的增加逐渐增大，且于青年期发育成熟，而后随着生长逐渐萎缩。而法氏囊则是B 淋巴细胞发育和成熟的重要场所；脾脏作为外周免疫器官，是成熟淋巴细胞定居、抗原呈递以及诱发免疫应答的重要场所。陈赛娟等研究发现，饲粮中添加HGT 对獭兔脾脏指数与胸腺指数无显著影响，但在数值上均有所升高。Brenes等研究也发现，在饲粮中添加葡萄籽单宁对肉鸡免疫器官的发育无显著影响。本试验结果也表明，饲粮中添加HGT 对21 日龄黄羽肉鸡的脾脏指数、胸腺指数及法氏囊指数均无显著影响。然而，从光雷等研究发现，在饲粮中添加橡椀单宁可显著促进42 日龄肉仔鸡法氏囊的生长，而对胸腺、脾脏无显著影响。HGT 对家禽免疫器官发育的影响可能与HGT 的来源和浓度、动物种类、日龄以及健康状况等有关。因此，HGT 对家禽免疫器官发育的影响还有待进一步研究。

3.3 饲粮中添加HGT 对21 日龄黄羽肉鸡免疫相关因子分泌的影响细胞因子在调节免疫应答中发挥着重要的作用。IL-1和IFN-是由多种免疫调节细胞产生的促炎细胞因子。IL-10 是一种重要的抗炎因子，由T细胞分泌，并受免疫调节因子IL-4 调控，而IL-6 称为B 细胞分化因子，可促进免疫细胞发育，并具有炎症识别和反应能力。促炎因子（如IL-1和IFN-）可加剧炎症反应过程，而抗炎因子（如IL-10 等）则起到缓解和抑制炎症的作用。在动物遭受病原体等外界免疫应激时，细胞因子对免疫应答的响应是促炎因子和抗炎因子之间的相互博弈，是一个复杂的动态平衡过程。Matsumura 等研究发现，柿子单宁可显著降低由于分枝杆菌感染的小鼠骨髓巨噬细胞（BMDMS）中过高的炎症因子IL-1和肿瘤坏死因子-（TNF-）的mRNA 表达量，进而有效缓解炎症反应。本试验结果也表明，21 日龄时，肉鸡血清中的IFN-含量随HGT剂量的增加呈二次曲线降低趋势。而其他学者研究表明，在肉鸡饲粮中添加500 mg/kg HGT，对脾脏中IL-1、IL-4 和IL-10 的mRNA 表达量无显著影响，但会显著增加IFN-的mRNA 表达量，从而提高了机体的免疫应答。这可能由于HGT 具有刺激动物免疫功能的作用，并与添加剂量密切相关。

免疫球蛋白可特异性结合抗原，并通过沉淀和吞噬作用将其清除。不同种类家畜的免疫球蛋白存在一定差异，家禽免疫球蛋白主要有IgA、IgM 和IgG。从光雷等研究发现，饲粮中添加橡椀单宁对肉鸡血清中IgA 和IgM 含量无显著影响。但唐青松等研究发现，饲粮中添加100 mg/kg 坚木单宁可显著提高肉鸡血清IgA 和IgM 含量，从而提高机体免疫力和抗病力。解湧芳等研究表明，在饲粮中添加柠条单宁，绵羊血清中IgA、IgM 和IgG 含量均高于对照组。本研究结果也表明，HGT 可显著提高21 日龄血清IgM 含量，以添加量300 mg/kg 为最适，但对血清lgA 含量无显著影响。血清中免疫球蛋白水平的高低可在一定程度反映机体的免疫能力。综合分析，HGT 可能在动物正常生长状态下具有提高免疫功能的作用。

3.4 饲粮中添加HGT 对21 日龄黄羽肉鸡抗氧化功能的影响机体在正常情况下，自由基的产生和清除是动态平衡状态。但当自由基在细胞和组织中不断蓄积、无法消除时，这个平衡状态就会被打破，从而造成氧化损伤。机体完整的抗氧化体系由酶促系统和非酶促系统构成。非酶促系统主要包括维生素C、维生素E和GSH 等还原性物质，其可直接与自由基发生氧化还原反应，将其清除；酶促系统主要包括SOD、GSHPx 和CAT 等抗氧化酶，它们之间相互协调可将自由基分解为对机体无害的物质。MDA 作为脂质过氧化的终产物，可间接反映出组织的氧化损伤程度。T-AOC则是衡量抗氧化的综合指标。吴大伟等研究发现，饲粮中添加HGT 对黄羽肉鸡肝脏SOD、GSH-Px、CAT 活性及MDA 含量均无明显影响，不能起到有效的抗氧化作用。本研究结果表明，饲粮中添加HGT 对黄羽肉鸡肝脏T-AOC 活性及肝脏SOD、GSH、CAT、MDA 含量无显著影响，但肝脏GSH-Px 含量呈线性降低趋势。也有学者研究发现，在饲粮中添加葡萄籽单宁可显著提高白羽肉鸡肝脏中的GSH 含量，并降低肌肉中的MDA 含量，从而起到抗氧化的作用。上述研究结果的不同可能与不同肉鸡品种对氧化应激的抵抗调节能力不同以及HGT 的来源不同有关。