不同乳酸菌饲喂方式对肉鸡生长性能、免疫机能的影响

程 鹏，张静博，赵龙妹，曹平华，马彦博，李 旺

（河南科技大学动物科技学院，河南洛阳 471023）

肉鸡是养殖业的重要组成部分，鸡肉也是人们肉食品的重要来源。近年来研究发现，益生菌能有效调节家禽胃肠道的微生态平衡，增强机体的免疫和抗病能力，提高生产性能。乳酸菌作为应用最早、最广泛的益生菌，可大量定植于消化道黏膜表面，不仅可以调控肠道内环境、促进肠黏膜发育、提高机体免疫力，而且能促进动物健康生长、防止疾病发生。研究发现，乳酸菌不仅可以提高肉鸡生产性能，还能稳定肠道微生态，通过促进有益菌的繁殖、生产抑菌生物素，抑制致病菌的增殖，降低肉雏鸡的死亡率，同时发挥更好的环保效应。给肉仔鸡饲喂乳酸菌能够提高消化道免疫系统的功能，有效提高抗体的表达量，增强免疫细胞的活性。

目前，在生产中乳酸菌大多以固体制剂拌料方式饲喂肉鸡，由于大多数乳酸菌不耐热，干燥工艺多为真空冷冻干燥，成本过高，在动物养殖上使用不经济。使用乳酸菌菌液直接饲喂动物，则避免了干燥的环节，可降低使用成本。如何在肉鸡的饲养中使用乳酸菌液，不同饲喂方式是否影响肉鸡饲养，尚未有报道。本试验自制乳酸菌菌液，研究不同乳酸菌饲喂方式对肉鸡饲养效果的影响，为乳酸菌液体制剂在肉鸡规模化生产中的应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 植物乳杆菌（）为本实验室从苜蓿青贮中筛选、鉴定并保存菌株，试验前优化发酵培养，活菌数为4×10CFU/mL。试验饲料购自洛阳某饲料厂，日粮组成及营养成分见表1。

表1 基础饲粮组成及营养成分（风干基础）

1.2 试验设计 选用192 只1 日龄、体况相近的爱拔益加（AA）肉仔鸡（公母各半）。采用分笼饲养，将试验肉仔鸡，随机分为4 组，每组6 个重复，每个重复8只鸡。采用14L:10D 的光照机制。试验鸡自由采食和饮水。用加热管进行采暖，随时观察鸡舍温度与湿度，维持肉鸡适宜生长环境。试验期为42 d，全程无免疫。

对照组饲喂基础日粮，拌料组在饲料中添加乳酸菌菌液，灌服组口腔灌服乳酸菌菌液，饮水组饮水中添加乳酸菌菌液，为保证本试验不同饲喂方式下肉鸡日采食乳酸菌活菌数相等（日均摄入量为8×10CFU）。根据《商品肉鸡生产技术规程》（GB/T 19664-2005）及类似试验参考值确定AA 肉鸡平均日采食量（1～21日龄平均采食量48 g，22～42 日龄平均采食量156 g）及肉鸡在饲养过程中饮水为采食量3 倍的原则，通过计算确定1～21 日龄及22～42 日龄不同饲喂方式乳酸菌添加量，如表2 所示。

表2 试验设计及乳酸菌菌液添加量

1.3 指标及测定方法

1.3.1 生产性能 试验期间每日检查鸡只的健康及精神状况；以每个重复为单位，每周记录每个重复投料量和剩料量并计算平均日采食量和耗料增重比；分别于第21 和42 日龄08:00 饲喂前（断食12 h 后），以重复为单位对鸡只进行空腹称重记录，计算平均日增重。

1.3.2 免疫器官指数 在第21、42 日龄每个重复组中随机抓取1 只精神状态良好、健康的肉鸡空腹称重后进行屠宰采样，分别摘取两侧胸腺、脾脏和法氏囊，剔除附着的脂肪及组织后，用电子天平称重，计算免疫器官指数。

脾脏指数=脾脏重（g）/活体重（kg）

法氏囊指数=法氏囊重（g）/活体重（kg）

胸腺指数=胸腺重（g）/活体重（kg）

1.3.3 血清免疫指标 对第21、42 日龄试验鸡进行翅静脉采血。采血前，断食不断水12 h。血样存于采血管中静置至血清析出，经离心后抽取全部血清于离心管中，存放于-20℃冰箱中冷冻保存，随后用ELISA 试剂盒（上海钰博生物有限公司）测定血清中肿瘤坏死因子（TNF-）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白A（IgA）、白细胞介素1（IL-1）、白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素6（IL-6）、免疫因子含量。

1.4 统计分析 利用SPSS 20.0 软件的一般线性模型对生长性能、免疫器官指数、血清免疫指标数据进行方差分析（ANOVA）和多重比较（Duncan's），结果以平均值±标准差表示，以＜0.05 表示差异显著。

2 结果

2.1 不同乳酸菌饲喂方式对肉鸡生长能的影响 由表3可知，在1～21 日龄，饮水组平均日采食量低于对照组（＜0.05）；不同饲喂方式之间平均日采食量、平均日增重无显著差异；拌料组、饮水组耗料增重比低于对照组、灌服组（＜0.05）。在22～42 日龄，不同处理间平均日采食量无显著差异；不同乳酸菌饲喂方式均能提高平均日增重（＜0.05），降低耗料增重比（＜0.05），但试验组间无显著差异。

表3 不同乳酸菌饲喂方式对肉鸡生长性能的影响

2.2 不同乳酸菌饲喂方式对肉鸡免疫器官的影响 由表4 可知，在1～21 日龄，拌料组、饮水组胸腺指数高于对照组及灌服组（＜0.05）；各处理间脾脏指数、法氏囊指数无显著差异；但不同乳酸菌饲喂方式下肉鸡脾脏指数、法氏囊指数均较对照组有不同增加（＞0.05）。在22～42 日龄时，灌服组胸腺指数高于对照组及拌料组（＜0.05），与饮水组胸腺指数无显著差异；各试验组脾脏指数、法氏囊指数较对照组均有增加（＞0.05），但不同处理组间无显著差异。

表4 不同乳酸菌饲喂方式对肉鸡免疫器官的影响 g/kg

2.3 不同乳酸菌饲喂方式对肉鸡血清免疫指标的影响由表5 可知，在1～21 日龄时，饮水组IgA 含量高于其他处理组（＜0.05），灌服组IgA 含量高于对照组（＜0.05），与拌料组无显著差异。拌料组IgG 含量高于对照组（＜0.05），二者与灌服组、饮水组均无显著差异。试验组IL-6 含量均高于对照组（＜0.05），但不同乳酸菌饲喂方式间无显著差异。不同饲喂方式下TNF-、IgM、IL-1、IL-2 含量较对照组均有不同程度提高（＞0.05）。

表5 不同乳酸菌饲喂方式对肉鸡血清免疫指标的影响

在22～42 日龄，饮水组IgA 含量高于其他试验组（＜0.05），灌服组IgA 含量高于对照组（＜0.05），但与拌料组无显著差异。灌服组与饮水组IL-1 含量高于对照组（＜0.05），但不同饲喂方式间IL-1 含量无显著差异。灌服组IL-2 含量高于对照组（＜0.05），不同饲喂方式间无显著差异。试验组TNF-、IgG、IgM、IL-6 含量较对照组均有不同程度提高（＞0.05）。

3 讨 论

3.1 不同乳酸菌饲喂方式对肉鸡生长性能的影响 平均日增重、耗料增重比等是衡量肉鸡的生长性能的主要指标。乳酸菌对肠道内有害菌具有拮抗作用，乳酸菌定植于肠道中能够产生多种抑菌物质，可以抑制或减少有害菌的繁殖，以达到替代抗生素、提高动物的生长性能和改善饲养环境的目的；还能降解大部分抗营养因子，提高饲料的消化率和利用率，促进骨骼发育，有效降低耗料增重比。本试验验证了这一结论，且发现1～21 日龄时以拌料与饮水方式饲喂乳酸菌，耗料增重比显著低于口腔灌服的饲喂方式。

大多数研究认为，乳酸菌可以有效提高肉鸡平均日增重及平均采食量，降低耗料增重比。但也有研究发现，通过灌喂乳酸菌可以显著降低肉鸡采食量，提高日增重。结果不一致的原因可能是不同菌种对日粮养分利用率产生影响不同。研究发现，乳酸菌不同菌株在肠道的繁殖能力强弱、能否产生活性物质、有机酸等特性均会对营养物质在动物体内的消化产生影响。而养分利用率的提高可以降低肉鸡采食量。但不同饲喂方式是否会对平均日采食量产生影响未有报道。本研究发现，与对照组相比，乳酸菌菌液以饮水的方式饲喂肉鸡会降低肉鸡平均采食量，但不同饲喂方式间无显著差异。徐子涵等研究发现，乳酸菌液体制剂组肉仔鸡的1～14 日龄生长性能显著高于抗生素组和乳酸菌固体制剂组，表明饲喂乳酸菌液体制剂更适合运用于生产中。且与固体制剂相比，菌液价格低廉，经济效益更高，应用潜力巨大。本试验虽未与固体制剂相比较，但证实了饲喂乳酸菌液可显著改善肉鸡生长性能，且以饮水、拌料方式饲喂乳酸菌菌液可显著降低耗料增重比，提高肉鸡生长性能，可为乳酸菌菌液在生产中进一步应用提供依据。

3.2 不同乳酸菌饲喂方式对肉鸡免疫器官的影响 胸腺、脾脏和法氏囊是家禽体液免疫的主要场所，免疫器官相对重量提高，一定程度上表明机体免疫系统成熟和免疫功能增强。付丽等研究发现，将适量的的乳酸菌培养物与基础日粮混合饲喂给肉鸡，可一定程度提高肉鸡饲料利用率、促进免疫器官的生长发育，进而增强机体的免疫功能。石峰等研究发现，饮水中添加乳酸菌组胸腺指数显著高于照组，表明乳酸菌可以通过提高免疫器官指数从而增强外周和体液的免疫。本研究发现，拌料组能显著提高1～21 日龄肉鸡胸腺指数，灌服组能提高22～42 日龄肉鸡胸腺指数，且与饮水组无显著差异。产生以上差异推测可能是试验前期雏鸡较为敏感，每日口腔灌服会导致肉鸡应激，对肉鸡生长性能及免疫机能造成影响；试验后期肉鸡适应口腔灌服后，由于口腔灌服可减少菌液浪费，更能充分发挥乳酸菌菌液效果，但每日灌服人工消耗大，不适宜大规模养殖，而在水中加入乳酸菌菌液饲喂肉鸡，可使菌液混合均匀，保证肉鸡每日摄取菌液量恒定，减少浪费，节约成本，整个饲养过程可更稳定，通过在动物机体内定植产生益生作用，从而提高营养物质的吸收效率进而促进免疫器官的发育。

3.3 不同乳酸菌饲喂方式对肉鸡血清免疫指标的影响TNF-、IgA、IgG、IgM、IL-1、IL-2 和IL-6 是机体抗感染的重要物质，其含量升高，则免疫增强，它们是构成机体体液免疫的主要物质，免疫因子随着血液循环传递扩散并发挥不同的免疫作用，这些物质大量储存在血液、淋巴液、组织液以及黏膜分泌物中，其含量高低可以直接反映机体免疫力。

张彩凤等将乳酸菌通过拌料形式饲喂给肉鸡可显著提高其血清免疫因子含量。尹艳军等研究发现，在饲料中添加1%、2% 的乳酸冻干菌能不同程度促进肉鸡生长及免疫器官的生长发育，提高机体的细胞免疫和体液免疫。本试验各免疫因子均高于或显著高于对照组，与陈西风等研究基本一致。关于乳酸菌对免疫系统的调节机制至今仍未有明确的报道，但因乳酸菌菌株不同引起的免疫反应会有所差异。本研究发现，与其他饲喂方式相比，饮水组可显著提升IgA 含量，表明不同饲喂方式也可引起免疫反应的差异。本研究发现，乳酸菌液由于保留了活菌和代谢活性物质，不同乳酸菌饲喂方式较对照组均提升了IgG、IL-6、IL-1、IL-2 含量，但不同饲喂方式间无显著差异，而饮水饲喂可显著提高IgA 含量。IgA 对于保护肠道、呼吸道、泌尿生殖道和眼睛抵抗微生物入侵具有重要作用，在免疫应答过程中起核心作用，进一步证明饮水饲喂乳酸菌可以通过促进肠道SIgA 的正常分泌和T 细胞的增殖，进而提高血清中IgA 含量，进而增强动物机体的免疫功能。

4 结 论

本研究结果表明，日粮添加乳酸菌菌液可提高肉鸡生产性能及免疫机能，但不同乳酸菌饲喂方式间存在差异，其中拌料方式可提高1～21 日龄胸腺指数并降低耗料增重比，灌服方式可提高22～42 日龄胸腺指数，饮水饲喂乳酸菌可降低耗料增重比并稳定提高胸腺指数及IgA 含量。建议在肉鸡生产中以饮水方式饲喂乳酸菌菌液。