3种活血化瘀类中药注射剂对凝血功能检验的体外干扰研究

马子坤，韩 冉，王 琦，吴 楠，徐 杰，白 雪

干扰是影响临床医学检验结果准确性的重要原因之一，所谓干扰即在测定分析物浓度或活性时，在外界物体的干扰下使得检测结果出现增高(正干扰)或下降(负干扰)的现象，对医学检验结果的准确性造成影响[1]。Caraway[2]研究指出，临床医学检验中多种成分的检测结果均可能会受到治疗性药物的影响，且随着研究的深入，临床上也逐渐认识到药物对检验结果造成的干扰较为常见，而这类干扰情况的出现极易对检验结果的准确性造成影响，甚至会对临床诊疗方案的制定造成影响。当前，临床上对于西药干扰检验结果的研究分析相对较多，并且已经有相应的软件、专著等进行西药干扰性能评价与查询[3]。但是临床上对于中药干扰检验结果的研究相对较少。近年来，随着中医学的不断发展，中药制剂在临床上的应用范围也逐渐增大，这也使得越来越多的专家学者开始关注中药对检验结果的干扰性能评价。本研究以当前临床上应用范围比较广泛的灯盏细辛注射液、银杏酮酯注射液、舒血宁注射液3种活血化瘀类中药注射剂为研究对象，分析此3种中药注射剂对临床凝血功能项目检测的干扰情况，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年1月—2019年12月在北京中医药大学东方医院进行健康体检的健康人群60名作为研究对象。所有研究对象均未曾服用药物，均不吸烟，体检前3 d均未饮酒，均无精神疾病、意识障碍与认知障碍，均知情同意并签署知情同意书。所有研究对象均静脉采血，提取血浆混合物作为基础样本备用。

1.2 实验药物 对照组以缓冲液作为空白干扰剂。干扰组干扰药物包括灯盏细辛注射液、银杏酮酯注射液、舒血宁注射液3种活血化瘀类中药注射剂，其中灯盏细辛由云南生物谷药业股份有限公司提供，批准文号：国药准字Z53021620；银杏酮酯由上海上药杏灵科技药业股份有限公司提供，批准文号：国药准字Z20000050；舒血宁注射液由神威药业集团有限公司提供，批准文号：国药准字Z13020796。

1.3 仪器与试剂 全自动血液凝固分析仪(日本Sysmex公司生产，型号：CS-5100)，凝血酶原时间(PT)测定试剂(批号：546940)，SIMENS Thrombin 血浆纤维蛋白原(FIB)测定试剂(批号：547283)，SIMENSTest Thrombin 凝血酶时间(TT)测定试剂(批号：46289)，SIMENS CaCl2活化部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂(批号：539757)。

1.4 方法

1.4.1 干扰筛选的配对差异实验 利用高浓度干扰样品进行一系列能鉴别有可能引起干扰的物质的试验。选取分析物浓度，建立有显著性差别(dmax)的标准，明确样本重复次数，制备基础样本池及储存溶液、试验样本；将储存溶液加至容量瓶体积的1/20，然后以基础样本加至刻度，混匀；按照同样的方式进行对照样本操作；然后于同一批测定中队实验(T)及对照样品(C)进行交替分析，并对分析结果进行记录。评价相对于未加干扰物的对照混合标本(对照组)的偏倚。

1.4.2 剂量效应实验 确定干扰物浓度和干扰程度之间的关系。对可疑干扰物质的浓度边界进行明确，即最高浓度值和最低浓度值。然后建立临床上显著性差别的标准、明确各浓度测定次数(通常设置为3次)，并分别制备高浓度和低浓度样本池。然后制备终值样本池，在容量瓶中分别加入相同剂量的高值及低值样本，并混匀。然后按照相同的操作方法，分别制备75%样本池和25%样本池及混匀高、低值样本的容量瓶。于同批次按照浓度从低到高的顺序对所有标本进行检测，然后再以从高到低的顺序进行标本检测，为减少误差，最后对低值样本池分析物平均浓度进行计算，以其他测量结果减去该值，以表格形式对所有分析结果进行呈现。

2 结 果

2.1 确定配对差异实验的重复次数 根据检测仪器室内质量控制结果对仪器精密度进行分析，基础样本检测取10次，计算各检测项目的保准差(SD)，获取各项目的临床意义的差别标准(max)，计算dmax/SD比值，查表1得到试验重测次数。

表1 dmax/SD与重测次数对应情况分析

2.2 配对差异实验结果

2.2.1 灯盏细辛注射液对凝血功能检测项目的干扰 灯盏细辛注射液对凝血功能各指标均无明显干扰。详见表2。

表2 灯盏细辛注射液对凝血功能检测项目的干扰

2.2.2 银杏酮酯注射液对凝血功能检测项目的干扰 银杏酮酯注射液对APTT有负干扰，对其他凝血功能指标无明显干扰。详见表3。

表3 银杏酮酯注射液对凝血功能检测项目的干扰

2.2.3 舒血宁注射液对凝血功能检测项目的干扰 舒血宁注射液对凝血功能各指标均存在明显干扰。详见表4。

表4 舒血宁注射液对凝血功能检测项目的干扰

3 讨 论

药物本身及药物代谢产物均可能会影响检验样本的原有基质，从而干扰检验结果。国外研究协会颁布的EP7-A2文件[4]让干扰研究有据可循，且多数学者均在研究中证实了药物及代谢产物会对检验项目造成干扰这一论证。Munzenberger等[5]在研究中指出，病人服用一种药物时，受药物干扰的试验占7.0%，服用两种药物时占16.7%，服用3种或4种药物时则高达到66.7%。Fu等[6]在研究中指出，黄芪等中药能够对机体免疫因子测定造成干扰。Dasgupta等[7]的研究结果显示，丹参会干扰地高辛检测；Flower等[8]在研究中指出，当归、知母、黄柏等药物可能会影响细菌培养结果。因此，临床上已将干扰列为影响检验结果准确性的一项常见影响因素。但是当前对于中药干扰检验结果的分析则相对较少，近年来，随着中药药理研究的深入，中药注射剂在临床上广泛应用，银杏酮酯对APTT有负干扰，但干扰极小不易引起临床检测结果的偏差也呈现出明显增大的趋势[9]。中药注射剂以中医理论为前提，以现代药剂学方式从药物中提取有效物质，支撑灭菌制剂，以供临床注射使用。中药注射剂具有起效快、疗效显著等特点，故而逐渐在临床上得到推广与使用。其中活血化瘀类中药注射剂因具有疏通血脉、去除血瘀的作用，故而在临床上的应用范围非常广，且多数病人在输注中药注射剂的过程中或输注后通常需行凝血功能检查[10]。因此，开展对活血化瘀中药注射剂对凝血功能检测的干扰分析显得尤为必要。

本次研究选用灯盏细辛注射液、银杏酮酯注射液、舒血宁注射液3种临床上较为常用的活血化瘀类中药注射剂为研究药物，并分析了3种药物对临床凝血功能项目检测的干扰情况，结果显示，灯盏细辛对凝血项目均无明显干扰，银杏酮酯对APTT有负干扰，但干扰极小不易引起临床检测结果的偏差[11]；舒血宁注射液对凝血项目PT、APTT、FIB、TT均存在明显干扰。

综上所述，检验结果是否准确对于临床诊疗方案的制定与开展有着极为重要的影响，临床上须加强药物对检验结果干扰研究的重视。当前，西医干扰检验结果的相关分析已经有大量研究，并获取了一定成果。但是对于中药制剂对检验结果干扰的研究仍存在较大局限，多以部分药物生化项目的分析为主。当前临床上尚未明确活血化瘀类中药注射剂对凝血项目造成干扰的具体原理。且本次研究中也未进一步明确药物对干扰的剂量效应，因此，临床上尚需开展更为深入的研究，以进一步探究中药注射液对于检验项目的干扰，甚至可通过剂量效应试验确定药物对检验结果干扰的影响程度，查找消除干扰的方式，提高检验的准确度。