稀释对胱抑素C标准物质ERM-DA471互换性的影响*

李 敏，邵 燕，孙江漫，于洪远△，陈宝荣

1.北京航天总医院检验科，北京 100076；2.北京金域医学检验实验室有限公司，北京 100015

胱抑素C是一种比血肌酐更敏感的早期肾损伤标志物，其也能更准确地反映内源性肾小球滤过率[1]。即往由于没有统一的胱抑素C标准物质，导致不同系统之间检测结果的差异较大。2010年欧洲标准物质ERM-DA471的推出[2]，有效保障了胱抑素C检测结果的一致性,该标准物质是通过分离混合血清中的干扰物，添加重组胱抑素C制备而来[3]。目前，关于ERM-DA471互换性的研究收集的单人份血清标本水平范围未能覆盖ERM-DA471，可能对互换性结果的判断有影响，同时，研究中也未将ERM-DA471稀释成系列水平后进行互换性评价[4]。因此，本研究重点针对上述两个不足之处进行了相关探讨，现将结果报道如下。

1 材料与方法

1.1标本来源 收集北京航天总医院2021年5月10日至16日门诊、住院患者胱抑素C水平为0.5～8.0 mg/L的42份无溶血、无乳糜的血清标本，血清标本水平覆盖标准物质ERM-DA471的水平，每份血清标本分为两份，置于-80 ℃冰箱保存。有证标准物质为ERM-DA471/国际临床化学和检验医学联合会(IFCC)。

1.2仪器与试剂 日立7170A全自动生化分析仪、LA120S型电子天平、Eppendorf reference移液器。九强生物技术股份有限公司(公司A)、迈克生物股份有限公司(公司B)、迈瑞生物医疗电子股份有限公司(公司C)、罗氏公司(公司D)、中元生物技术有限公司(公司E)、积水医疗科技有限公司(公司F)、德赛公司(公司G)、瑞源生物科技有限公司(公司H)、景源生物科技股份有限公司(公司I)生产的胱抑素C检测试剂及其配套校准品和质控品。

1.3方法 按照说明书将标准物质ERM-DA471进行溶解，得到水平为5.48 mg/L的原液(记为C5)，再采用称重法将原液稀释为4.0、2.0、1.0、0.5 mg/L的系列水平，按照水平由低到高分别记为C1～C4[5]。在日立7170A全自动生化分析仪上建立上述9家公司的检测系统(系统A～I)，所有参数均由相应公司提供。使用对应的校准品对系统进行校准，质控在控后方可进行检测。将5个系列水平的标准物质ERM-DA471穿插在42份血清标本中排序检测，标本分别按照先奇后偶、倒序、先偶后奇的顺序检测3次，结果取平均值。根据EP14-A3标准评价系列水平标准物质ERM-DA471的互换性[6]。

1.4统计学处理 采用SPSS22.0软件进行数据分析。将9个检测系统进行两两组合，检测结果构建回归方程，计算R2。观察5个系列水平标准物质ERM-DA471的检测结果是否落在预测值的95%CI内，以此来判断检测结果是否具有互换性。

2 结 果

2.1血清标本和待评价标准物质ERM-DA471的检测结果 将9个检测系统两两组合，将42份血清标本的检测结果进行回归分析，回归方程、R2、斜率的95%CI见表1。36种检测系统组合对应的斜率范围为0.782～1.125，截距范围为-0.216～0.141，R2范围为0.991～0.998。各检测系统对5个系列水平标准物质ERM-DA471的检测结果见表2。

表1 36种检测系统组合检测结果的线性回归分析

表2 9个检测系统检测5个系列水平标准物质ERM-DA471的结果(mg/L)

2.2互换性评价 以检测系统组合中1个检测系统对5个系列水平标准物质ERM-DA471的检测结果为X，得到预测值Y及其95%CI，观察另一个系统的检测结果是否落在预测值Y的95%CI内[6]。C5的检测结果具有互换性的检测系统组合占41.7%(15/36)，C1～C4与C5互换性结果一致的检测系统组合占16.7%(6/36)；C1～C4的检测结果具有互换性的检测系统组合分别占69.4%(25/36)、69.4%(25/36)、80.6%(29/36)、44.4%(16/36)，见表3。

表3 5个系列水平标准物质ERM-DA471在不同检测系统间的互换性评价

续表3 5个系列水平标准物质ERM-DA471在不同检测系统间的互换性评价

3 讨 论

胱抑素C标准物质ERM-DA471的出现，有效促进了检测系统检测结果的一致化，其技术报告上显示该标准物质基质和新鲜标本不同，因此在临床应用中应评估其互换性。虽然ERM-DA471能溯源至Si单位，但其水平远高于人体内胱抑素C的生理水平。目前，市场占有率较高的试剂盒其校准品均为多点校准，因此厂家在进行溯源时需要对ERM-DA471进行稀释。本研究结果表明，ERM-DA471在36种检测系统组合中的互换性并不理想，稀释后的各水平ERM-DA471在大多数检测系统组合间的互换性发生改变。分析其原因可能有：(1)EP14-A3评价ERM-DA471互换性的缺陷在于两个系统的相关性越好，95%CI越窄，ERM-DA471越不可能有互换性[6-8]，最终造成ERM-DA471在大多数检测系统组合间缺乏互换性。(2)对ERM-DA471进行稀释时，水平越低，操作中引入的误差对稀释结果影响越大，可能造成稀释后的实际水平与靶值的偏倚较大，研究结果表现为水平越低，检测偏倚越大。(3)标准物质在不同检测系统间的结果是否具有互换性取决于两个方面，即材料与新鲜标本的接近程度及方法的特异性。稀释的过程改变了ERM-DA471原有的基质状态，因此在临床应用过程中不能以原水平ERM-DA471的互换性结果来笼统代表稀释后各水平ERM-DA471的互换性结果。

本研究通过评估原水平和稀释后不同水平ERM-DA471在36个检测系统组合间的

互换性，发现其互换性结果并不理想，且稀释后的ERM-DA471在大部分检测系统组合间的互换性发生改变，厂家在使用其进行量值传递的过程中需注意稀释对ERM-DA471互换性结果的影响。由于本研究仅使用EP14-A3对标准物质ERM-DA471的互换性进行评估，可能造成评估结果的片面性，今后的研究中将结合IFCC提出的互换性评估方案[9]，使标准物质的互换性评估更加合理、可靠。