甲基化PAX1在宫颈癌筛查中的临床应用综述

芦晓莉 王亚美 雷林

【中图分类号】R711.74 【文献标识码】A 【文章编号】1673-9026（2022）11--01

一、宫颈脱落细胞PAX1基因甲基化检测：

PAX1基因是关键肿瘤的抑制基因，调控细胞分化成熟，基因异常甲基化与肿瘤的发生、发展、细胞癌变有着密切的关系。在宫颈细胞中，基因PAX1启动子被甲基化后会因此造成该基因沉默或失活，因而丧失抑制肿瘤生长的功能，异常的细胞就失去控制，从而导致宫颈癌变，这一机制已被国际广泛认可和研究，因此基因PAX1甲基化程度可作为检测宫颈细胞是否正常，以及宫颈癌发生、发展的动态指标。

二、宫颈癌的发病机制：

宫颈癌目前仍然是全球女性的第四大常见肿瘤。据报道，我国每年约有新发病例13万，约占世界宫颈癌新发病例总数的1/4，现已明确人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染尤其是高危型HPV（16-18）持续感染是诱发宫颈癌的明确病因之一，其致癌作用与HPV DNA和宿主DNA的整合有关。90%的单纯HPV感染者可在2年内自然转阴，尤其是<30岁女性。从感染到宫颈癌变，一般要5～20年。

宫颈癌是威胁女性健康的第二大妇科恶性肿瘤，并呈现年轻化趋势。

因高危型HPV病毒持续感染引起由癌前病变逐步发展而来病理类型分为：

鳞癌（80%）  腺癌（15-20%）  鳞腺癌

危险因素：性生活过早、多个性伴侣、早孕多产或人流、吸烟、炎症反复刺激，等。

早期宫颈癌常无明显症状和体征，宫颈可光滑或难与宫颈柱状上皮异位区别。颈管型患者因宫颈外观正常易漏诊或误诊。随病变发展，可出现以下表现：

1.症状

（1）阴道流血早期多为接触性出血：中晚期为不规则阴道流血。出血量根据病灶大小、侵及间质内血管情况而不同，若侵袭大血管可引起大出血。年轻患者也可表现为经期延长、经量增多：老年患者常为绝经后不规则阴道流血。一般外生型较早出现阴道出血症状，出血量多;内生型较晚出现该症状。

（2）阴道排液多数患者有阴道排液，液体为白色或血性可稀薄如水样或米泔状，或有腥臭。晚期患者因癌组织坏死伴感染。可有大量米汤样或脓性亚臭白带。

（3）晚期症状根据癌灶累及范围出现不同的继发性症状。如尿频、尿急、便秘、下肢肿痛等：癌肿乐迫或累及输尿管时，可引起输尿管梗阻、肾盂积水及尿毒症;晚期可有贫血、恶病质等全身衰竭症状。

三、宫颈癌筛查现状：

宫颈上皮的癌变过程包括许多基因和表观基因的攻变，DNA甲基化是最常见的表观遗传学改变，常发生于肿瘤抑制基因的启动子区域，造成该基因的转录失活，从而促使肿瘤的发生。本研究旨在探讨宫颈癌基因甲基化检测、高危型HPV检测对宫颈癌筛查的分流作用，甲基化选取的是PAX1.

宫颈癌筛查的手段包括：应用了几十年的細胞学，这是传统的筛查手段，但是它存在敏感性不足。另外，HPV是宫颈癌、宫颈病变的最重要的原因之一，因此，检查HPV是目前筛查宫颈癌重要的手段，但是HPV检查特异性差，特别是一过性HPV感染，对宫颈病变的发生影响有限。

常规检查的弊端：

（1）TCT：漏诊率过高，检出率降低，宫颈腺癌TCT检测呈假阴 性。

（2）HPV：灵敏度高，感染非常普遍，40%的女性在一生当中的某个时期都可能感染过HPV病毒，但随着自身免疫力增强，病毒可以自行消除，发现阳性不一定有问题，增加患者心理负担。

（3）活检：造成创伤，本身感染HPV患者再活检，增加感染风险。

宫颈脱落细胞PAX1基因甲基化检测优势：

（1）增加检出率，减少漏诊率。

（2）减少检查频率，降低感染风险。

（3）无创伤，精准结果，降低误诊率。

（4）宫颈病变治疗的

常规检查像肿瘤的诊断和治疗即将进入或者逐渐进入分子诊断和分子治疗的时代，而宫颈病变的筛查也需要跟随新技术——生物技术的发展筛选新的分子标志物。

四、宫颈癌与DNA的甲基化

基因的甲基化可以调控基因的活性。根据国内外的研究，几乎所有癌症都与基因甲基化异常有关，也就是说DNA甲基化是癌症的必经之路。因此研究宫颈病变的发生发展就应该重视DNA甲基化的应用。

宫颈癌发生的机制与甲基化诊断性能，通过临床应用发现，HPV感染到正常的宫颈上皮细胞可以引起DNA甲基化继而引起宫颈的病变甚至发展为宫颈癌，那么这是有高度的相关性。

在宫颈病变发展的进程中，宫颈上皮细胞从正常到异常的增生、到癌前病变、到宫颈癌的发生，需要数年甚至数十年发展的过程，在这个过程中，研究发现对于低级别宫颈癌前病变短期内进展为癌的风险比较低，如果是宫颈高级别癌前病变，短期内进展为宫颈癌的风险就比较高，发现在这个风险高低的过程中，伴随DNA甲基化是密切高度相关，其中有个关键基因是PAX1基因。①

五、PAX1基因甲基化检测的现状

2019年至今，我院共检测病例为89例，年龄在28-55岁之间。其中，宫颈癌术后8例、CIN病变6例、常规检查75例。对照的方法是组织病理学金标准。PAX1基因甲基化检测是基于亚洲人群开发的产品，是根据以中国人为研究对象的临床数据的研究结果。 甲基化目前来说解决临床问题如下：

（1）HPV感染造成的恐慌问题。HPV阳性患者可以做一个甲基化检测，如果是甲基化非常低（△Cp值大），那告诉病人你不用紧张，你可以延长你的筛查周期;如果甲基化比较高（△Cp值小），我们会采取更积极点的处理方式。

（2）宫颈腺癌发病率确实比以前高了，也可能和我们检出手段有关系，那甲基化更利于宫颈腺癌的检出，减少它的漏诊;

（3）三型转化区妇女;

（4）临床上可能更多的用于年轻女性未生育的女性CIN2治疗的分流。如果报告CIN2，病变也比较局限，我们做一个甲基化的检测，如果甲基化△Cp值比较高，这部分病人会选择进行更保守一点的处理，而不是去做LEEP或锥切。

六、小结

PAX1基因甲基化检测解决临床问题：HPV持续感染恐慌问题、宫颈腺癌漏诊、三型转化区漏诊、年轻未生育女性CIN2治疗分流、宫颈癌治疗过程检测困扰、手术/随访。

PAX1甲基化检测能更广泛地应用于宫颈癌临床筛查，更加精准地对高危型HPV感染的患者进行管理，一方面避免不必要的恐慌，另一方面也加强对真正有风险的患者的诊治，有非常重要的临床价值。甲基化基因检测能够对年轻、未生育的女性CIN2治疗进行分流，解决HPV持续感染的恐慌问题，减少宫颈腺癌的漏诊等。

①王建六教授 《PAX1甲基化在宫颈癌筛查中的应用》

②崔宝霞教授 《PAX1在宫颈癌筛查中的应用》