微型化非水滴定法在普卢利沙星药物含量中的检测分析

刘秀清 任春晓

（黑龙江省药品审核查验中心，黑龙江 哈尔滨 150090）

普卢利沙星是新型的抗菌类药物，隶属氟喹诺酮类，能够对肠球菌等浅表性皮肤感染进行治疗，当前测定药物含量的方式众多，扫描、光度法等均包含其中。上述方式虽然比较准确，但花费时间较长，对仪器同样具有较高精度，不利于生产期间的质量测定。因为普卢利沙星为一类有机含氮化合物，水溶液以碱性展现出来，非水介质碱性过强，能够开展滴定剖析。微型定量对实验进行分析，能够将实验装置简化，将试剂用量减少，节约更多的费用与时间，将污染减少。鉴于此，研究借助微型化非水滴定法对普卢利沙星片药物中的含量进行测定，对实验的精密度与准确度进行评价。

1 资料与方法

1.1 仪器试剂：电子分析天平（上海，型号：FA1004），磁力搅拌器（武汉，型号：DF-101S），电热恒温干燥箱（北京），超声仪（上海，型号：SK2200H），玻璃电极（姜堰市）。饱和甘汞电极，冰乙酸、结晶紫，原料药是分析纯，实验用水是双蒸水，指标剂0.1mol/L高氯酸滴定液配制按对应标准实施[1]。

1.2 检测方法：1组采用微型化滴定法检测，取天平称取需检验的药品0.1g，将其与0.1mol/L高氯酸滴定液滴定相溶，对对应电位进行记录，滴定数据借助空白试验来校正。2组运用常量滴定法测定，取天平对需检验的药品0.65g称重，与250mL冰醋酸相溶，滴定用0.1mol/L高氯酸滴定液，统计电位数据，借助空白试验对滴定数值进行矫正。

1.3 确定滴定终点：准确取出0.3g待检药品，与50mL冰醋酸相溶，并加入1滴结晶紫指示液，滴加0.1mol/L高氯酸滴定液，指示可用玻璃电极，参比电极是饱和甘汞电极，经对滴定体积与消耗的滴定能够体现用药的电位和颜色变化，滴定结束后，制出E-V曲线，能够判断是否出现突跃方面的问题。

2 药品杂质控制方法

2.1 薄层色谱法：薄层色谱是半定量方式，虽然这种方式精密度低于高效液相色谱法，但检查物质时跨度较大，显斑时主要是紫外、显色法，不同显色剂能够用在官能团鉴别。一般杂志检查法记载多种显斑方式，无论是吸附加或是分配色谱，都容易实现。不同颜色杂质比较清晰，方法比较简单且方便实施，是一种良好的杂质检验方式[2]。但薄层色谱具有诸多影响因素，不管是方法还是日常检验均需注意灵敏度、比移植、分离效能等。

2.2 高效液相色谱法：高效液相色谱法具有较高灵敏度，定量重现性与耐用性较好，特别是对同锡类物与降解产物具有良好的分离效果，但当前多数反相柱器，于相同色谱柱上，众多极性物质不会保留在柱上，和溶峰保留时间一致，说明峰面积稳定度不够，数据容易出现错误，极性物质比主成分小的，柱上难以洗脱，保留时间较长。紫外吸收系数过小，吸收部位差值较大运用主成分吸收峰波检测时，容易致使数据错误，甚至无法检出，若运用含量测定方式，容易产生物料不平衡，需考虑分离度、理论板数、准确度。

2.3 气相色谱法：要求和相同高度的相色谱法一致，但考察系统适用性，适当对柱长进行改变，对固体液的浓度进行改变，改善载气流速，重视柱温。分离度不佳时，可借助程序升温，应用毛细管柱时，需对分流比进行考察[3]。

2.4 荧光分光光度法：荧光杂质较高，发射长处荧光强度的控制可借助激发波长下控制，可运用荧光标记法，盐酸爱沙布托中荧光标记试剂可用氨基丁醇来标记，借助激发光，检测发射光强度。

3 观察指标

①检测精密度进行比较；②稳定性试验比较。

4 结果

4.1 精密度测定：精密取出相同批次的普卢利沙星原料药，分别运用常量和微型化方式重复测定6次，常量法测定数据平均值95.8%，相对标准偏差0.8%。微型化方式精密度和常量法数据平均值99.4%，差异无统计学意义（P>0.05），详见表1。

表1 精密度测定

4.2 稳定性试验：精密选相同批次的普卢利沙星原料药0.3g，置放在100mL容量瓶，并添加合理的冰乙酸，经超声溶解达刻度稀释，于不同时间段间隔取出溶液，运用高氯酸标准液测定，对间隔时间的测定数据进行分析，0~5h内众多数据均差异不明显（P>0.05）。

5 讨论

喹诺酮类用药是最近几年发展迅速的抗菌药物，抗菌作用较强，结构简单，且用药方便，其与常用抗菌药物没有较差耐药性，合成工艺稳定，疗效价格高，受世界各国重视与关注，发展为开发与应用广泛的品种[4]。当前，世界上市的药物品种已有几十个，为抗感染用药中开发最活跃的领域。药物化学发展下，人们经计算机辅助用药设计与对用药的靶向作用，能够将药物的深度与广度延伸，发展前景良好。普卢利沙星隶属生物碱盐类，水溶液会以弱碱性展现出来，很难运用水滴定法测定，非水介质中冰乙酸酸性，碱性会增强[5]。建立在这基础上，有必要运用高氯酸充当滴定剂，结晶紫指示剂情况下滴定，终端物是酸性高氯酸盐。结晶紫于较强酸性溶液中显示为绿色，pH显示为蓝色，pH＞3显紫色，能够对滴定终点反应进行判定。微型滴定应用的装置能够在酸碱滴定中应用，应用范围广泛，常量递进的滴定管携带转移不够方便，仅供实验操作使用，不能在现场进行测定。加上常量递进法使用的原料过大，不够环保，会增加成本，终点判定可遵循电位法，并结合指示剂颜色演变进行观察，熟悉掌握颜色变化，能够按照指示剂颜色发展来测定滴定终点。

本项研究中，两种方法所测定的准确度、精密度较高，偏差小，表示没有精密测量仪的情况下，药品含量的测定用微型化非水滴定法实施，不仅操作简单，也是比较实用的控制质量的方式。氟喹诺酮类用药中，普卢利沙星为一类水溶液，呈弱碱性生物碱盐，水滴定法很难发挥良好的测定效果，但此用药于冰乙酸酸性非水物中碱性较高。按照上述实施，能够将高氯酸充当滴定剂，在制作结晶紫指示剂基础上滴定，获取重点产物，酸性高氯酸盐，结晶紫添加强酸性溶剂呈绿色，pH=2时呈蓝色，pH＞3时，呈紫色，所以，可将结晶紫充当判定反应的滴定终点。研究运用的微型滴定装置对酸碱滴定比较适合，应用范围甚广，常量滴定装置过多，滴定管等诸多仪器，但不容易携带，比较适合实验室操作，不方便现场检验，加上常量滴定法需过多剂量的原料用药，存在污染较大，成本过大。非水滴定法重点颜色比较复杂且容易多变，不同实验人需用不同厌恶感受和描述，重点判定数据需以电位法充当判定指标。熟练掌握指示剂颜色变化的同时将其和指示剂颜色变化联合，经观察指示剂颜色变化对滴定终点进行评估，表示无精密测量仪器能够运用微型化非水滴定法测定了解的药品含量。

综上所述，微型化非水滴定法是比较安全、可行的质量控制方式，应用效果好。