添加湿态发酵饲料对三黄鸡育雏期生长性能、免疫功能、血清抗氧化的影响

■袁汝喜 沈水宝 吴克宁 韦晓芳 雷丽莉 张淑芳 章岳军

（广西大学动物科学技术学院，广西 南宁 530000）

育雏是三黄鸡养殖中最为重要的环节之一，三黄鸡育雏期免疫器官、肠道及肠道菌群发育尚不够成熟、稳定[1]；消化腺不发达，消化能力弱[2]；极易受到外界病原体的侵害，造成生病或死亡，直接影响着经济效益。为防止雏鸡发病，通常在雏鸡开口阶段就饲喂治疗型抗生素[3]。但抗生素的滥用除了引起耐药性问题，更严重影响了肠道微生物的平衡，从而影响免疫器官的发育，造成鸡自身抗病力下降[4]，对后期生产造成不可逆影响[5]，形成恶性循环。

日粮发酵后降低了抗营养因子和毒素，将大分子营养物质降解为小分子物质利于消化吸收[6-9]，可提高动物免疫力、预防疾病。湿态发酵饲料保留了日粮中活性有益菌、消化酶、维生素等，并富含活性小肽、氨基酸、免疫增强因子、促生长因子等活性物质，可使肠道有益菌群生长并定植为优势菌，对提高抵抗病原体感染的能力有着重要的作用[10]，一定程度地减少了抗生素的使用[11]。

一些研究表明发酵饲料热烘干大大降低了有益菌的活性，损失了有益发酵代谢产物，增加了生产费用，最终使用成本提高。

本试验旨在研究添加湿态发酵饲料对育雏期三黄鸡生长性能、免疫功能、血清抗氧化等指标的影响，为育雏期三黄鸡添加湿态发酵饲料提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验动物与设计

选取健康、体重无显著差异的1日龄三黄鸡雏鸡400 只，随机分为5 组，每组4 个重复，每个重复20 只鸡。对照组饲喂无发酵饲料的基础饲粮（F0 组），基础饲粮参照NRC（1994）[12]营养需要配制；试验组饲喂在基础饲粮中分别添加10%（F10 组）、15%（F15 组）、20%（F20 组）和25%（F25 组）湿态发酵饲料的试验饲粮。试验期42 d，发酵饲料由广西大富华农牧饲料有限公司提供。基础日粮组成见表1，营养水平见表2。

表1 基础日粮组成(风干基础，%)

表2 饲粮发酵前后营养水平比较（风干基础，%）

1.2 饲养管理

试验期间肉仔鸡自由采食、充足饮水，免疫接种（见表3）、光照、通风均按照广西富凤农牧集团饲养管理规程进行。

表3 富凤三黄鸡育雏期基础免疫程序

1.3 测定指标及方法

1.3.1 生长性能

每日观察并记录各组投料、剩料量，计算每只鸡的平均日采食量，每日填写饲养日记。

于1日龄和42日龄每个重复进行个体空腹称重，统计试验期内的采食量，计算各组的平均体重（ABW）、平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、料重比（F/G）。

1.3.2 血清生化、抗氧化指标、AI-H5-11、AI-H5-12、AI-H9N2、AI-H7N9、ND抗体的检测

42日龄鸡空腹，每个重复随机抽取1只鸡，每只翅下静脉抽血5 mL，静置30 min，用离心机4 000 r/min离心5 min分离血清，置于干冰中保存备用。

采用ELLSA 测定血清中总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、免疫球蛋白G(IgG）、免疫球蛋白A(IgA）、免疫球蛋白M(IgM）、尿素氮（UN）、丙二醛（MDA）含量、总抗氧化能力（T-AOC）以及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活力。

AI-H5-11、AI-H5-12、AI-H9N2、AI-H7N9、ND抗体检测方法如下：于微量血凝板的每行每孔加入生理盐水50 μL，每行第1孔加入待检血清50 μL，用微量移液器混匀后吸出50 μL加入第2孔，混匀后吸出50 μL加入第3孔，以此类推，稀释至第11孔，吸取50 μL弃去。第12孔不加血清。每行1～12孔加入浓度为4个血凝单位的抗原，每孔50 μL；每行1～12孔加入1%红细胞，轻轻振荡，37 ℃下作用15-20 min，判定血凝抑制效价。

1.3.3 免疫器官指数

42日龄时，每个重复随机选取健康鸡1只，屠宰后分离脾脏、胸腺和法氏囊并称重，测定免疫器官指数。

免疫器官指数（mg/g）=免疫器官重/活体重

1.4 数据处理

数据处理与分析采用SPSS 20.0统计软件的oneway ANOVA 进行显著性分析，结果用“平均值±标准误”表示，以P<0.05 作为差异显著性判断标准，以P<0.01为差异极显著判断标准。

2 结果与分析

2.1 添加湿态发酵饲料对三黄鸡雏鸡阶段生长性能的影响（见表4）

表4 添加湿态发酵饲料对三黄鸡雏鸡阶段生长性能的影响

由表4 可知，与F0 组相比，F10、F15、F20、F25 组体重、平均日增重均有所提高，但差异不显著（P>0.05）；平均日采食量各组均显著提高（P<0.05），其中F25组最高；料重比F20组最低（P<0.05）。

2.2 湿态发酵饲料对三黄鸡雏鸡阶段免疫器官指数的影响（见表5）

表5 湿态发酵饲料对三黄鸡雏鸡阶段免疫器官指数的影响（mg/g）

由表5 可知，随着湿态发酵饲料添加比例的提高，各组胸腺指数和法氏囊指数有升高的趋势，这说明湿态发酵饲料对机体的免疫机能有一定的增强作用。

2.3 添加湿态发酵饲料对三黄鸡雏鸡阶段抗体水平的影响（见表6）

表6 添加湿态发酵饲料对三黄鸡雏鸡阶段抗体水平的影响（Log2）

由表6 可知，F20 组抗体水平均高于F0 组，其中F20组ND抗体水平及F25组AI-H7N9抗体水平较F0组差异显著（P<0.05），较高的抗体水平也能对雏鸡提供更好的临床保护。

2.4 添加湿态发酵饲料对三黄鸡雏鸡阶段血清生化指标的影响（见表7）

表7 添加湿态发酵饲料对三黄鸡雏鸡阶段血清生化指标的影响

由表7 可知，随着湿态发酵饲料添加量的增加，各组血清生化指标变化很大。与F0 组相比，其中F20、F25 组ALB 差异极显著提高（P<0.01），其余各检测项目也有类似情况。

2.5 添加湿态发酵饲料对三黄鸡雏鸡阶段血清抗氧化指标的影响（见表8）

表8 添加湿态发酵饲料对三黄鸡雏鸡阶段血清抗氧化指标的影响

由表8可知，F15、F20、F25组MDA含量显著降低（P<0.05）；F20 组的SOD 含量显著高于F0 组（P<0.05）；F25 组的GSH-Px、CAT、T-AOC 含量显著高于F0组（P<0.05）。

3 讨论

3.1 添加湿态发酵饲料对三黄鸡育雏期生长性能的影响

生长性能反映着鸡群的营养和健康状况。有研究表明：饲料发酵后乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌的数量增加极显著，发酵将大分子营养物质降解为小分子物质利于消化吸收，弥补了三黄鸡育雏期消化系统发育不完善的问题，阻碍了沙门氏菌等有害菌的定植[13]，对雏鸡有促生长作用[14]；饲料发酵产生的有益小分子酸的含量显著提高，降低pH[15]，抑制有害菌的生长，改善肠道健康[16]；酸香的气味可以提高采食量[17]。本试验结果与以往研究结果相似，添加湿态发酵饲料可以显著提高平均日采食量，F20、F25组料重比显著降低（P<0.05）。

3.2 添加湿态发酵饲料对三黄鸡育雏期免疫功能的影响

脾脏（外周免疫器官）是血管通路上的重要过滤器官，含有大量的淋巴细胞、树突状细胞和巨噬细胞，是细胞免疫和体液免疫应答的重要部位；胸腺、法氏囊（中枢免疫器官），二者是T、B 淋巴细胞发育、分化和成熟的主要场所[18]。一般认为免疫器官指数的变化可间接表明机体的免疫状况。本试验结果表明，与F0 组相比，F20、F25 组法氏囊指数显著增高（P<0.05）；F20 组胸腺指数显著高于F0 组（P<0.05）；F20组ND 抗体水平显著高于F0 组（P<0.05）；F25 组AIH7N9 的抗体水平显著高于F0 组（P<0.05），具有促进作用，对畜禽阻挡病菌入侵发挥重要作用[19]，这与Naji等[20]、Wu等[21]的研究结果相似。

免疫球蛋白在血液中的含量是反映机体免疫功能的重要标志。IgG是动物血清中含量最高的免疫球蛋白，是体液免疫应答最主要的抗体，能够持续地发挥抗病毒、抗毒素以及抗菌的免疫学活性，多在动物机体自然感染或者人工免疫后产生；IgM 含量较少，是动物机体接触抗原后产生的最早的免疫球蛋白，主要由B淋巴细胞和脾脏产生；IgA在血清中含量较少，其主要参与黏膜免疫[22]。本试验表明，与F0 组相比，F20、F25 组血清中IgM、IgG 含量极其显著的提高（P<0.01），IgA的含量显著增加（P<0.05）。综合分析，本试验中添加湿态发酵饲料对三黄鸡雏鸡产生的免疫性能优于F0 组，明显增强机体免疫性能和抗病力，提高雏鸡对环境的适应能力，与徐辉等[23]、阮栋等[24]、张宝荣等[25]、刘淑娇等[26]研究结果一致。血清IgM和IgG水平的升高也可能与发酵过程中形成的小肽[27]或者益生菌刺激与活化肠黏膜有关的淋巴组织诱发其生成淋巴细胞来调节机体的免疫应答有关[28]。

3.3 添加湿态发酵饲料对三黄鸡育雏期血清生化和抗氧化指标的影响

血清白蛋白和总蛋白等指标可以反映动物机体蛋白质利用情况和氨基酸的代谢水平[29]。总蛋白和白蛋白的含量与机体的营养状况、蛋白质的代谢密切相关，其含量的增加，表明肝脏中蛋白质的代谢水平增强。本试验结果表明，添加湿态发酵饲料可以提高肉鸡血清GLO、TP和ALB水平，表明发酵饲料可以使机体代谢活动旺盛，促进蛋白质的沉积。这与胡虹等[30]、刘辉等[31]的研究结果一致。

机体总抗氧化能力降低常常导致各种疾病的产生[32]。SOD能将超氧阴离子自由基O2-·快速转化为分子氧和过氧化氢[33]，是动物体内清除自由基的第一道防线；GSH-Px和CAT转化为水和氧气[34]，是动物体内清除自由基的第二道防线。T-AOC 含量上升表明机体整体抗氧化能力提高[35]。生物体内的脂质和自由基会发生氧化反应生成MDA，MDA 会对线粒体关键酶的活性、线粒体呼吸链复合物造成影响。MDA的含量越高说明细胞的损伤程度越高，抗氧化能力越弱[36]。

F15、F20、F25 组中T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT的含量均高于F0 组，各组MDA 含量均低于F0 组，说明总抗氧化能力显著提高，这与Li等[37]研究结果相似。

4 结论

①育雏期三黄鸡添加湿态发酵饲料，可提高雏鸡的采食量，提高蛋白质的代谢水平，降低料重比。

②育雏期三黄鸡添加湿态发酵饲料，可使法氏囊指数、胸腺指数显著提高；免疫球蛋白显著提高；ND、AI-H7N9的抗体水平显著提升，明显增强机体免疫性能和抗病力，提高雏鸡对环境的适应能力。

③育雏期三黄鸡添加湿态发酵饲料，可使总抗氧化能力显著提高。