CTCs、ProGRP、NSE在小细胞肺癌诊断及预后评估中的临床价值

贾万理，杨 阳△，晋 婕

1.西安高新医院输血科，陕西西安 710075；2.西安金域医学检验所有限公司，陕西西安 710075

肺癌是临床上常见的起源于支气管黏膜或支气管腺体的恶性肿瘤。在我国，肺癌的发病率和死亡率均位居各类癌症之首，而且呈逐年上升的趋势[1]。大部分肺癌为非小细胞肺癌，只有10%～15%的肺癌为小细胞肺癌[2]。小细胞肺癌具有低分化、高复发、高转移、预后差、生存期短等特点，患者确诊时大多已发生转移[3]。因此，早发现、早治疗对延长肺癌特别是小细胞肺癌患者生存期具有重要意义。循环肿瘤细胞(CTCs)是指从原发肿瘤病灶或转移灶脱落进入外周血的肿瘤细胞，是目前肿瘤研究中最有前景的项目之一[4]；胃泌素释放肽前体(ProGRP)是胃泌素释放肽的前体结构，体内水平稳定，是小细胞肺癌的诊断标志物之一[5]；神经元特异性烯醇化酶(NSE)存在于神经元和神经内分泌细胞中，对小细胞肺癌手术治疗效果和预后评估具有重要临床价值[6]。本研究主要探讨CTCs、ProGRP、NSE在小细胞肺癌诊断及预后评估中的临床价值，旨在为小细胞肺癌的早期诊断及预后评估提供新的思路。

1 资料和方法

1.1一般资料 采用回顾性方法，收集2017年1月到2018年6月西安高新医院收治的102例小细胞肺癌患者作为肺癌组，年龄30～80岁、平均(56.2±8.5)岁，男64例、女38例。纳入标准：(1)初次确诊为小细胞肺癌；(2)经病理学、影像学核实；(3)预计生存期不低于3个月；(4)临床资料完整，患者依从性高。排除标准：(1)严重肝、肾功能不全者；(2)合并严重心脑血管疾病者；(3)合并其他恶性肿瘤者；(4)合并其他严重肺部疾病者；(5)感染性疾病者；(6)妊娠期或哺乳期妇女。收集西安高新医院收治的同期100例肺部良性肿瘤患者作为良性组，年龄30～80岁、平均(56.1±8.7)岁，男62例、女38例。良性组术后均经病理切片核实确诊为肺部良性肿瘤，无其他恶性肿瘤史。另收集西安高新医院同期100例体检健康者作为对照组，年龄30～80岁、平均(55.9±8.3)岁，男62例、女38例。3组研究对象的年龄、性别构成差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究符合伦理学标准且经医院伦理委员会批准通过，所有研究对象均签署知情同意书。

1.2方法 所有研究对象空腹8 h以上抽取静脉血2管。一管(ACD枸橼酸钠抗凝)5 mL，颠倒混匀数次，立即进行检测；另一管(红色无添加剂试管)3 mL，颠倒混匀数次,静置20 min后，以3 000 r/min离心10 min，取上清液(血清)待检。抗凝血用于CTCs检测，先采用免疫磁珠负向富集法捕获CTCs，再采用免疫荧光与原位杂交结合的方法进行检测，最后采用Cell Search系统进行分析。采用罗氏Cobas e602全自动电化学发光免疫分析仪及其配套试剂检测血清ProGRP、NSE水平。所有步骤由同一检验师按照试剂盒说明书进行操作，室内、室间质评均在控。

2 结 果

2.13组CTCs、ProGRP、NSE水平比较 肺癌组CTCs、ProGRP、NSE水平高于良性组及对照组，良性组高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 3组CTCs、ProGRP、NSE水平比较

2.2CTCs、ProGRP、NSE对小细胞肺癌的诊断效能分析 ROC曲线结果显示CTCs、ProGRP、NSE联合检测诊断小细胞肺癌的曲线下面积(AUC)为0.932，灵敏度为92.1%，特异度为90.0%，均优于CTCs、ProGRP、NSE单独检测的AUC、灵敏度和特异度，见表2和图1。

图1 CTCs、ProGRP、NSE诊断小细胞肺癌的ROC曲线

表2 CTCs、ProGRP、NSE对小细胞肺癌的诊断效能分析

2.3小细胞肺癌预后影响因素的Cox回归模型分析 Cox回归模型分析结果显示，临床分期为广泛期、有淋巴结转移及CTCs、ProGRP、NSE水平升高是小细胞肺癌预后不良的独立危险因素(P<0.05)，见表3。

表3 小细胞肺癌预后影响因素的Cox回归模型分析

3 讨 论

肺癌是全球发病率和致死率最高的恶性肿瘤，按组织细胞学可分为非小细胞肺癌和小细胞肺癌。其中小细胞肺癌仅占20%左右，但其恶性程度较高，进展较快，早期阶段就容易发生转移，预后较差[8]。临床上对中、晚期小细胞肺癌以化疗为主，尽管其对化疗药物比较敏感，但极易造成继发性耐药[9]。因此，早发现、早干预对改善患者预后尤为重要。

CTCs检测是目前最新的“液体活检”技术,CTCs是由实体肿瘤病灶中转移出来而进入血液系统、淋巴系统的细胞，能够反映肿瘤的发生、发展情况以及可能介导肿瘤转移[10]。王莹等[11]的报道指出，CTCs在小细胞肺癌早期诊断、疗效评价、预后评估、复发检测上具有重要作用。胃泌素释放肽(GRP)可刺激胃内G细胞分泌胃泌素，收缩平滑肌，促进自分泌或细胞间相互作用而诱发癌细胞增殖、分化。ProGRP作为GRP前体，广泛分布于肺组织神经内分泌细胞及非胃窦组织中，半衰期长，稳定性强，更能反映肺癌的临床情况[12]。NSE属于神经源性蛋白，能够参与磷酸肌醇的代谢，影响丙酮酸进入线粒体的速度，导致肺泡上皮细胞的异常代谢,促进肿瘤细胞增殖[13]。本研究结果显示，CTCs、ProGRP、NSE水平在小细胞肺癌中升高，说明这些指标均参与了肿瘤的发生、发展。采用ROC曲线分析CTCs、ProGRP、NSE单独和联合检测对小细胞肺癌的诊断效能，不难发现，3项指标联合检测可进一步提高诊断效能，AUC为0.932，灵敏度和特异度分别分别为92.1%、90.0%，诊断效能比较理想。

小细胞肺癌按临床分期可分为广泛期和局限期。经过治疗的局限期小细胞肺癌生存期为1～3年，而广泛期不足1年[14]。相比较而言，广泛期小细胞肺癌预后较差。淋巴结转移是肺癌转移的主要途径，也是影响患者预后的重要因素之一，小细胞肺癌容易发生转移，一旦发生转移，其治疗难度增大，对预后影响较大[15]。本研究利用Cox回归模型分析小细胞肺癌预后的影响因素，结果显示，临床分期为广泛期、有淋巴结转移及CTCs、ProGRP、NSE水平升高是小细胞肺癌预后不良的独立危险因素。这与上述理论一致，在唐兴等[16]、秦文燕等[17]的报道中也有体现。本研究存在不足之处，如样本量较小，且为回顾性研究，尚待日后加大样本量进行更深入的研究来佐证结论的正确性，以期为临床诊疗工作提供新的思路。

综上所述，CTCs、ProGRP、NSE水平在小细胞肺癌患者中明显升高，且与患者预后密切相关，3项指标联合检测有助于患者早期诊断及预后评估，值得临床推广应用。