一例多种病原混合感染导致肥育猪呼吸道病综合征的诊治

葛生虎，齐晓亮，张 智

（1.河北铭诸生物科技有限公司，河北 邢台 054000；2.邢台市农业农村局动物疫病预防控制中心，河北 邢台 054000）

随着生猪规模化养殖密度不断提高，猪呼吸道病综合征（Porcine respiratory disease complex,PRDC）在猪场十分常见，该病是由潜在发病原（如免疫抑制性病原感染）、继发性病原（如常见细菌病原和病毒）、较差的饲养管理水平和环境应激等多种负面因素共同影响而引起[1]。该病多发于保育和肥育阶段猪群，多发于冬季和春季。其临床症状主要包括发热、气喘、呼吸困难、咳嗽和厌食等，发病较轻时病死率较低，但会影响料重比，继而造成“隐性”经济损失；发病较严重时，其病死率较高，可达20%～90%，给猪场造成严重的经济损失[2-3]。

大量文献表明，猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪链球菌和猪肺炎支原体等是导致猪呼吸道病综合征的常见原发性病原，其中PRRSV可感染猪肺泡巨噬细胞，使病猪出现严重的免疫抑制，从而继发感染其它病原并引发疾病[4-5]。2021年11月初，河北邢台某猪场肥育猪出现咳嗽、气喘和呼吸困难等症状，且病死率较高。根据诊断结果，笔者制定系列防控措施，最终使该病得到有效控制，现对诊断与防控过程进行介绍，旨在为肥育猪呼吸道病综合征的防控提供科学依据。

1 发病情况

河北邢台某猪场存栏肥育猪约300头，该场肥育猪群于2021年11月初出现疑似呼吸道病综合征，其临床症状主要包括呼吸困难、咳嗽和气喘等；部分发病严重猪群（最终死亡）皮肤发绀，口鼻处有血液泡沫；驱赶也不愿动，且体温上升（＞41 ℃）。该场肥育猪群发病率为20%左右，病死率达40%；猪舍内平均温度为20 ℃左右，卫生情况较差，且消毒不彻底。全部猪群免疫接种过猪瘟、猪伪狂犬病和口蹄疫疫苗；虽然养殖户对发病猪群进行抗生素治疗，但效果不佳，且猪群发病情况有严重趋势。

2 剖检病变

选择濒临死亡的肥育猪3头，可见猪只皮肤发绀，剖检可见猪气管严重充血，且有脓性痰液；3头猪出现明显的大叶性肺炎，肺部切面有淡黄色胶冻状液体渗出（图1A）；胸腔积液较严重，且胃底部均有弥漫性出血或溃疡，胃肠道没有饲料残渣。病猪心冠脂肪堆积严重（图1B），肝脏肿大瘀血（图1C），脾脏肿大、梗死（图1D）。此外，我们还发现病猪肾脏瘀血，且膀胱有弥漫性出血或点状出血。根据病猪临床症状及病理剖检结果，我们认为猪群发病不是由单一病原感染引起，遂取病猪扁桃体、脾脏、肺脏、胸腔积液和气管黏液等样品进行实验室检测。

图1 肥育猪病理剖检结果

3 实验室诊断

3.1 细菌性病原检测结果

分别无菌切取少量3头猪各组织样品（气管黏液、胸腔积液、肺脏和脾脏）后混匀，加入适量灭菌生理盐水，高速、低温匀浆后用灭菌接种环蘸取少量上清液接种于TSA-YE培养基（含5%小牛血清及1.5%烟酰胺腺嘌呤二核苷酸），按照需氧和厌氧培养方式将其放置于37 ℃恒温箱内培养24 h，其后观察细菌生长情况。根据细菌菌落形态挑选单一菌落进行革兰氏染色、镜检；同时使用PCR技术对分离菌株16S rRNA基因序列进行扩增、测序与分析。结果发现：3个平板上均出现菌落A，其菌落形态为表面光滑、灰白色的圆形菌落；革兰氏染色为短杆菌，且两端钝圆，属于革兰氏阴性菌，进一步PCR扩增、测序结果表明该菌株为胸膜肺炎放线杆菌；2个平板上出现菌落B，其形态为光滑、白色半透明的湿润菌落，革兰氏染色发现其为球杆菌，且为革兰氏阴性菌，进一步PCR扩增、测序结果表明该菌株为猪支气管败血波氏杆菌；2个平板出现菌落C，其形态为表面光滑、湿润的半透明灰白色菌落，属于革兰氏阴性杆菌，进一步PCR扩增、测序结果表明该菌株为巴氏杆菌。

3.2 药敏试验结果

为确定分离菌株对常见抗生素耐药性，也为临床用药提供科学依据，随机挑选本文分离的胸膜肺炎放线杆菌、猪支气管败血波氏杆菌和巴氏杆菌各5株，选用14种常见抗生素药敏纸片（杭州天和微生物试剂有限公司产品）用于细菌耐药性试验，其操作步骤和评判标准严格参考产品说明书进行。结果如表1所示：同一种细菌不同菌株对抗生素敏感性存在差异，其中胸膜肺炎放线杆菌对头孢拉定、替米考星、青霉素和阿莫西林等耐药率均低于50%；猪支气管败血波氏杆菌对链霉素、卡那霉素、替米考星和四环素等耐药率均低于50%；而巴氏杆菌对替米考星、阿莫西林、氟苯尼考和环丙沙星耐药率均低于50%。

表1 不同分离菌对常见抗生素耐药性和敏感性统计分析结果 %

3.3 病毒性病原检测结果

取病料组织样品（脾脏、肺脏、淋巴结等）混匀，高速匀浆后取上清液用于DNA/RNA基因组提取，其后将基因组中RNA反转录为cDNA。使用商业化qPCR病原检测试剂盒对核酸中多种DNA病毒[PCV2、猪伪狂犬病病毒（PRV）]和RNA病毒[PRRSV和猪瘟病毒（CSFV）]进行检测，结果发现3头病猪来源样品均未检出PRV、PCV2和CSFV核酸，但有2份样品检出PRRSV，且CT较低，说明其病毒载量较高。

4 结果判定

根据病猪发病症状、病理剖检变化结合实验室诊断结果，可判定该场肥育猪出现呼吸道病综合征是由细菌和病毒混合感染所致。猜测可能是猪群感染PRRSV后受免疫抑制，继而感染其它细菌性病原（胸膜肺炎放线杆菌、猪支气管败血波氏杆菌和巴氏杆菌），由此多种病原混合感染导致猪群出现严重疾病，并给猪场造成严重经济损失。

5 防控方案及效果

5.1 紧急隔离与免疫治疗

将发病猪群和假定健康猪群进行隔离，将猪舍内外仔细打扫后使用消毒剂对猪舍进行全景消毒，保证各处消杀完全；在饲粮内添加20%含量磺胺甲氧嘧啶750 g/t、20%替米考星2 kg/t、20%氟苯尼考750 g/t、3倍麻杏石甘颗粒和2倍保肝护肾产品，同时在饲粮中添加适量优质益生菌和黄芪多糖等，连续用药5 d；对发病猪群肌肉注射阿莫西林注射液，每日1次，连续治疗3 d；对全部猪群免疫接种PRRSV活疫苗（CH-1R株）。

5.2 提高饲养管理水平

使用消毒剂每日对猪舍进行消毒，及时清除粪污，同时保证猪舍内温度适宜；实行严格的全进全出制度，生猪转栏后对栏舍进行消毒，使用火焰喷灯和消毒剂联合消杀，并使猪舍干燥至少1周后方可购入猪；需对购入的猪群进行病原检测，防止外界病原进入猪场；注意猪群饲养密度，禁止在猪场饲养犬、猫等动物，同时定期灭鼠；定期对猪群开展病原学或血清学监测，根据监测结果及时对猪群免疫接种疫苗或淘汰病猪。

该场实施以上方案3 d后猪群发病症状有所缓解，其采食量逐渐提高，同时不愿意动的病猪逐渐活跃；病猪咳嗽、皮肤发绀等症状有所缓解，不再出现病猪死亡现象；两周后回访得知，该场猪群发病得到有效控制，肥育猪生产成绩已恢复正常水平，说明该防治方案有效。

6 讨论

肥育猪抵抗力较仔猪和保育猪强，此类猪群发病多以混合感染为主，其中以病毒和细菌性疾病混合感染最为常见。此外，由于2020年后我国动物饲料中全面禁止添加抗生素，且养殖过程中应尽量“减抗或限抗”，这使得细菌性疾病的防治更为困难。猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒2型病在我国猪场十分常见，当猪群感染此类疾病且未得到有效治疗，病猪的抵抗力会下降，由此易感染其它病原，继而使猪群出现严重的呼吸道疾病，因此又称为呼吸道病综合征[7]。

可导致猪群出现呼吸道病综合征的细菌性病原种类繁多，其主要包括肺炎支原体、副猪嗜血杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、猪链球菌和巴氏杆菌等[8-9]。本文涉及到的案例中共分离到3种细菌，分别为猪胸膜肺炎放线杆菌、巴氏杆菌和猪支气管败血波氏杆菌，前两种细菌属于呼吸道病综合征的常见病原，虽然猪支气管败血波氏杆菌是导致仔猪出现萎缩性鼻炎的主要病原，但该病原感染肥育猪不会出现严重疾病。因此，笔者猜测该场猪群发病是由于PRRSV原发性感染，继发感染猪胸膜肺炎放线杆菌、猪支气管败血波氏杆菌和巴氏杆菌而引起。此外，由于不同细菌性病原对抗生素耐药率存在较大差异，为有效防治细菌性疾病，应先对致病菌进行分离、鉴定和药敏试验，以筛选对多种细菌相对敏感的药物用于治疗。本研究对3种细菌性病原进行药敏试验后，根据结果选择在饲粮中添加适当比例氟苯尼考、替米考星和磺胺甲氧嘧啶进行拌喂，同时进行对症治疗，最终取得较好的治疗效果。

对于此类疾病的防治，应采取“早发现、早诊断、早治疗”原则。该场出现疑似呼吸道疾病综合征后，当负责人得知传统抗生素治疗无法有效防控该病，便及时寻求专业猪病诊断中心帮助，以此对该病的致病性病原进行确诊。根据诊断结果，笔者对猪群进行针对性治疗，使得猪场病情得到有效控制，值得注意的是，本文采用的消毒剂对猪场进行全景消毒，取得较好的消杀效果，这十分有利于疾病的治疗与未来防控。