中药复方添加剂对生长肥育猪免疫功能和抗氧化能力的影响

2022-04-25王艳丰张丁华

养猪 2022年2期

王艳丰，张丁华

（河南农业职业学院牧业工程学院，河南郑州 451450）

近年来，随着我国规模化猪场快速发展，集约化程度越来越高，猪病也变得日趋复杂，新病不断涌现，老病呈现新形式，根本原因在于猪群免疫力低下。大量研究表明，猪群普遍存在免疫抑制性因素，如疾病因素、营养因素、药物因素、免疫因素、环境因素、应激因素、霉菌毒素等，其中猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、猪巨细胞病毒和霉菌毒素等被认为是引起猪产生免疫抑制的主要原因[1-2]。目前对猪群免疫抑制尚无有效治疗方法，主要是疫苗预防、对症治疗及防止继发感染等，但效果均不太理想，同时抗生素对免疫抑制性疾病效果甚微。

中药属于天然药物，含有多糖、苷类、生物碱类、有机酸类、挥发油等免疫活性成分，能增强机体细胞免疫和体液免疫功能[3-4]，将是今后防控猪免疫抑制性疾病的重要手段。全国兽用抗菌药使用减量化行动方案（2021—2025年）指出：要根据养殖管理和防疫实际，推广应用兽用中药等无残留的绿色兽药，替代部分兽用抗菌药品种，并逐步提高使用比例，实现畜禽产品生态绿色。鉴于此，本试验综合前期试验结果，选择在饲粮中添加不同比例补中益气中药，以生长肥育猪为研究对象，探究中药复方对生长肥育猪免疫功能和抗氧化能力的影响，以期为中药复方在生猪饲养中应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验药品与试剂

黄芪、党参、熟地、枸杞、板蓝根、山楂、当归、何首乌、甘草均购自禹州中药材专业市场。将上述中药按2∶2∶1∶1∶1∶1∶1∶1∶1比例，烘干粉碎制成100～200目超微粉作为中药复方备用。白细胞介素-2（interleukin-2，IL-2）、白细胞介素-4（interleukin-4，IL-4）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、丙二醛（MDA）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）等试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.2 试验动物及分组

试验地点为商丘市睢县某规模化猪场，试验时间为2020年8月25日至10月30日。将60头3月龄健康状况良好、体重相近的杜长大生长肥育猪随机分为5组，每组12头，分别为试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组、试验Ⅳ组和对照组。将各组猪进行分栏饲养，自由采食和饮水，免疫及消毒程序按猪场常规程序进行，预试期和正式试验期分别为7 d和60 d。试验正式期内，试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组分别在基础饲粮中添加0.5%、1.0%、1.5%、2.0%中药复方，对照组仅饲喂基础饲粮。

1.3 试验饲粮组成及营养水平

基础饲粮参照猪饲养标准（NY/T 65—2004）和NRC（2012）推荐的肥育猪营养需要进行配制，饲粮组成及营养水平见表1。

表1 试验基础饲粮配方及营养水平

1.4 免疫功能和抗氧化活性指标测定

试验结束后每组挑选3头猪前腔静脉采血，每头3 mL，然后以3 000 r/min离心10 min，分离血清于-20 ℃保存待检。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测猪血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）、细胞因子（IL-2、IL-4、IL-6）及抗氧化性能指标（MDA、T-SOD、CAT、GSH-Px）的水平，具体步骤按试剂盒说明书进行。

1.5 数据分析与统计

试验数据采用SPSS 19.0软件进行单因素方差分析和多重比较，结果以平均值±标准差表示，P<0.05表示差异显著，P＜0.01表示差异极显著。

2 结果与分析

2.1 中药复方对生长肥育猪血清免疫球蛋白含量的影响

由表2可见，与对照组相比，各试验组猪血清IgG、IgA、IgM含量均有不同程度提高，其中试验Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组猪血清IgG、IgA、IgM含量显著升高（P<0.05），而试验Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组间猪血清IgG、IgA、IgM含量差异不显著（P＞0.05）。

表2 中药复方对生长肥育猪血清免疫球蛋白含量的影响

2.2 中药复方对生长肥育猪血清抗氧化酶指标的影响

由表3可见，与对照组相比，各试验组GSHPx含量均显著提高（P<0.05），其中以Ⅳ组GSHPx含量最高；试验Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组的T-SOD和CAT含量均较对照组显著提高（P<0.05），Ⅲ组、Ⅳ组的MDA含量较对照组显著降低（P<0.05）；试验Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组间GSH-Px、T-SOD和CAT含量差异不显著（P>0.05）。

表3 中药复方对生长肥育猪血清抗氧化酶指标的影响

2.3 中药复方对生长肥育猪血清细胞因子水平的影响

由表4可见，与对照组相比，各试验组IL-2、IL-4含量均显著提高（P<0.05），其中以Ⅳ组IL-2、IL-4含量最高，Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组间IL-2、IL-4含量差异不显著（P>0.05）；试验Ⅳ组的IL-6含量较对照组显著提高（P<0.05），各试验组间IL-6含量差异不显著（P>0.05）。

表4 中药复方对生长肥育猪血清细胞因子水平的影响

3 讨论

3.1 中药复方对生长肥育猪血清免疫球蛋白含量的影响

动物机体免疫包括体液免疫和细胞免疫，免疫球蛋白是体液免疫应答的信号分子，由B淋巴细胞产生，主要包括IgG、IgA和IgM。血清中IgG、IgA、IgM是机体防御系统中的重要成员，是衡量机体免疫功能的重要指标[5]。大量研究表明，中药可提高机体血清中IgG、IgA、IgM的含量。研究发现饲粮中添加紫锥菊可显著提高保育猪血清IgG、IgA的含量，增强机体免疫功能[5]；以黄芪、板蓝根、益母草、党参、山楂、当归等组成的中药复方，可显著提高脾脏指数、血清IgG和IgA含量[6]；以杜仲、黄芪、紫苏、党参、山楂等组成的中药复方，可显著提高断奶仔猪血清IgG、IgM、IgA水平，且随着饲料中中药浓度的增加而增加[7]。本试验结果也表明，饲粮中添加中药复方，可显著提高猪血清IgG、IgA、IgM的含量，增强机体免疫功能。但也有报道在饲粮中添加中药后，猪血清IgG、IgM、IgA含量无显著变化，有的甚至出现IgG下降[6]，分析原因可能与添加的中药剂量、种类及配伍等有关。

3.2 中药复方对生长肥育猪血清抗氧化酶指标的影响

抗氧化酶系统具有清除活性氧自由基的功能，是维持动物健康的重要防线[8]。机体内的各种抗氧化酶相互合作，共同构成机体对抗自由基的第一道防线，其中以SOD、GSH-Px和CAT最重要[9]。SOD的主要作用是清除体内自由基，保护脱氢酶免受超氧自由基影响失活[10]。CAT、GSH-Px的活性及T-AOC均能够反映机体的抗氧化能力。MDA是脂质过氧化反应的稳定产物，具有很强的生物毒性，能破坏组织细胞完整性，其含量越高说明体内过氧化反应越强烈，细胞受到的氧化损伤越强[8]。大量研究表明，饲粮中添加中药可以提高猪CAT、SOD、GSHPx的活力，且能显著降低保育猪血清MDA的含量，提高猪抗氧化能力[6-10]。本试验结果也显示，中药复方各试验组GSH-Px、T-SOD和CAT含量均显著提高，并能显著降低生长肥育猪血清MDA含量。

3.3 中药复方对生长肥育猪血清细胞因子水平的影响

细胞因子在免疫应答与免疫调节中发挥重要作用，IL-2、IL-4、IL-6属于适应性免疫和促炎性细胞因子，当病原微生物入侵时，机体的免疫系统随即被激活，促使机体分泌细胞因子以清除病原微生物。IL-2能促进T淋巴细胞增殖与分化，诱导具有细胞毒样活力的杀伤细胞；IL-4由活化的Th2细胞产生，能促进B细胞增殖、分化、免疫球蛋白产生[11]；IL-6由各种类型的淋巴细胞和非淋巴细胞产生，可以维持抗原特异性免疫应答、参与宿主防御机制等[12]。研究发现，饲粮中添加1%和2%党参多糖均能显著提高仔猪血清IL-2、IL-4和IL-6含量[13]；在断奶仔猪饮水中添加3 g/L或6 g/L蒲公英水提物，均可显著提高IL-2、IL-6的含量[14]；在饲粮中添加50～100 mg/kg姜黄素，也可以显著提高IL-2、IL-6含量[15]。此外，中药复方也具有良好的效果。胡健等[16]用麦冬、冬青叶、银杏叶、益母草、艾叶、鱼腥草等组成的中药复方，以0.3%比例添加于饲粮中，可以显著提高IL-6含量，增强断奶仔猪的免疫能力和抗氧化功能。本试验结果也表明，中药复方可以提高猪血清IL-2、IL-4和IL-6含量。