食管癌中p63的表达及其与预后的关系

陈 瑶，赵学科，宋 昕，罗 宏，徐瑞华，魏梦霞，王 苒，陈亚杰,3，韩雪娜，吉佳佳，李留玉,3，杨媛啧，高社干，4，王立东

食管癌作为世界上最常见的恶性肿瘤之一，预后极差，5 a生存率仅10% 左右[1]。TNM分期是评估恶性肿瘤预后的金标准[1]，但也有其局限性，因此有必要寻找补充性的预后标志。虽然p53功能的丧失是食管癌发生的关键致癌步骤之一，但其突变通常被视为晚期事件，与p53表现出密切同源性的基因—p63的异常改变则被认为是食管癌发生的早期事件[2-4]。鉴于样本量小、随访时间不足等原因，鲜有研究提及p63表达在食管癌中的临床意义及对患者预后的影响。本研究初步探讨了p63与食管癌患者临床病理特征的相关性及其在预后评估中的价值,现报道如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象

回顾性分析了2006年至2016年郑州大学第一附属医院食管癌防治国家重点实验室食管癌和贲门癌临床诊疗、病理和随访信息数据库(1973年至2020年)中232例食管癌患者的资料。其中男195例，年龄(60.5 ± 9.1)岁；女37例，年龄(65.3 ± 6.4)岁。参考第6版UICC/AJCC制定的食管癌TNM分期标准。纳入标准：①病理诊断为食管癌；②有明确的p63阴、阳性的记录；③有明确的生存状态。

1.2 随访

从确诊日期开始，通过电话、村医和入户调查等方式进行随访。患者出院后第一年每3个月随访1次，之后每年随访1次。末次随访日期为2020年9月24日，其生存期是指确诊日期至末次随访日期或死亡(终点事件)。

1.3 统计学处理

采用SPSS 25.0对数据进行统计学分析。采用卡方检验分析不同p63表达食管癌患者的临床病理特征分布差异；采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线并进行log-rank检验；采用Cox比例风险回归模型进行单变量和多变量分析，以评估p63表达在食管癌患者预后中的意义。检验水准α=0.05，以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 p63表达在食管癌患者中的临床分布特征

表1示，232例患者中182例(78.45%)p63免疫反应阳性，只有50例(22.55%)为阴性。p63在饮酒的分布差异有统计学意义(P<0.05)，饮酒的患者中p63阳性所占比例高于阴性，差异有统计学意义(P=0.006)。而p63在性别、年龄、吸烟、淋巴结转移和临床分期上差异无统计学意义(P>0.05)。

表1 食管癌患者p63表达的临床特征分布 例 (%)

2.2 p63表达与食管癌预后的关系

图1示，p63阳性组中位生存期为3.977 a，p63阴性组为2.426 a，差异有统计学意义，提示p63阳性与食管癌患者较好的预后有关(P=0.023)。

图1 食管癌患者p63阳性与阴性的总生存率比较

2.3 食管癌患者预后影响因素分析

为了确定影响食管癌生存的相关因素，本研究采用Cox比例风险回归模型进行了单因素和多因素分析(表2)。单因素分析确定淋巴结转移(HR：1.591，95%CI：1.066～2.374)、临床分期(HR：2.024，95%CI：1.322～3.096)和p63 (HR：0.626，95%CI：0.416～0.941)与食管癌患者预后相关。在多因素分析中，临床分期(HR：2.024，95%CI：1.322～3.096)被保留为食管癌的独立预后因素。尽管单因素分析发现p63是影响食管癌患者生存的重要因素，但多因素分析结果不支持p63是一个独立的预测因子(P=0.240)。

表2 影响食管癌患者生存的单因素及多因素回归分析

3 讨论

p63基因位于3q27-3q29，包含15个外显子和两个启动子，编码多种不同亚型的p63蛋白，如TAp63α、TAp63β、TAp63γ等。p63是p53家族的成员，参与调节细胞增殖、分化、凋亡和其他关键细胞过程[5-6]。作为一种重要的转录因子，p63是表皮发育和上皮细胞分化的关键调节因子[6-7]。已有研究证实，p63在食管上皮的分化和形态发生中起重要作用[6]。Yang等[8]发现p63基因敲除小鼠表现出显著的发育缺陷，包括上皮分层异常等，表明p63对于食管等上皮干细胞的增生和生存具有重要的意义。多项研究报道，p63在多种人类癌症中过度表达，包括头颈癌、口腔癌、肺癌、宫颈癌和食管癌[9-12]。显然，p63在肿瘤发生中，尤其是鳞癌的发生中起着重要的作用。

近年来，越来越多的研究证明p63蛋白在食管癌的进展中起重要作用。Ye S等[13]的结果表明p63可能通过Akt信号通路调节细胞周期，在食管鳞癌的进展中发挥关键作用。Lee等[14]的研究表明p63通过激活β-catenin/c-Myc通路来调节食管鳞癌细胞的迁移和侵袭，因此，靶向p63可能成为食管鳞癌潜在的治疗策略。Xu等[15]发现食管基底样鳞状细胞癌中，p63高表达患者的生存预后明显优于p63低表达患者，从而提出p63可能是食管基底样鳞状细胞癌的重要预后标志物。

针对以往研究样本量小、随访时间短的不足，本研究对历时10 a之久的大样本食管癌病例展开了回顾性研究。尽管在多因素分析中，p63不是预后的独立影响因素，但通过单因素分析确定p63与食管癌患者预后相关，并结合生存曲线发现p63阳性组的预后明显优于阴性组。结果与相关文献报道一致[16]。

综上所述，虽然p63 的表达降低并不常见，但它对食管癌患者的预后有影响，且p63表达缺失提示预后不良，反映了其在生物学上的恶性潜能。p63有望成为判断食管癌预后的指标和潜在的治疗靶点。